收藏本站
《南京农业大学》 2005年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

两株H5N1亚型禽流感病毒诱导的细胞凋亡研究

余丹丹  
【摘要】:禽流感病毒以感染禽类引起大爆发和急性死亡为特征,但近年来,禽流感病毒已经能够跨越种间屏障直接感染人了。研究病毒-宿主相互作用对于阐明病毒引起疾病的机理起到至关重要的作用。流感病毒诱导的细胞凋亡,涉及到各方面的问题,包括细胞和病毒因子的相互关系、细胞种类等因素。对于禽流感病毒感染诱导的细胞凋亡作用既可能是有利于病毒的扩散,也可能是机体对病毒感染的防御反应。本研究目的是在了解禽流感病毒的NSl基因引起细胞凋亡的基础上,进一步探索全病毒对鸡胚成纤维细胞以及哺乳动物的作用,为阐明禽流感病毒的致病机理提供理论依据。 实验中我们选择了生物学特性差异明显A/Duck/Guangdon/40/2000(H5N1)(简称DKGD/40/00)和A/Duck/Guangxi/35/2001(H5N1) (简称DKGX/35/01)两株H5N1亚型禽流感病毒来进行实验,DKGD/40/00和DKGX/35/01同属于H5N1亚型禽流感病毒,对于禽类是高致病性的,而在小鼠上,DKGD/40/00是感染不致死,DKGX/35/01是感染且致死小鼠。我们把这两株病毒的NS1基因进行了克隆,应用荧光显微镜检测构建于真核表达载体pIRES2-EGFP的NS1蛋白的转染表达效率及瞬时表达,应用TUNEL和流式细胞仪观察NS1蛋白与凋亡的关系。结果表明:两株病毒NS1蛋白表达均能诱导Hela细胞凋亡,凋亡率最高可达15.29%,但是两者间并无明显差异。由此说明单一的NS1并不能完全阐明凋亡的产生与病毒毒力强弱和病毒扩散之间的关系。 在了解禽流感病毒的NS1基因引起细胞凋亡的基础上,我们研究了这两株病毒对鸡胚成纤维细胞的凋亡作用,结果发现经过病毒诱导后,细胞出现生长特性及细胞形态学的改变,DNA电泳出现典型梯状条带;流式细胞仪显示凋亡峰出现,凋亡率最高可达23.64%,且两种病毒诱导的细胞凋亡差异极显著,DKGX/35/01诱导的细胞凋亡率明显高于DKGD/40/00。结论:H5N1亚型禽流感病毒可诱导体外培养鸡胚成纤维细胞发生凋亡,且跟病毒的毒力有关。 1997年香港H5N1禽流感病毒感染人事件发生表明禽流感病毒正在获得感染人的能力,在分子水平及其细胞水平的研究基础上,为了了解禽流感病毒对哺乳动物的致病机理与细胞凋亡的关系,我们用两株H5N1亚型高致病性禽流感病毒感染BALB/C小鼠后,采集心、肝、脾、肺、肾、脑和胰等器官,用免疫组织化学的方法检测了病毒抗原的位置;同时,还应用TUNEL方法来检测这些组织中的凋亡信号。结果表明,
【学位授予单位】:南京农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:S852.65

手机知网App
【引证文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 李建丽;张万坡;毕丁仁;;A型流感病毒NS1蛋白研究进展[J];微生物学报;2007年04期
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 李建丽;禽流感病毒非结构蛋白与宿主相关蛋白相互作用及感染鸡组织病理学研究[D];华中农业大学;2008年
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 郭延锋;CSISV人工感染SPF雏鸡和商品肉仔鸡后免疫器官的细胞凋亡[D];河南科技学院;2010年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 宁安红,黄敏,吴天靖,李岩,张卓然,王春花;副流感病毒治疗小鼠腹水型肝癌、小鼠肉瘤S_(180)腹水瘤的实验研究[J];大连医科大学学报;1996年03期
2 冉旭华,崔玉东,朴范泽;病毒感染与细胞凋亡[J];动物医学进展;2003年04期
3 段炼;甲型流感病毒NS1蛋白功能研究进展[J];国外医学.病毒学分册;2004年02期
4 李华玲,李明远;流行性感冒病毒诱导细胞凋亡的研究进展[J];国外医学.临床生物化学与检验学分册;2001年02期
