收藏本站
《南京农业大学》 2010年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

Smad信号转导通路相关基因表达与湖羊高繁殖力关系的研究

徐业芬  
【摘要】:湖羊是世界著名的多胎绵羊品种,Smad信号通路中的很多信号分子与绵羊的生殖和卵泡发育有密切关系,参与调控绵羊排卵数、产羔数等多胎性状,为了探讨湖羊多胎与Smad信号通路的关系,我们利用RT-PCR技术首次系统检测了Smad信号通路中相关信号分子基因的组织表达谱,并进一步利用实时荧光定量PCR的方法研究了繁殖力较低湖羊(经产单羔:单羔组)和繁殖力较高湖羊(经产三、四羔:多羔组)与Smad信号转导通路相关基因在垂体和卵巢组织以及有腔卵泡中的表达差异,并分析了Smad言号通路中的有关基因表达量与排卵数的相关性。我们的研究结果提供了Smad言号通路有关基因在mRNA表达水平对湖羊排卵数的可能调控机理,同时为揭示湖羊高繁多胎机理和筛选影响湖羊多胎性状的特有候选基因提供了参考。 1.湖羊BMP/Smad言号通路相关基因组织表达特征 用RT-PCR法检测湖羊BMP/Smad信号通路中信号分子基因组织表达特征,结果成功克隆得到了BMP/Smad信号通路中BMP2、BMP4、BMP6、BMP7、BMP15、BMPRIA、BMPRIB、BMPRII、Smad1、Smad5、Smad4等信号分子基因部分cDNA片段,组织表达谱研究表明,BMP2、BMP4、BMP7、BMPRII、BMPRIA、BMPRIB、Smad1知Smad4基因在成年发情期湖羊母羊下丘脑、垂体、卵巢、子宫、输卵管、心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、肌肉组织中均有表达,而BMP6基因仅在成年湖羊母羊卵巢、输卵管、’肾脏、肌肉组织中有表达;Smad5在子宫、输卵管、肺脏和肌肉组织中没有表达;BMP15仅在卵巢组织表达,为卵巢组织特异表达基因。从结果看,BMP/Smad信号转导通路相关基因mRNA表达与湖羊垂体和卵巢功能可能有密切联系 2.高、低产湖羊垂体组织BMP/Smad信号通路分子基因表达差异及与排卵数相关性的研究 我们首次利用荧光定量PCR技术对湖羊BMP/Smad信号通路中信号分子基因(包括BMP蛋白家族基因BMP2、BMP4、BMP7; BMP受体基因BMPRIA、BMPRIB、BMPRII;细胞内Smad蛋白家族基因Smadl、Smad4、Smad5) mRNA在高繁殖力(经产三、四羔:多羔组)和低繁殖力(经产单羔:单羔组)湖羊母羊发情后24-36小时排卵时期在垂体组织中的表达水平进行分析。结果显示,多羔组卵巢排卵数极显著高于单羔组(P0.01);在垂体组织中,BMP2、BMP7、BMPRIA、BMPRII.Smadl知Smad4基因表达量在单羔组和多羔组垂体组织内没有显著差异(P0.05),但是,多羔组BMP4、BMPRIB知Smad5基因表达量极显著低于单羔组(P0.01),且与卵巢排卵数均分别呈不同程度的负相关(P0.05或P0.01),说明湖羊垂体组织BMP4.BMPRIB知Smad5基因表达量差异可能是引起湖羊较高产羔数的原因之一。 3.高、低产湖羊卵巢组织BMP/Smad信号通路分子基因表达差异及与排卵数相关性的研究 