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《南京农业大学》 2003年
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分子生物学方法鉴定药用贝母的研究

彭昕  
【摘要】: 贝母为常用贵重中药材,药用历史悠久,我国贝母属植物已超过50种(变种),全国各地用作贝母的原植物种类繁多,此外商品贝母中还常混有土贝母、唐菖蒲等伪混品,严重影响了药品安全有效性,由于贝母类药材的形态学上的差异较小,但是化学成分差异大,因此准确地鉴定贝母类药材的基源种类是一项极为重要的工作,为了探索贝母类药材的快速、准确的鉴别方法,本文主要进行了以下几方面的研究: 1 在查阅文献的基础上,系统总结了近年来分子生物学技术在中药材鉴定领域的应用和发展的情况,分析了贝母类药材的市场使用品种及鉴定方法的研究情况。 2 采用PCR产物直接测序法对11个贝母样品进行了nrDNA的ITS序列测定,对所测定的序列,以Lilium japonicum及Lilium mackliniae为外类群,用Clustal X对位排列,应用MEGA 2.0软件进行序列分析,用UPGMA法构建了贝母属植物及两种外类群植物的分子系统树,该系统树显示出Fritillaria属与Lilium属分化明显,各成一支,在Fritillaria属中分为四支:1 F.przewalskii、F.unibracteata、F.delavayi 2 F.thunbergii、F.thunbergii var. chekiangensis、F.puqiensis、F.hupehensis 3 F.pallidiflora 4 F.ussuriensis,我们的试验结果基本支持传统分类观点,并认为F.d elavayi应归入Eprzewalskii群。为贝母属植物的系统学研究提供了分子数据。 3 采用PCR-RFLP技术分别对贝母样品进行了分子鉴定研究,结果表明:限制性内切酶AclI(Psp1406I),HinfI,BcnI消化5SrDNA间隔区分别能够鉴定出湖北贝母,梭砂贝母,暗紫贝母。限制性内切酶SamI,Eco81I消化rDNA ITS区(或ITS1区)分别能够鉴定出川贝及其各变种,伊贝母。 4 设计了三对专用于浙贝母鉴定的特异性PCR引物:(1)FthP1与FthP2,(2)FthP2与FthP3,(3)FthP1与FthP4,分别在60℃,60℃,62℃的复性温度下能有效鉴别浙贝母。此项已申请国家专利。设计了一对用于鉴定伊贝母的特异性PCR引物FpdP_2与FpdP_3,在67℃复性温度的条件下,只能特异地从伊贝母的DNA模板中得到扩增产物,因此可成功地鉴别出伊贝母。
【学位授予单位】:南京农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2003
【分类号】:S567.2

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【引证文献】
中国期刊全文数据库 前3条
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中国重要会议论文全文数据库 前1条
1 王果平;李晓瑾;;新疆贝母属植物鉴定研究进展[A];中华中医药学会第十届中药鉴定学术会议暨WHO中药材鉴定方法和技术研讨会论文集[C];2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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【共引文献】
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中国重要会议论文全文数据库 前10条
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中国博士学位论文全文数据库 前10条
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中国硕士学位论文全文数据库 前10条
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2 韩鸿萍;暗紫贝母药用有效成份提取工艺及化学成份的研究[D];青海师范大学;2010年
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9 康晓飞;芍药根内主要活性物质与营养成分的研究[D];山东农业大学;2011年
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【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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中国博士学位论文全文数据库 前1条
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中国硕士学位论文全文数据库 前2条
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【二级引证文献】
中国期刊全文数据库 前5条
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中国硕士学位论文全文数据库 前4条
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中国期刊全文数据库 前10条
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【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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中国重要报纸全文数据库 前1条
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6 赵际勐;中国近代中药药理学简史[D];中国中医科学院;2012年
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10 王莉;湖北贝母炮制工艺及质量标准的研究[D];湖北中医药大学;2010年
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