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《南京农业大学》 2001年
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中华绒螯蟹“颤抖病”病原的鉴定及免疫学检测方法的建立

孙学强  
【摘要】: 中华绒螯蟹(Eriocheir Sinesis),俗称河蟹,肉味鲜美,营养丰富, 是一种重要的水产经济动物。近年来随着河蟹规模养殖的发展,病害也日 益严重,其中尤以新出现的河蟹“颤抖病”危害最为突出。 本研究以从江苏省宝应市采集的患“颤抖病”濒死的河蟹,用健康 的中华绒螯蟹进行人工复制试验,经过连传两代的人工复制试验并结合电 镜观察,确定其病原为一种55~65nm的有囊膜的病毒。 采用Sepharose 4B柱层析方法从人工复制发病的病蟹的组织中,分 离纯化到该病毒,负染后电镜观察进一步发现该病毒有清晰的纤突结构, 并且具有多形性,用纯化病毒进行致病性试验,结果显示纯化病毒对锯齿 华溪蟹(Sipopotamon denticulatam简称石蟹)也有致病性。 以纯化病毒采用常规免疫学方法免疫家兔和山羊得到两种抗血清, 建立了检测中华绒螯蟹“颤抖病”病毒的ELISA双抗体夹心法,用此方 法检测样本144份,包括来自长江水域的野生河蟹、人工复制发病的河蟹、 1999年和2000年从江苏采集的自然发病的病蟹及市场购买河蟹。结果显 示,病蟹和市场购买河蟹的阳性率为66.7%~100%,人工复制病蟹和纯化 病毒致病性试验中的病毒组、病料组石蟹为100%,来自长江水域的健康 河蟹及纯化病毒致病性试验中的阴性对照石蟹均为0。表明建立的方法可 以用于检测河蟹“颤抖病”的病原。
【学位授予单位】:南京农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2001
【分类号】:S945

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