收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

红掌愈伤组织和再生团块的发育及四倍体诱导

陈超  
【摘要】:本文以红掌(Anthurium andraeanum)叶片和气生根根段为外植体,分别诱导产生愈伤组织和再生团块,并对其分化过程进行了细胞学和组织化学比较研究,旨在了解愈伤组织和再生团块分化过程中细胞学变化异同及糖类和蛋白质在愈伤组织衰老与再生团块发生发育过程中的变化。活性氧与愈伤组织和再生团块的分化关系尚不明确,本文探讨了愈伤组织和团块发育过程中细胞中超氧化物含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化氢酶(CAT)活性、总谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)活性和丙二醛含量变化,明确了其在愈伤组织和再生团块分化过程中与细胞衰老的关系。气生根来源的再生团块对秋水仙素敏感,本文以其材料,进行了秋水仙素诱导红掌四倍体的研究,这将为红掌四倍体和三倍体育种奠定基础。 1.红掌气生根根段再生快繁体系的建立 以红掌气生根根段为材料,诱导再生团块的产生,建立快繁系统。培养基1/2MS+6-BA 1.0mg·L-1+2,4-D 0.6 mg·L-1适于气生根的保持和繁殖,1/2 MS+6-BA 1.0mg·L-1+2.4-D0.2 mg·L-1适于诱导气生根再生团块产生,MS+6-BA 1.0 mg·L-1+2.4-D0.2 mg·L-1可使再生团块分化成苗。不论是愈伤组织,还是再生团块,出现绿色组织是分化所必需的。2,4-D、6-BA浓度及其适当比例、无机盐浓度在再生团块的诱导与分化成苗中起着重要作用。 2.叶片来源愈伤组织和气生根来源再生团块细胞学研究 叶片诱导所产生黄绿色、黄色和褐色3种愈伤组织的细胞核质比依次减小,细胞排列越来越疏松,细胞质变稀薄,细胞形态逐渐失去完整性,其中黄色和褐色愈伤组织细胞不断衰老最终死亡。气生根形态发生以间接器官发生为主,再生团块由气生根根段切口皮层细胞分裂和脱分化而来。再生团块内部有密集且分裂旺盛的小细胞团,其细胞为分化的原始组织,是分化产生不定芽的基础。小细胞团芽的分化发生方式属内起源,随着小细胞团的不断生长,外层细胞逐渐凋亡,最终使分化的芽突出再生团块再生成苗。再生团块的形态发生过程中,也偶见有少量胚状体产生。 3.愈伤组织和再生团块发育过程中糖和蛋白质的组织化学比较研究 糖的含量及其梯度变化是愈伤组织和再生团块分化的重要内在条件,蛋白质含量以及核形态是否完整是愈伤组织和再生团块分化的关键。以来源于叶片的4类愈伤组织(黄绿愈伤、深绿愈伤、金黄色愈伤和褐色愈伤)和来源于气生根的再生团块为材料,研究糖和蛋白质在愈伤组织衰老与再生团块发生发育过程中的变化。经石蜡切片PAS和汞溴酚兰组织化学染色观察发现,糖主要以颗粒状存在于愈伤组织细胞中,并有明显的围核现象,蛋白质主要集中于细胞核及其周围。在黄绿愈伤组织中,糖和蛋白质的含量从外向内显著减少;而深绿愈伤组织中梯度变化不明显。在金黄色愈伤组织中糖含量低且内外细胞间梯度小;在褐色愈伤组织中糖散乱分布。在金黄色愈伤组织中,蛋白质含量由外向内有不明显的梯度变化;在褐色愈伤组织中蛋白质则没有梯度变化。新生再生团块细胞中,糖和蛋白质含量高且由外向内梯度变化显著,再生团块膨大过程中,糖和蛋白质含量下降且内外层细胞间差异不显著。再生团块分化过程中,糖主要集中在分裂旺盛的分生细胞团和维管组织周围细胞中,蛋白质则集中于分生细胞团中。在各类愈伤组织和再生团块中均出现含有类似酚类物质的特化细胞。 4.愈伤组织和团块再生体系衰老指标比较研究 以愈伤组织再生体系的4种愈伤组织和气生根再生体系的再生团块为材料,比较了它们之间的超氧化物含量、保护酶活性及丙二醛水平的差异。结果表明:超氧化物含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性及过氧化氢酶(CAT)活性均为黄绿愈伤组织最高,金黄愈伤组织和深绿愈伤组织居中、再生团块和褐色愈伤组织较低;总谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)活性以褐色愈伤组织最高,深绿、金黄和黄绿愈伤组织次之,再生团块最低;丙二醛(MDA)含量以金黄愈伤组织最高,褐色、黄绿和深绿愈伤组织次之,再生团块最低。