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《南京农业大学》 2010年
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耐受苯酚的细菌新种—Comamonas zonglianii BF-3~T的分离及其多相分类研究

俞欣妍  
【摘要】:苯酚(Phenol)是一种芳香族类化合物,在医药、农药、染料和炼油等工业中普遍使用。但近年来研究发现,苯酚由于其毒性及难降解性,对环境造成了严重的污染,危害了人类的健康。苯酚已被美国环保署列入优先控制污染物和65种有毒污染物名单,同时它也是我国优先控制污染物之一。 本丈从长期受到苯酚污染的土壤中分离得到一株耐受苯酚菌株,命名为BF-3T,其对苯酚的最高耐受浓度为1000mg·L-1。经形态观察、生理生化鉴定和16S rRNA序列分析,将其鉴定为丛毛单胞菌属(Comamonas sp.)。但BF-3T的系统发育分析同时表明,BF-3T与丛毛单胞菌属模式菌株构建的进化树上形成了一个独立的分枝,它与最近的模式菌株Comamonas aquatica LMG 2370T的同源性仅为96.8%,低于了新种的阈值97%,这些分析都明显指出了BF-3T是一新种的可能性。于是,我们利用多相分类技术对该菌及同源性最近的3个菌株(C. aquatica LMG 2370T、C. nitrativoransDSM 13191T和C. odontotermitis LMG 23579T)进行了分类学地位的研究。 经研究可知,菌株BF-3T菌体呈短杆状(0.6-0.8×0.9-1.5μm),革兰氏染色阴性,无鞭毛。在30℃培养2d后,菌落呈浅黄色,圆形,半透明,中间突起,边缘平整。BF-3T好氧生长且最适生长条件为25-35℃,0-1% NaCl,pH 7-8。BF-3T接触酶、氧化酶、精氨酸双水解酶、脲酶、明胶水解呈阳性,可以利用吐温40、吐温80、葡萄糖酸盐、癸酸盐、己二酸盐及柠檬酸盐等碳源。BF-3T对氨苄青霉素、庆大霉素、青霉素G、利福平及链霉素均有抗性。BF-3T脂肪酸含量的主要成分为16:0、18:1/18:1ω7c、17:0 cyclo及summed feature 3 (16:1ω7c and/or 15:0 iso 2-OH),其中17:0 cyclo含量高于其他模式菌株。BF-3TDNA G+C mol%含量为65.2±1%。其与同源性最近的3个菌株的DNA-DNA杂交率为25.4%-28.7%,小于了新种认定的阈值(70%以下)。 生理生化实验、系统发育分析、脂肪酸含量及DNA-DNA杂交等实验,表明了菌株BF-3T (=CCTCC AB 209170T=DSM 22523T)为丛毛单胞菌属的一个新种的模式菌株,命名为Comamonas zonglianii sp. nov.。
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