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黄芪多糖、淫羊藿多糖及淫羊藿总黄酮对NDV、IBDV活性的影响

任宇皓  
【摘要】: 本研究观察了黄芪多糖(APS)、淫羊藿多糖(EPS)和淫羊藿总黄酮(EF) 三种中药成分对鸡新城疫病毒(NDV)及法氏囊病毒(IBDV)增殖的影响。 具体内容包括以下四部分。 1、以蒙古黄芪、朝鲜淫羊藿的叶为材料,用水煎醇沉法提取了黄芪多 糖(APS)和淫羊藿多糖(EPS)的粗提物,并用硫酸蒽酮法测定了其中两 种多糖的含量;用水煎醇沉、氯仿-乙酸乙酯萃取、聚丙酰胺柱层析法粗提 了淫羊藿总黄酮(EF)。并用芦丁法测定了其净含量;同时比较了水煎不同 加水量(25、50、75、100倍)、不同醇沉浓度(30%、60%、80%含醇量)和 不同沉淀温度(4℃、25℃静置)对EPS提取率的影响。结果表明,3种中 药成分的粗提取率分别为2.6g/Kg、5.2g/Kg和1.5g/Kg,其净含量分别 为50.2%、53.2%和70.1%;加50倍水煎煮、60%醇沉浓度、4℃静置时 提取率最高。 2.为了测定三种中药成分对培养细胞--鸡胚成纤维细胞(CEF)的安全 浓度,将EPS、APS分别加入培养12小时尚未形成单层和培养24小时已形 成单层后的CEF中,观察CEF增殖与存活时间。结果表明,APS与EPS能促 进CEF增殖并延长存活时间。对未形成单层的CEF,增殖率在加入6小时后 微低于对照、18小时后显著高于对照组,且EPS组明显高于APS组;对已 形成单层CEF,增殖率在加入6小时后也微低于对照组;EPS延长CEF的存 活的作用更为显著;两者均存在一定量效关系,高浓度的EPS对CEF有一定的 毒性,最大无毒浓度为450μg/ml。EF对CEF有一定的毒性,已形成单层的CEF 没有促进增殖和延长存活作用;对未形成单层CEF在高浓度时呈现一定的 抑制增殖作用;EF最大无毒浓度为300μg/ml。 3.将不同浓度的APS、EF和新城疫病毒(NDV)、法氏囊病毒(IBDV) 分别以如下方式加入CEF单层:①先加药物、后加病毒,②先加病毒、后 加药物,③病毒和药物感作后加入。测定鸡胚细胞半数致病变量(TCID50) 和NDV的血凝效价。观察上述三种中药对NDV、IBDV增殖的影响。结果表 明,APS、EPS对NDV只有在先加入药物、后加入病毒这一方式中表现出一 定的抑制病毒增殖的作用。而EF在上述三种加药方式中,对这两种病毒增 殖均表现出一定的的抑制作用。 4.不同浓度的APS、EPS、EF与NDV在体外感作和不感作,测定NDV 对鸡红细胞的凝集效价及凝集时间。结果发现,EPS、APS、EF可提高NDV 的血凝效价,分别比对照组提高7、3、1倍;EPS可明显延长凝集时间,APS 和EF无明显影响。同时发现,EF在高浓度时本身也有一定的血凝特性。


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