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《南京农业大学》 2009年
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鸡新城疫耐热保护剂活疫苗(La Sota株)的研制

张道华  
【摘要】:鸡新城疫活疫苗是现代养禽业疫病防治使用最普遍的一种疫苗,但国内普通禽类活疫苗通常使用牛奶、蔗糖(或明胶蔗糖)作为冻干保护剂,产品一般要求在-15℃条件保存,2-8℃保存时间普遍较短。根据我国养禽业公司加农户的生产实际,疫苗的贮藏、运输、使用等环节很难满足规定的冷链的要求。尤其在气温较高的夏秋季节,疫苗的运输短则2-3d,多则5-7d,经常出现因上述原因引起疫苗效力下降、甚至失效。国外厂家生产的冻干活疫苗早在上世纪七、八十年代就采用耐热冻干保护剂及配套技术,其产品2-8℃保存期在24个月左右。为了解决传统冻干活疫苗对贮藏、运输等冷链要求较高的问题,使冻干疫苗2-8℃条件下,保存期达到24个月左右,开展新型耐热保护剂型活疫苗的研制。 采用不同的保护剂基质,设计三组冻干保护剂配方和相匹配的配制工艺。在同一冻干曲线下,进行鸡新城疫活疫苗(La Sota株)冻干试验。通过将冻干制品进行耐老化试验,筛选耐热保护剂配方。将产品置37℃7、10d,3号配方冻干产品病毒含量分别下降为100.6、101.0明显优于其它2组配方;3个配方产品置25℃30d病毒含量测定结果,3号配方下降幅度为100.7,而其它二个配方分别下降了101.4、101.1,明显优于其它二个配方;三个配方的产品置45℃3、5d,100℃10min病毒含量测定结果均为3号配方最好。因此,我们选定3号保护剂配方作为鸡新城疫耐热保护剂活疫苗(La Sota株)保护剂配方。 我们选定3号保护剂配方作为鸡新城疫耐热保护剂活疫苗(La Sota株)保护剂配方,实验室生产了3批耐热冻干活疫苗。置37℃条件下保存10d,每羽份病毒含量≥105.8EID50。疫苗置25-30℃30d病毒含量下降100.6~.9。,45℃5d下降103.5-3.9,100℃10min下降104.5-4.9。产品剩余水分含量均≤2%。明显优于“规程”标准。按照《中华人民共和国兽用生物物制品制造及检验规程》2000版(以下简称“规程”)有关规定进行的其它各项检验,全部合格。 将3批疫苗置2-8℃条件下保存,分别于9、12、15、18、21、24、27个月后取出,进行疫苗性状、水分含量、病毒含量测定,三批疫苗的性状检验合格,水分含量≤4%。病毒含量每羽份≥106.0EID50。三项指标均符合《中华人民共和国兽用生物制品质量标准》2001版(以下简称“标准”)的有关规定。在24、27个月时分别将疫苗取出,用20mL灭菌生理盐水稀释后,置2-8℃、25℃4个h,每羽份病毒含量≥106.0EID50。因此,我们将疫苗2-8℃条件下保存期定为24个月。 疫苗保存期试验是耐热保护剂型活疫苗研究的核心试验。通过三批实验室生产疫苗的2-8℃保存期和37℃耐老化试验两个试验的平行关系,确定疫苗的保存期,并以37℃耐老化试验作为疫苗质量标准之一,置37℃条件下保存10d,每羽份病毒含量≥105.8EID50。 鸡新城疫耐热保护剂活疫苗(La Sota株)通过新兽药注册申报于2008年2月25日获国家三类新兽药证书。本论文仅为新兽药申报研究试验研究的一部分。
【学位授予单位】:南京农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2009
【分类号】:S858.31

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