5 李玲;细胞凋亡的分子机制及其调控因子[J];国外医学(免疫学分册);2002年06期
6 张春斌,宋汉君,刘东璞;细胞凋亡与病毒感染[J];黑龙江医药科学;2004年06期
7 吴波;细胞凋亡检测技术进展及其应用[J];临床与实验病理学杂志;1997年03期
8 赵贵军,徐旭士;病毒感染引发细胞凋亡[J];生命科学;1997年02期
9 王艾琳,李坚;病毒与细胞凋亡[J];自然杂志;2004年03期
10 彭开松,佘锐萍;动物病毒与宿主细胞的细胞凋亡[J];中国兽医杂志;2004年11期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 陈平,吴海洋;病毒感染与宿主细胞凋亡[J];池州师专学报;2000年03期
2 高丰,金天明,姜宁,楮秀玲;细胞凋亡的研究现状与发展趋势[J];动物医学进展;2003年06期
3 Parveen Salahuddin;Asad U.Khan;;Structural and Functional Analysis of NS1 and NS2 Proteins of H1N1 Subtype[J];Genomics, Proteomics & Bioinformatics;2010年03期
4 王欢,吴中明;流感病毒诱导细胞凋亡的研究进展[J];国外医学.病毒学分册;2005年04期
5 李华玲,李明远;流行性感冒病毒诱导细胞凋亡的研究进展[J];国外医学.临床生物化学与检验学分册;2001年02期
6 刘晓云;杨连生;王继华;彭运平;冯红;巫宏伟;张建;李国存;李辉;;基于流感A&B核蛋白的高灵敏度免疫层析的快速诊断方法的建立及临床应用[J];现代食品科技;2011年11期
7 孟明;陈冬志;武变瑛;许文杰;吴素焕;刘春颖;;痰热清注射液对流感病毒感染小鼠免疫功能的影响[J];河北大学学报(自然科学版);2006年05期
8 季宇彬,王胜惠,高世勇,汲晨锋,邹翔,王帅帅;龙葵活性成分的研究[J];哈尔滨商业大学学报(自然科学版);2004年06期
9 张新;王胜惠;刘一梅;;细胞凋亡与生物碱[J];黑龙江医学;2006年06期
10 李虹,李华林,李婉宜,肖丽英,蒋中华,李明远,汪晓东,张林;流感病毒诱导肿瘤细胞凋亡及其机制的研究[J];四川大学学报(医学版);2003年03期
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 焦健华;Opsin3基因与人肝癌细胞5-氟尿嘧啶耐药性关系的研究[D];南京医科大学;2009年
2 张文韬;基于量子点的禽流感病毒检测新方法探索[D];武汉大学;2010年
3 冯强;H9N2亚型流感病毒HA基因变异分析及对鸡免疫机能的影响[D];山东农业大学;2010年
4 李姵萱;疏肝清毒汤诱导人肝癌细胞HepG-2凋亡及其机制的实验研究[D];广州中医药大学;2011年
5 安青;补精解毒方组分对肺癌A549细胞核转录因子NF-KB、AP-1的影响[D];南京中医药大学;2011年
6 刘翠权;广西395个规模猪场猪呼吸道疾病综合征的病原学调查及防控措施[D];南京农业大学;2011年
7 魏萍;SAg-SEB和MDV诱导雏鸡与荷瘤小鼠免疫学变化及细胞凋亡的研究[D];东北农业大学;2000年
8 李建伟;欧亚大陆H9N2亚型禽流感病毒分子演化的研究[D];东北农业大学;2002年
9 李艳华;抗禽流感病毒中药及盐酸金刚烷胺诱导M2基因变异的研究[D];东北农业大学;2003年
10 刘玉锋;不同毒力的IBDV毒株致病特性和免疫特性的比较研究[D];中国农业大学;2004年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 李正平;猪流感病毒H_3N_8亚型NA基因的克隆和原核表达及间接ELISA方法的建立[D];华中农业大学;2010年
2 朱晓林;三株不同亚型SIV HA基因与NA基因克隆与序列分析[D];山东农业大学;2010年
3 王艳艳;山东省猪繁殖与呼吸综合征、猪流感流行病学调查[D];山东农业大学;2010年
4 郭延锋;CSISV人工感染SPF雏鸡和商品肉仔鸡后免疫器官的细胞凋亡[D];河南科技学院;2010年
5 阎秀琴;山东省日照地区H9亚型AIV的分离、鉴定及HA基因的序列分析[D];山东农业大学;2010年