我们利用荧光定量PCR技术分析了高繁殖力(经产三、四羔:多羔组)和低繁殖力(经产单羔:单羔组)湖羊母羊发情后24-36小时排卵时期卵巢组织中BMP/Smad通路中的BMP蛋白家族基因(BMP2、BMP4、BMP6、BMP7\BMP15), BMP受体基因(BMPRIA、BMPRIB、BMPRII)和细胞内Smad蛋白家族基因(Smadl、Smad5, Smad4)表达水平差异及其与卵巢排卵数间的相关性,结果显示:多羔组湖羊BMP4、BMPRIB知Smad4基因mRNA表达极显著高于单羔组(P0.01),BMP15知BMPRII基因mRNA表达显著高于单羔组(P0.05),而BMP2、BMP6、BMP7、BMPRIA、Smadl知Smad5基因mRNA表达在单羔组和多羔组间没有显著差异(P0.05);相关分析表明卵巢组织中BMP4、BMP15、BMPRIB、BMPRII、Smad5和Smad4基因mRNA表达与排卵数呈正相关,表明BMP4、BMP15、BMPRIB、BMPRII知Smad4基因在mRNA水平对湖羊排卵数有影响,可能是影响湖羊高产、多胎性状的候选基因。 4.不同繁殖力湖羊有腔卵泡BMP/Smad信号通路基因表达水平研究 为了进一步探讨湖羊多胎与BMP/Smad信号通路的关系,我们以机械法获取高繁殖力(经产三、四羔:多羔组)和低繁殖力(经产单羔:单羔组)湖羊母羊发情后24-36小时排卵时期卵巢组织中的部分有腔卵泡,利用荧光定量PCR技术对BMP/Smad信号通路基因(包括BMP蛋白家族基因BMP2、BMP4、BMP6、BMP7、BMP15; BMP受体基因BMPRIA、BMPRIB、BMPRII;细胞内Smad蛋白家族基因Smadl、Smad4、Smad5) mRNA在有腔卵泡中的表达水平进行分析,结果显示:多羔组湖羊BMP4,BMPRIB和BMPRIl基因mRNA表达显著高于单羔组(P0.05), Smad4基因mRNA表达极显著高于单羔组(P0.01), BMP15 mRNA显著低于单羔组(P0.05), BMP2、BMP6、BMP7、BMPRIA、Smad1知Smad5基因mRNA表达在单羔组和多羔组湖羊有腔卵泡中的表达没有显著差异(P0.05)。结果提示单羔组和多羔组湖羊BMP4、BMP15、BMPRIB、BMPRIⅠ和Smad4基因表达差异可能是湖羊多胎原因之一。 5.湖羊TGF-β/Smad言号通路相关基因组织表达特征 用RT-PCR法检测湖羊TGF-β/Smad信号通路中信号分子基因组织表达特征,结果成功克隆得到了TGF-β/Smad信号通路中TGF-β1、TGF-β2、TGF-β3、TGF-βRⅠ、TGF-βRⅡ、Smad2、Smad7等信号分子基因部分cDNA片段,组织表达谱研究表明,TGF-β1、TGF-β2、TGF-β3、TGF-βRⅠ、TGF-βRⅡ、Smad2知Smad7在湖羊母羊卵巢、子宫、输卵管等生殖器官有表达外,在下丘脑、垂体、心脏、肝脏、脾脏、肾脏、肌肉组织中也均有表达,但是TGF-β1、TGF-β2、TGF-β3、TGF-βRⅠ在肺脏组织中没有表达,而TGF-βRⅡ、Smad2知Smad7在肺脏中有表达。从结果看,TGF-β/Smad信号通路相关基因在湖羊体内广泛表达,而在卵巢组织均可检测到其明显表达,说明TGF-β/Smad信号通路相关基因对湖羊繁殖功能可能有一定的影响。 6.高、低产湖羊卵巢组织TGF-β/Smad信号通路分子基因表达差异及与排卵数相关性的研究 对高繁殖力(经产三、四羔:多羔组)和低繁殖力(经产单羔:单羔组)湖羊母羊发情后24-36小时卵巢组织中TGF-β/Smad信号通路的TGF-β蛋白基因(TGF-β1、TGF-β2、TGF-β3), TGF-P受体基因(TGF-βRⅠ知TGF-βRⅡ)和细胞内Smad蛋白家族基因(Smad2、Smad7)在卵巢组织的表达水平及其与卵巢排卵数间的相关性进行研究,发现多羔组湖羊卵巢组织TGF-β1知TGF-β2基因表达显著高于单羔组(P<0.05), TGF-β3、TGF-βRⅡ知TGF-βRⅠ基因表达极显著高于单羔组(P0.01);Smad7基因表达则显著低于单羔组(P0.01);Smaad2基因在多羔组和单羔组卵巢组织间没有显著差异(P0.05)。进一步的相关分析结果表明TGF-β1、TGF-β2、TGF-β3知TGF-βRⅠ与排卵数无相关,TGF-βRⅡ与卵巢排卵数存在显著正相关(P0.05),Smad7与卵巢排卵数存在显著负相关(P0.01)。表明TGF-PRⅡ和Smad7基因在mRNA水平对湖羊排卵数有影响,可能是影响湖羊高产、多胎性状的候选基因。