再生团块分化能力最强,而其细胞中超氧化物含量、MDA含量均比4种愈伤组织低,这说明细胞中自由基含量和细胞膜脂过氧化与细胞分化有一定相关性。 5.秋水仙素离体诱导红掌‘亚利桑那’四倍体 红掌“亚利桑那”再生团块经不同浓度的秋水仙素(0.1,0.2,0.3%)分别处理3,5和7h,然后转入附加6-BA 3mg,L-1+2,4-D 0.2mg-L-1的MS培养基上。60天后,统计团块的成活率和再生苗数。0.3%和7 h处理组合显著降低了再生团块存活率,但是秋水仙素对再生团块的分化影响并不显著。所有处理的四倍体植株的诱导率在0.2%到7.6%。最佳诱导率为用0.3%,5h处理组合。四倍体叶片气孔比二倍体的大,但密度却低于二倍体。四倍体植株叶柄粗壮,叶厚且颜色深绿。同二倍体植株相比,佛焰苞更厚更大。四倍体群体中出现双佛焰苞或花梗矮化变异。同二倍体一样,四倍体也可通过气生根产生再生团块,此技术可用于四倍体快速繁殖。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 陈春满;蒋雄辉;叶燕;;红掌叶片成熟度对愈伤诱导效果的影响[J];广东农业科学;2008年07期
2 刘奕清;红掌阿力安娜的组培快繁技术研究[J];中国种业;2005年10期
3 吴丽芳;陆伟东;丁伟;张鸭关;;不同激素配比对红掌叶片愈伤组织诱导的影响[J];贵州农业科学;2010年08期
4 陈超;侯喜林;王桂兰;陈玉斌;;红掌再生团块和不同愈伤组织衰老指标的比较研究[J];西北植物学报;2010年08期
5 武爱龙;;粉香槟红掌的组织培养及快速繁殖[J];现代园艺;2010年08期
6 陈兰兰;高山林;赵慧娜;;蒙古黄芪组织培养及同源四倍体的诱导与鉴定[J];药物生物技术;2006年06期
7 陈道明 ,黄敏仁;加龙杨(Poqulus nigra cv.Blanc de garonne)茎尖组织培养及其同工酶的变化[J];南京林业大学学报(自然科学版);1980年03期
8 郭达初;林证明;;泡桐、红杉和巨杉的器官培养与发生的初步试验[J];林业科学;1981年04期
9 谭绍满;;插条育苗的几个重要问题[J];广东园林;1982年03期
10 孙国凤;;日本农林水产省和种苗协会开发利用愈伤组织和细胞培养的育种技术[J];生物技术通报;1987年11期
11 王俊丽,杜建芳,耿钰;杜仲愈伤组织培养研究[J];经济林研究;1996年04期
12 陈雄庭,江梅;钙对橡胶愈伤组织脆性和体细胞胚发生的效应[J];世界热带农业信息;1996年08期
13 刘贤旺,杜勤,罗光明,姚振生,赖学文,徐志杰,刘勇,葛菲;半枫荷愈伤组织超低温保存研究初报[J];中药材;1996年07期
14 张海,易永华,左田夫,邢宏宜;提高棉花花药愈伤组织诱导率的研究[J];西北农业学报;1998年03期
15 周丽艳,高书国,杨文利,王翠花;甘薯愈伤组织的诱导[J];河北职业技术师范学院学报;2002年04期
16 施和平,权宏;紫花洋地黄的组织培养和植株再生[J];中草药;2004年03期
17 郭勇,林桂芸,陈宏志,孙雁霞,石大兴;喜树愈伤组织的诱导及喜树碱含量研究[J];四川林勘设计;2005年02期
18 张春雨,张志东,李亚东,吴林,刘海广;植物生长调节物质对黑果腺肋花楸离体叶片愈伤组织诱导及再分化的影响[J];吉林农业大学学报;2005年04期
19 吴晓玲;邓光存;邱智杰;;银柴胡愈伤组织诱导技术的研究[J];宁夏大学学报(自然科学版);2005年03期
20 张恒;;小麦胚芽愈伤组织培养条件对维生素E积累的影响[J];江苏农业科学;2006年01期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 傅经国;吴鸣建;何娟;尚玉俊;赵天增;宋立新;;RP-HPLC法测定苦皮藤愈伤组织中苦皮素A的含量[A];中国制药工业药理学会20周年学术会议论文集[C];2002年
2 曾小美;王凌健;夏镇澳;沈允钢;;烟草光自养型愈伤组织的光合特性研究[A];中国植物生理学会全国学术年会暨成立40周年庆祝大会学术论文摘要汇编[C];2003年
3 翟晓巧;;二乔刺槐愈伤组织超低温保存研究[A];第六届全国林木遗传育种大会论文集[C];2008年
4 朱向涛;王雁;彭镇华;律春燕;郑宝强;;牡丹愈伤组织扫描电镜观察[A];中国观赏园艺研究进展(2010)[C];2010年