6 王广美;猪H3N2亚型流感病毒遗传变异和感染特性研究[D];吉林大学;2011年
7 施金凤;小儿肺炎与阳明内热的相关性研究[D];北京中医药大学;2011年
8 温咏平;脂麻花醇提物体外抗肿瘤生物活性及其机理的初步研究[D];暨南大学;2010年
9 赵洪梅;H1N1型猪流感病毒血凝素HA1重组乳酸菌的制备和免疫保护效果研究[D];吉林农业大学;2011年
10 韩阳平;Th1/Th2细胞及其相关细胞因子在口腔扁平苔藓发病中作用的探讨[D];福建医科大学;2011年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 郑丽舒;段招军;;A型流感病毒M2蛋白疫苗的研究进展[J];病毒学报;2006年06期
2 刘光伟;夏雪培;赵勇;;Toll样受体信号传导途径的研究进展[J];动物学杂志;2005年06期
3 林祥梅,赵增连,陈万芳;鸭源流感病毒人工感染鸡后诱导的细胞凋亡[J];北京农学院学报;2000年02期
4 毕英佐;;H_9N_2亚型禽流感的流行现状和防治措施[J];家禽科学;2007年11期
5 潘耀谦,高丰,成军;细胞凋亡与细胞坏死比较的研究进展[J];动物医学进展;2000年04期
6 冉旭华,崔玉东,朴范泽;病毒感染与细胞凋亡[J];动物医学进展;2003年04期
7 朱建国;A型流感病毒基质蛋白研究进展[J];动物医学进展;2004年02期
8 曹梅,田夫林,庄文忠;禽流感病毒血凝素分子生物学研究进展[J];动物医学进展;2004年02期
9 黄淑坚,廖明,辛朝安,苏广基;AIV致病分子基础的研究进展[J];动物医学进展;2004年03期
10 卢建红,邵卫星,龙进学,刘秀梵;A型流感病毒毒力因子研究进展[J];动物医学进展;2004年04期
中国博士学位论文全文数据库 前4条
1 李建伟;欧亚大陆H9N2亚型禽流感病毒分子演化的研究[D];东北农业大学;2002年
2 孙博兴;H9N2亚型禽流感非结构蛋白NS1A基因的克隆、表达及其诱导Hela细胞凋亡的研究[D];吉林大学;2005年
3 王坤;禽流感病毒NS1A重组蛋白联合黄芩苷抗肿瘤作用研究[D];吉林大学;2007年
4 宋卉;雏鸵鸟免疫器官的形态学特点及鸡源NDV对雏鸵鸟致病机理的研究[D];华中农业大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前8条
1 朱国坡;RT-PCR和荧光定量RT-PCR检测CSISV在SPF雏鸡体内分布[D];河南科技学院;2010年
2 李翔;新城疫F48E8病毒体内诱导鸡胸腺和法氏囊淋巴细胞凋亡的研究[D];广西大学;2005年
3 刘玉洁;ALV-J和REV诱导雏鸡胸腺和法氏囊细胞凋亡的研究[D];山东农业大学;2006年
4 张卓;H5N1亚型禽流感病毒感染雏鸡的病理学变化及其发生机制[D];东北农业大学;2007年
5 金梅花;H5N1亚型禽流感病毒感染雏鸡免疫器官免疫变化及机理[D];东北农业大学;2007年
6 王林;CSISV的部分特性研究及病毒纯化和中和试验[D];河南农业大学;2008年
7 王保利;CSISV对肉仔鸡主要免疫器官的致病性及免疫的影响[D];湖南农业大学;2008年
8 宋辉;鸡生长与免疫抑制综合征病毒对肉仔鸡CD3~+、CD4~+、CD8~+、SIgA和ND、IBD特异性抗体的影响[D];河南农业大学;2009年
【二级引证文献】
中国期刊全文数据库 前2条
1 迟莹;卞倩;李燕;张文帅;温恬;焦永军;;H3N2流感病毒非结构蛋白-1真核表达载体的构建与表达及其对293T细胞增殖的影响[J];南京医科大学学报(自然科学版);2012年01期
2 卞倩;张文帅;迟莹;李燕;焦永军;;禽流感病毒H5N1亚型NS1蛋白的真核表达及其在细胞中的分布[J];中国预防兽医学报;2011年09期
中国博士学位论文全文数据库 前2条
1 李建丽;禽流感病毒非结构蛋白与宿主相关蛋白相互作用及感染鸡组织病理学研究[D];华中农业大学;2008年
2 柴洪亮;黑龙江地区野生鸟类禽流感的分子流行病学调查研究[D];东北林业大学;2012年
中国硕士学位论文全文数据库 前4条
1 喻翠翠;猪结合珠蛋白单克隆抗体的制备及初步应用[D];华中农业大学;2010年