【学位授予单位】:南京农业大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:S826

手机知网App
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 李志农;对提高湖羊羔皮质量的我见[J];经济动物学报;1983年01期
2 王曙雁,李新华,林建良,杨建国,沈补根,吴福荣;江苏省东山湖羊资源保护区湖羊保种措施及效果[J];畜牧与兽医;1999年03期
3 ;苏州地区湖羊资源的保护与开发利用[J];中国农业信息;2005年09期
4 杨诗兴,彭大惠,张文远,张宗学,高天喜,施伯煊,刘继高,刘世民,冠永川,张力,潘林阳;湖羊能量与蛋白质需要量的研究[J];中国农业科学;1988年02期
5 徐子伟,张泉福,戴旭明,陈兴良,韩玉刚;湖羊多羔肥育性能及其羊肉品质的研究[J];中国畜牧杂志;1991年05期
6 邹莹;“湖羊多胎基因的遗传与利用研究”通过鉴定[J];畜牧兽医科技信息;1997年12期
7 石国庆,程瑞禾,阎玉琴,管锋,汤晓禄,刘荣仁;中国美利奴与湖羊妊娠早期血清中生殖激素浓度变化的研究[J];草食家畜;2005年01期
8 王曙雁;王伟;吴福荣;;湖羊饲养技术[J];上海畜牧兽医通讯;2007年04期
9 鲍星升;推广开发食用湖羊乳——湖羊产区一项潜在的资源和财富[J];畜牧与兽医;1997年05期
10 孙炜;;苏州地区湖羊资源的保种与开发利用现状[J];中国草食动物;2006年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 王俊;;Regulation of Mice Cerebral Angiogenesis by Smad4 and Pten[A];中国遗传学会模式生物与人类健康研讨会会议论文集[C];2010年
2 屠炳江;沈吉士;鲁新伟;赵晓枫;林嘉;;湖州市吴兴区湖羊品种保护工作的现状与探索[A];中国畜牧兽医学会养羊学分会全国养羊生产与学术研讨会议论文集[C];2010年
3 ;Maternal Smad3 Deficiency Compromises Decidualization in Mice[A];“细胞活动 生命活力”——中国细胞生物学学会全体会员代表大会暨第十二次学术大会论文摘要集[C];2011年
4 吴福荣;;东山湖羊保护区湖羊种质及资源保护调查[A];苏州市自然科学优秀学术论文汇编(2008-2009)[C];2010年
5 陈海勇;黄晓茹;柳飞;付平;Rainer L.Heuchel;A.J.Szalai;钟志刚;蓝辉耀;;Smad7在糖尿病肾病的保护和治疗作用[A];中国生理学会第十一届张锡钧基金全国青年优秀生理学学术论文交流及评奖会议综合摘要[C];2011年
6 郑军;林嘉;;湖羊在我国羊业发展中的潜力与利用途径[A];中国羊业进展——首届中国羊业发展大会会刊[C];2004年
7 徐泽君;晁先平;周永亮;徐泽立;;河南省农区工厂化养殖湖羊的分析及思考[A];《2011中国羊业进展》论文集[C];2011年
8 ;发挥资源优势 加大投入力度 开创湖羊保种选育与开发利用新局面[A];中国羊业进展——首届中国羊业发展大会会刊[C];2004年
9 熊杰;卫伟;马兵;夏照帆;李勤;余文林;程飚;;TGF-β1/Smad3信号转导通路对皮肤成纤维细胞调控作用的研究[A];第七届中国医师协会美容与整形医师大会论文集[C];2010年