5 孙震晓;刘传召;郭善利;马清温;;植物愈伤组织超低温保存的实验研究[A];第七届全国系统与进化植物学青年学术研讨会论文摘要集[C];2002年
6 陈超;王桂兰;陈玉斌;;红掌不同类型愈伤组织及再生团块生理指标的测定[A];中国植物生理学会第十次会员代表大会暨全国学术年会论文摘要汇编[C];2009年
7 周安莲;余茂德;;桑子叶愈伤组织的诱导培养[A];中国蚕学会第三届青年学术研讨会暨浙江省第二届青年学术论坛——蚕桑分论坛论文集(上册)[C];2001年
8 许鸿源;蒙爱东;李春霞;邓锡青;杨美纯;周歧伟;黄春燕;许鸿章;;灵发素(LFS)对三七愈伤组织发生和增殖的影响[A];2003年广西植物生理学年会论文汇编[C];2003年
9 佘建明;张保龙;陈志一;倪万潮;;草坪型高羊茅成熟种子离体培养植株再生技术研究[A];全国作物细胞工程与分子技术育种学术研讨会论文集[C];2003年
10 许明淑;黄璐琦;;贯叶金丝桃愈伤组织的诱导研究[A];全国中药研究与开发学术研讨会论文摘要集[C];2001年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 陈超;红掌愈伤组织和再生团块的发育及四倍体诱导[D];南京农业大学;2011年
2 吴顺;籼稻成熟胚再生体系的建立及反义waxy基因转化籼稻的研究[D];湖南农业大学;2005年
3 朱向涛;凤丹体胚发生及愈伤组织诱导芽分化研究[D];中国林业科学研究院;2010年
4 伍碧华;小麦离体培养的营养器官与花器官发育研究[D];四川农业大学;2003年
5 钟原;紫斑牡丹分生结节的诱导与培养[D];北京林业大学;2011年
6 宋建英;邓恩桉微体快繁技术和耐寒性的研究[D];南京林业大学;2008年
7 秦磊;牡丹分生结节诱导、发生与发育及细胞组织学观察[D];北京林业大学;2012年
8 姚娜;竹子组织培养与毛竹愈伤组织分化中基因表达分析[D];中国林业科学研究院;2010年
9 何铁剑;菠萝组织与细胞培养及其诱导产酶研究[D];华南理工大学;1994年
10 耿小丽;苜蓿单倍体、纯合四倍体的诱导及愈伤组织DNA含量变异的研究[D];甘肃农业大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 王惠珍;穗冠花愈伤组织的诱导和花色素苷积累的研究[D];华南师范大学;2002年
2 张清梅;中小型苹果再生体系的研究[D];内蒙古农业大学;2005年
3 高兵;不同培养条件对嘎拉苹果愈伤组织遗传变异的影响研究[D];南京农业大学;2005年
4 赵莉;不同营养条件对大苞景天愈伤组织诱导及植株再生的影响研究[D];四川农业大学;2005年
5 刘晓光;枣愈伤组织诱导和原生质体分离研究[D];河北农业大学;2006年
6 王辉;香榧的组织培养及快繁技术的研究[D];浙江大学;2006年
7 赵世萍;蝴蝶兰组织培养过程中特异蛋白表达差异的研究[D];东北师范大学;2006年
8 胡楠;魔芋浅层液体组织培养及多倍体诱导研究[D];西南大学;2011年
9 袁秀平;红王子锦带组培再生植株体系的研究[D];西北农林科技大学;2004年
10 宁强;枣愈伤组织的诱导及多倍体诱变研究[D];河北农业大学;2006年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 ;俄罗斯培育出更耐涝小麦[N];新华每日电讯;2010年
2 唐山市丰南区林业局 汪林华 魏文娟 贾久正;这是杨树破腹病[N];河北科技报;2006年
3 濮阳市世锦现代农业发展有限公司 张晖 王绪月;花卉无性系的快速繁殖[N];中国花卉报;2006年
4 柏斌   ;云南攻克红掌快繁难题[N];中国花卉报;2003年
5 昆明安祖花园艺有限公司技术指导 殷福姣;红掌温室环境控制[N];中国花卉报;2009年
6 本报记者 姚蓉;盆栽生产切花红掌一举三得[N];中国花卉报;2010年
7 本报记者 岳汀;红掌苗期管理注意事项[N];中国花卉报;2010年
8 昆明安祖花园艺有限公司 殷福姣;适宜种植红掌的基质[N];中国花卉报;2010年
9 本报记者 黄正秉;两因素限制红掌切花发展[N];中国花卉报;2010年
10 记者 黄慧;京津红掌几家欢乐几家愁[N];中国花卉报;2005年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978