2 曾琳姣;流感病毒NS1蛋白对细胞生长调控及与Nucleolin相互作用的研究[D];天津大学;2012年
3 马宏伟;禽流感病毒对感染雏鸭红细胞免疫功能和IFN-γ mRNA表达的影响及其机制[D];东北农业大学;2009年
4 周春峰;甲型H1N1(2009)流感病毒HA的原核表达、抗体制备及初步应用[D];河南工业大学;2011年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 宁安红,黄敏,吴天靖,李岩,张卓然,王春花;副流感病毒治疗小鼠腹水型肝癌、小鼠肉瘤S_(180)腹水瘤的实验研究[J];大连医科大学学报;1996年03期
2 张庆玲,丁彦青,贺莉,王蔚,张进华,王慧君,蔡俊杰,耿舰,陆药丹,罗元龙;SARS病变组织细胞凋亡检测及其意义[J];第一军医大学学报;2003年08期
3 赵明才,唐恩洁,朱道银;与病毒感染相关的细胞凋亡分子[J];国外医学.病毒学分册;2001年01期
4 刘小方;丙肝病毒感染与细胞凋亡(文献综述)[J];国外医学.外科学分册;2001年04期
5 李玲;细胞凋亡的分子机制及其调控因子[J];国外医学(免疫学分册);2002年06期
6 黄敏,宁安红,张卓然,李燕,王新江,陆虹,段树学,张凌林;纯化的甲型流感病毒、新城鸡瘟病毒免疫治疗S_(180)荷瘤鼠实验研究[J];齐鲁肿瘤杂志;1996年02期
7 李静,白玉梅;病毒感染与细胞凋亡[J];山西师范大学学报(自然科学版);2003年01期
8 刘菲菲,何士勤;抗流感病毒药物与细胞凋亡[J];医药导报;2002年04期
9 王新玲,李月彩,侯颖春;自由基、细胞凋亡与衰老关系的研究进展[J];中国老年学杂志;1999年04期
10 郭爱珍,陆承平;病毒感染调控细胞凋亡[J];中国兽医杂志;1998年07期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 李曦,田国彬,唐秀英,于康震;禽流感病毒河北株的分离鉴定[J];中国预防兽医学报;2000年S1期
2 刘金华,田克恭;高度重视高致病性禽流感病毒的公共卫生学意义[J];中国实验动物学报;2004年04期
3 牧野晶子;姚月歌;;禽流感病毒[J];日本医学介绍;2006年09期
4 孙进华;马波;于志丹;霍慧;王君伟;;A型禽流感病毒NS1蛋白的表达及其诱导细胞凋亡功能的研究[J];中国兽医科学;2009年04期
5 新华;;H5N1高致病性禽流感病毒可在家禽羽毛中持续存在[J];中国家禽;2010年20期
6 贺番;曹瑞兵;郝永清;;禽流感病毒非结构蛋白NS1的分子生物学特性与功能[J];动物医学进展;2007年04期
7 路冰;陈化兰;包红梅;王秀荣;张秀英;;禽流感病毒非结构蛋白NS1在感染和免疫中的作用[J];中国畜牧兽医;2011年05期
8 ;中国成功完成禽流感病毒关键结构解析[J];中国牧业通讯;2009年04期
9 ;美研究发现抗多种流感病毒人单克隆抗体[J];生物工程学报;2009年03期
10 张艳;;流感病毒如何传染人类?[J];华东科技;2009年07期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 李玉谷;叶远兰;张媛;马勇江;周泉鹤;崔聪颖;剡海阔;李楚宣;;H5N1亚型高致病力禽流感病毒人工感染鸭的细胞凋亡研究[A];中国畜牧兽医学会动物解剖学及组织胚胎学分会第十四次学术研讨会论文集[C];2006年
2 张洪军;;禽流感后养禽业如何走出低谷[A];“科技进步推进畜牧业现代化”科技论文集[C];2011年
3 单芬;郑煦灿;韦良孟;徐成刚;罗开健;任涛;辛朝安;焦培荣;廖明;;一株H5N2亚型鹦鹉源禽流感病毒分子进化分析[A];中国畜牧兽医学会禽病学分会第十五次学术研讨会论文集[C];2010年
4 李艳华;佟恒敏;于康震;;抗禽流感病毒中草药的研究[A];中国畜牧兽医学会2003年学术年会论文集[C];2003年
5 高雪丽;;抗禽流感病毒免疫的研究进展[A];2008年中国病理生理学会第十一届肿瘤和第十二届免疫专业委员会学术会议论文集[C];2008年
6 何义林;叶冬青;;禽流感病毒对人类感染机制的研究进展[A];第二届全国人畜共患病学术研讨会论文集[C];2008年
7 李英霞;杨丽丽;高睿;;禽流感的危害与防制[A];中国畜牧兽医学会禽病学分会第十四次学术研讨会论文集[C];2008年
