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《南京农业大学》 2012年
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茶树组织培养再生体系优化与遗传转化的研究

许益娟  
【摘要】:茶(Camellia sinensis L.)为山茶科山茶属多年生常绿乔木或灌木,具有悠久的栽培历史,是我国重要的经济作物之一。常规茶树育种技术具有局限性,如远缘杂交困难、有益突变频率低、选育优良品种耗时长、花期不遇等,制约了茶树优质资源的利用,使得茶树品种选育工作难以取得突破性的进展。本研究以茶树未成熟胚为对象,优化了茶树组织培养再生体系,并在此基础上探索根癌农杆菌介导茶树遗传转化技术,为利用基因工程技术对茶树进行遗传改良打下基础。主要研究结果如下:1.茶树植株组培再生体系优化 本论文以茶树未成熟胚为外植体进行组织培养,对各阶段影响再生效率的诸因素进行研究,选出了各阶段适宜外植体生长的最佳培养基和激素组合,优化了茶树组织培养再生体系。研究结果表明,未成熟胚以胚向上的方式接种,诱导效果较好;当诱导培养基为ER+O.1mg/L NAA+1mg/L6-BA+1mg/L GA3时,茶树愈伤组织诱导率最高,为98.9%;分化培养基为ER+0.1mg/L IBA+2mg/L6-BA时,分化率最高可达87.5%;组培苗在壮苗培养基ER+0.1mg/L NAA+2mg/L6-BA+1mg/L GA3中长势最好;最佳的生根培养基为1/2MS+0.2mg/L IBA+1mg/LKT. 2.农杆菌介导茶树遗传转化体系建立 以带未成熟胚的子叶和纯子叶为转化受体进行遗传转化体系研究,探讨了遗传转化过程中侵染时间、共培养时间、共培养基、AS浓度和延后选择培养对遗传转化效率的影响。结果表明,农杆菌浸染15min,共培养3d,附加150μmol/L AS的YEB共培养基,延后选择培养3d均可提高转化效率。另外,带未成熟胚的子叶的转化率较高,更适合作为茶树遗传转化的转化受体。在上述优化的遗传转化技术参数下培养,获得了完整的再生抗性植株。
【学位授予单位】:南京农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2012
【分类号】:S571.1

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【参考文献】
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