黄芪多糖、淫羊藿多糖及淫羊藿总黄酮对NDV、IBDV活性的影响

【摘要】： 本研究观察了黄芪多糖（APS）、淫羊藿多糖（EPS）和淫羊藿总黄酮（EF） 三种中药成分对鸡新城疫病毒（NDV）及法氏囊病毒（IBDV）增殖的影响。 具体内容包括以下四部分。 1、以蒙古黄芪、朝鲜淫羊藿的叶为材料，用水煎醇沉法提取了黄芪多 糖（APS）和淫羊藿多糖（EPS）的粗提物，并用硫酸蒽酮法测定了其中两 种多糖的含量；用水煎醇沉、氯仿-乙酸乙酯萃取、聚丙酰胺柱层析法粗提 了淫羊藿总黄酮（EF）。并用芦丁法测定了其净含量；同时比较了水煎不同 加水量（25、50、75、100倍）、不同醇沉浓度（30％、60％、80％含醇量）和 不同沉淀温度（4℃、25℃静置）对EPS提取率的影响。结果表明，3种中 药成分的粗提取率分别为2.6g/Kg、5.2g/Kg和1.5g/Kg，其净含量分别 为50.2％、53.2％和70.1％；加50倍水煎煮、60％醇沉浓度、4℃静置时 提取率最高。 2．为了测定三种中药成分对培养细胞--鸡胚成纤维细胞（CEF）的安全 浓度，将EPS、APS分别加入培养12小时尚未形成单层和培养24小时已形 成单层后的CEF中，观察CEF增殖与存活时间。结果表明，APS与EPS能促 进CEF增殖并延长存活时间。对未形成单层的CEF，增殖率在加入6小时后 微低于对照、18小时后显著高于对照组，且EPS组明显高于APS组；对已 形成单层CEF，增殖率在加入6小时后也微低于对照组；EPS延长CEF的存 活的作用更为显著；两者均存在一定量效关系，高浓度的EPS对CEF有一定的 毒性，最大无毒浓度为450μg/ml。EF对CEF有一定的毒性，已形成单层的CEF 没有促进增殖和延长存活作用；对未形成单层CEF在高浓度时呈现一定的 抑制增殖作用；EF最大无毒浓度为300μg/ml。 3．将不同浓度的APS、EF和新城疫病毒（NDV）、法氏囊病毒（IBDV） 分别以如下方式加入CEF单层：①先加药物、后加病毒，②先加病毒、后 加药物，③病毒和药物感作后加入。测定鸡胚细胞半数致病变量（TCID50） 和NDV的血凝效价。观察上述三种中药对NDV、IBDV增殖的影响。结果表 明，APS、EPS对NDV只有在先加入药物、后加入病毒这一方式中表现出一 定的抑制病毒增殖的作用。而EF在上述三种加药方式中，对这两种病毒增 殖均表现出一定的的抑制作用。 4．不同浓度的APS、EPS、EF与NDV在体外感作和不感作，测定NDV 对鸡红细胞的凝集效价及凝集时间。结果发现，EPS、APS、EF可提高NDV 的血凝效价，分别比对照组提高7、3、1倍；EPS可明显延长凝集时间，APS 和EF无明显影响。同时发现，EF在高浓度时本身也有一定的血凝特性。