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《南京农业大学》 2000年
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萝卜抗感TuMV资源RAPD及同工酶分析鉴定研究

娄平  
【摘要】: 本文利用RAPD及同工酶分析技术,对萝卜抗、感TuMV资源进 行了系统的研究,结果表明: 1.利用苗期接种鉴定的技术,对TuMV抗感不同的11份萝卜品 种及杂交种进行苗期鉴定,鉴定出高抗品种3个,即热白萝 卜、秋魁青和鸭蛋头,其病情指数分别为2.0、0及1.2;感 病品种三个,扬花萝卜、夏长白、南研30天,病情指数为 35.2、40.6、52.1。田间观察与苗期鉴定结果基本一致。 2.应用RAPD技术对8个抗感不同的萝卜品种进行遗传多样性 分析,通过30个引物的筛选,找到6个多态性较好的引物。 利用6个引物的电泳图谱进行聚类分析,结果是抗性相似的 品种首先聚在一起,较准确地反映出了萝卜抗感资源间的关 系,可利用此聚类图进行杂种一代亲本的选配以及为抗性基 因的筛选提供有用的数据。另外利用基因池合并的策略,在 引物S359(GGACACCACT)的扩增图谱中找至一条特异性谱带, 初步认为可能与萝卜TuMV抗性有关。 3.F1代的鉴定与检测在生产中有重要用途,本文对父本、母本 以及P1代进行的鉴定与检测中发现,F1代的酯酶图谱与母 本相同,抗性呈偏母性遗传。在引物S353(CCACACTACC)的扩 增图谱中F1代表现出双亲的互补带型,仅利用此引物就可 以区别F1及其双亲,可用于杂种一代的品种鉴定以及纯度 的检测。利用本文建立的体系可以较快地对目前萝卜及其他 蔬菜主要的品种进行鉴定及检测。 4.同工酶由于是基因表达的直接产物,直接与植物的抗病性相 关,可作为抗性鉴定的有用生化指标。通过对三种酶的活性 测定以及四种同工酶的电泳分析发现,苗期萝卜叶片中多酚 氧化酶含量的高低与抗性呈正相关,可以作为抗性大小的衡 量指标。而酯酶在接种后,抗病品种的谱带数增加,也可以 作为抗病鉴定中的有用标记。感病后过氧化物酶活性及同工 酶在抗感不同品种中的变化只能体现植株内的生理变化,尚 难用于抗性的鉴定与评估。
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