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《南京农业大学》 2005年
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弯曲乳酸杆菌HB02的培养鉴定及部分生物学特性的研究

曹冬梅  
【摘要】:用双层琼脂法及液体厌氧富集培养法培养鉴定了一株弯曲乳酸杆菌HB02。该菌在双层培养基上生长,菌落较小、圆形、淡乳白色、边缘整齐光滑、直径0.9-1.1mm;菌体为革兰氏阳性无芽孢杆菌,无鞭毛,不能运动;兼性厌氧;生长最适温度为37~42℃,最适pH值为6.2~6.8;接触酶阴性,不液化明胶,不还原硝酸盐,不产生吲哚、硫化氢,不分解尿素,MR反应阳性,能发酵多种糖类;生长速度快、产酸能力强。通过分子生物学方法测定该菌株的16S rRNA序列,进一步证实HB02为一株乳酸杆菌。通过HB02 16S/23S rRNA基因间隔(Intengenic Spacer Regions,ISR)序列的扩增和测定,再通过基因文库中所有细菌基因序列的对照比对,最终鉴定HB02为弯曲乳酸杆菌(Lactobacillus curvatus)。 通过气相色谱和比色法,测定弯曲乳酸杆菌HB02在MRS培养基中有氧培养24h后挥发性脂肪酸及有机酸含量分别为乙酸51.75 m mol/L,丙酸0.77 m mol/L,丁酸0.37 m mol/L,乳酸28.06 m mol/L。利用分离的乳杆菌菌株以及乳杆菌参考菌株(植物乳杆菌AS0.30等),在体外分别与本实验室保存的兔源沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、鸡源及牛源大肠杆菌毒株作用24h后,以菌落计数法检测了几株乳杆菌对常见病原菌的抑菌效果,实验结果表明乳杆菌对上述致病菌均有较明显的抑菌作用。 为探讨弯曲乳酸杆菌HB02与几株用于食品工业的乳杆菌(植物乳杆菌AS1.30等)对真菌生长与产毒的影响,将乳酸杆菌与真菌孢子悬液同时加入到MRS肉汤;以乳酸将PYG培养基的初始pH值调整为3.0,4.0,和5.0,以pH值6.8为对照组,在PYG培养基中接种真菌孢子悬液,均在28℃培养15d。在培养的第3、6、9、12和15天测定培养液中的pH值、黄曲霉毒素B1和黄曲霉或禾谷镰刀菌菌丝重量。结果显示,与对照组相比,弯曲乳酸杆菌可显著抑制黄曲霉生长及黄曲霉毒素B1的产生(p0.01);亦可显著抑制禾谷镰刀菌生长(p0.01);与植物乳杆菌AS1.30等对真菌的抑制作用比较,效果无显著差异(p0.05)。随着PYG培养液中pH值的降低,黄曲霉毒素B1的量有增加的趋势,pH值3.0~5.0各组间黄曲霉菌丝量未见显著性差异(p0.05)。
【学位授予单位】:南京农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:Q939.9

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1 曹冬梅;弯曲乳酸杆菌HB02的培养鉴定及部分生物学特性的研究[D];南京农业大学;2005年
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