10 熊杰;卫伟;马兵;夏照帆;李勤;余文林;程飚;;TGF-β1/Smad3信号转导通路对创面愈合作用的活体内研究[A];第七届中国医师协会美容与整形医师大会论文集[C];2010年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 江苏省农林厅副厅长 刘立人;开发湖羊[N];中国畜牧水产报;2001年
2 江苏省农林厅副厅长 刘立人;开发湖羊[N];江苏科技报;2001年
3 记者 顾日升 通讯员 戴怀渠;“超级羊”湖羊落户永丰[N];泰州日报;2009年
4 中国畜牧兽医学会养羊学分会名誉理事长、中国畜牧业协会羊业分会专家委员会主任 赵有璋;大力推动湖羊南移 积极发展规模养殖[N];中国畜牧兽医报;2010年
5 浙江大学动物科学学院 林嘉;浙江湖羊种质特性的变化与保种[N];中国畜牧兽医报;2010年
6 孙炜;苏州地区湖羊资源的保种与开发利用[N];中国畜牧兽医报;2005年
7 刘艳;吕山乡加强品改提高湖羊品质[N];中国畜牧兽医报;2007年
8 严金祥;湖羊养得好 野草变成宝[N];浙江日报;2000年
9 河南畜牧规划设计研究院 徐泽君 周永亮 晁先平;我省工厂化饲养湖羊时机已经成熟[N];河南科技报;2011年
10 记者 彭电子;浙江省举办首届湖羊(种公羊)赛羊会[N];中国畜牧报;2004年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 徐业芬;Smad信号转导通路相关基因表达与湖羊高繁殖力关系的研究[D];南京农业大学;2010年
2 贺文芳;Smad2在氧糖剥夺再灌注损伤中的表达及其作用机制研究[D];中南大学;2012年
3 任敏;芩丹胶囊对血管外膜成纤维细胞TGF-β1/Smad信号转导通路影响的研究[D];山东大学;2011年
4 李军;晶状体上皮细胞TGF-β/Smad信号转导通路的研究[D];天津医科大学;2011年
5 王伟;BMP/Smad信号通路对猪卵泡颗粒细胞的影响[D];南京农业大学;2010年
6 王惕;慢病毒介导Smad7基因对角膜增殖与纤维化的抑制作用[D];复旦大学;2010年
7 宝轶;转化生长因子胞内信号蛋白Smad2/3在糖尿病性认知功能障碍中的作用机制研究[D];第二军医大学;2010年
8 齐心;Smad4在维持胚胎心脏增殖中的作用研究[D];南京大学;2010年
9 王乐;CHIP负调控Smad1/5蛋白的分子机理[D];清华大学;2011年
10 茅慧玲;植物源性物质对生长湖羊瘤胃发酵和肉品质的影响及其作用机理的研究[D];浙江大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 朱琳;大鼠脑缺血再灌注和丁苯酞干预后海马组织中Smad4的表达变化及Smad4在高尔基体定位的研究[D];中南大学;2010年
2 蒋晓飞;湖羊多羔性状的分子标记研究[D];南京农业大学;2009年
3 涂飞;排卵相关基因表达水平与湖羊繁殖性能的关系研究[D];南京农业大学;2010年
4 张雪莹;Smad4的条件性缺失对T细胞活化的影响[D];中国人民解放军军事医学科学院;2012年
5 门桐林;视黄酸调节Smad3表达阻抑放射诱导的肺损伤[D];中国医科大学;2010年
6 贺彧;沉默Smad4对猪卵巢颗粒细胞增殖及细胞周期的影响[D];南京农业大学;2009年
7 杨燕芳;Smad3和Smad7在实验性自身免疫性神经炎中的动态表达[D];中南大学;2011年
8 李瑶;TGF-β1、TβR及Smad2/3在泡球蚴感染小鼠肝脏中的动态变化[D];新疆医科大学;2010年
9 陈丽;天生饮对肾血管性高血压大鼠肾Smad3和Smad7表达的影响[D];湖南中医药大学;2008年
10 李子龙;淫羊藿甙对MC3T3-E1细胞Smad1,4,5作用的实验研究[D];天津医科大学;2012年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026