8 孙恩泽;谢敏;赵海粟;黄碧海;刘书琳;张万坡;张志凌;王汉中;庞代文;;量子点标记禽流感病毒[A];第六届全国化学生物学学术会议论文摘要集[C];2009年
9 陈化兰;;中国H5N1禽流感病毒的进化和疫苗研究研制及应用[A];全国人畜共患病学术研讨会论文集[C];2006年
10 刘桂林;张小辉;王锦平;;禽流感病毒H6N2亚型NA基因序列相关肽链特性及其二级结构分析[A];全国动物生理生化第十一次学术交流会论文摘要汇编[C];2010年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 本报记者 王均珠;贵阳制定三项措施防范“人禽流感”[N];贵阳日报;2005年
2 新华社记者  卢苏燕;人类如何赢得与禽流感的赛跑[N];光明日报;2006年
3 颜亮;新年禽流感在全球卷土重来[N];经济参考报;2007年
4 本报记者 叶芳 通讯员 邹钦;多休息勤洗手 远离禽流感[N];广东科技报;2008年
5 黄显斌;对付禽流感:三十六计“走”为上[N];大众科技报;2005年
6 陈汉桥;大连提出急性胰腺炎细胞凋亡新论[N];中国医药报;2001年
7 朱玉;禽流感还要“飞”多远?[N];科技日报;2005年
8 见习记者 杨茜;我市防控禽流感进入[N];嘉兴日报;2005年
9 张孟军;禽流感病毒H5N1正在突变[N];科技日报;2004年
10 李学梅;此次流感病毒并未发生大变异[N];北京日报;2007年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 刘光伟;低剂量电离辐射对小鼠睾丸生精细胞凋亡的影响及其基因调控[D];吉林大学;2004年
2 张公文;银杏叶提取物对大鼠心脏移植心肌细胞凋亡影响的实验研究[D];山东大学;2004年
3 刘宗超;实验性脑出血中NF-κB的作用机制及巴曲酶保护作用的研究[D];吉林大学;2005年
4 张秀花;针刺对MCAO大鼠缺血半暗带影响的基础研究[D];黑龙江中医药大学;2005年
5 吴强;ERK1/2、p38MAPK在鱼藤酮中毒诱导的神经细胞凋亡和iNOS表达中的作用研究[D];第三军医大学;2005年
6 袁长青;神经酰胺和凋亡诱导因子在UVA诱导细胞凋亡中的作用[D];第一军医大学;2005年
7 刘正学;SARS病毒特异性抗原抗体基因和N基因的研究[D];武汉大学;2005年
8 高巍然;2-甲氧基雌二醇对骨髓瘤细胞作用的体外实验研究[D];第二军医大学;2005年
9 徐波;糖皮质激素对ALL细胞Bim、Puma表达的影响及HA14-1诱导ALL细胞凋亡的途径[D];中国医科大学;2006年
10 冯蕾;瘤内注射化疗药物对微波消融肝肿瘤的增敏作用[D];中国人民解放军军医进修学院;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 余丹丹;两株H5N1亚型禽流感病毒诱导的细胞凋亡研究[D];南京农业大学;2005年
2 刘红彦;H9N2 AIV的NS1基因原核与真核表达及NS1蛋白对几种细胞凋亡的影响[D];西北农林科技大学;2010年
3 邬成业;禽流感病毒H5N1亚型河南分离株NP基因的原核表达及T细胞表位筛选[D];郑州大学;2010年
4 赵会连;不同处理和不同保存时间对重组(H5N1亚型,Re-5株)禽流感病毒效力的影响[D];河南农业大学;2010年
5 孙宇;禽流感病毒血凝素的分离纯化以及快速评估其宿主特异性方法的研究[D];西北大学;2010年
6 王建琪;禽流感野鸭源分离株H2N2亚型和H3N8亚型基因特征及遗传进化分析[D];东北林业大学;2011年
7 林彬彬;禽流感病毒H9亚型福建分离株的全基因组测定及遗传演化分析[D];福建农林大学;2011年
8 张强哲;H5亚型禽流感病毒HA DNA疫苗的研究[D];西北农林科技大学;2003年
9 王章泽;安徽与辽宁部分农村卫生人员人/禽流感防控知识知晓现况研究[D];安徽医科大学;2010年
10 黄娟;单抗介导的斑点免疫金渗滤法(DIGFA)快速检测禽流感病毒[D];河南农业大学;2003年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026