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《南京农业大学》 2015年
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农杆菌介导的马铃薯转基因优化试验及基因型响应能力评价

刘超  
【摘要】:马铃薯是重要的蔬菜、粮食兼用作物,世界总产量仅次于水稻、小麦、玉米,居第四位。我国是马铃薯最大生产国,但是单产水平远低于美国、荷兰等国。优良品种的缺乏和育种方式的落后是造成马铃薯单产水平低的重要因素,基因工程育种是马铃薯品种改良的有效手段。目前,虽然马铃薯转基因技术已经获得成功,但技术还不够成熟。本研究的内容包括:(1)马铃薯品种遗传转化响应能力的评价;(2)遗传转化技术体系的试验,包括添加乙酰丁香酮、添加表面活性剂SilwetL-77、进行超声辅助转化以及进行真空渗透辅助转化。获得如下研究结果:1.测试的8个马铃薯早熟品种中,宁3、宁8、云薯505、V0024-6、V0379-2、CV92028-1六个品种能在含有潮霉素(HygB)的培养基上产生抗性愈伤组织,愈伤组织形成率从62.8%到70.5%不等,其中宁8最高,说明品种间遗传转化响应能力差异较大。2.添加乙酰丁香酮能够显著提高农杆菌介导的马铃薯遗传转化效率,100μM乙酰丁香酮将马铃薯品种Desiree茎段外植体的转化率从2.7%提高到4.6%,乙酰丁香酮的最适添加量在100μM-200μM之间。3.添加Silwet L-77没有显著提高转化率,并且Silwet L-77对植物有毒害作用,当添加量达到0.01%就开始降低转化率。4.超声辅助处理后,在愈伤形成培养基上农杆菌大量繁殖,从而导致茎段大量死亡,无法形成愈伤组织,所以这种方法不适合马铃薯的遗传转化。5.真空渗透处理对茎段造成一定的损伤,1 min以上的真空处理会导致愈伤形成率和转化率的大幅下降,降低了转化率。
【学位授予单位】:南京农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:S532

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【参考文献】
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中国硕士学位论文全文数据库 前10条
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