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《南京农业大学》 2006年
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黑曲霉产酶特性研究及其酶制剂在猪饲料中的应用

郑腾  
【摘要】: 黑曲霉(Aspergillus niger,An)具备产生多种胞外水解酶的能力。以An FJ-008作为出发菌株,经诱变获得了菌株An SL2-111,通过对发酵工艺的优化,确定了An SL2-111最适培养基组成和适宜的工艺条件,并应用于工业化生产。探讨该菌酸性蛋白酶粗酶液的提取技术和纯酶的分离纯化技术,并对其酶学特性、氨基酸组成、动力学性质和活性必需基团进行了研究。采用RT-PCR和PCR技术对An SL2-111的酸性蛋白酶基因进行了克隆和测序。采用An SL2-111生产饲料复合酶制剂,饲喂35日龄长白×大约克二元猪,能提高猪对营养物质的消化吸收率和生长性能。 1 An SL2-111的选育 出发菌株An FJ-008通过紫外线、紫外线和亚硝基胍复合诱变后,获得1260个单菌落,从鉴定平板上挑选到139株变异辐度较大的菌株。将139株变异株按水解圈的大小排列,从不同区域均匀取样,共选取16个菌株。经三角瓶固体发酵培养后,用SPSS10.0对16株菌株所产的酸性蛋白酶发酵酶活、纤维素酶发酵酶活和果胶酶发酵酶活进行相关分析,发现酸性蛋白酶发酵酶活与纤维素酶、果胶酶发酵酶活的变化呈正相关,因此选择以酸性蛋白酶发酵酶活的高低作为菌种筛选的依据。采用此依据经3次复筛后,获得1株酸性蛋白酶高产菌株An SL2-111。 An SL2-111与An FJ-008在形态上有所区别。前者在基础发酵培养基上培养72 h,每克鲜曲酸性蛋白酶发酵酶活达4525 U、果胶酶发酵酶活达701 5 U、纤维素酶发酵酶活达4497 U,分别比出发菌株An FJ-008提高了97.9%、70.1%和13.4%,而且该菌株经斜面传代培养5代,产酶特性稳定。 2 An SL2-111发酵工艺的优化 以酸性蛋白酶发酵酶活为响应值,采用单因素搜索和正交试验对An SL2-111固体发酵工艺进行优化,结果表明An SL2-111适宜在高碳低氮的培养基中生长,添加无机氮源对菌株产酶影响不大。发酵培养基本上可分为两个阶段:第一个阶段为生长培养期(0~24 h),这个阶段菌丝大量形成,基本上不产酶;第二为产孢和产酶阶段(24~60 h)。采用配方培养基和工艺,在250 mL三角瓶中进行验证实验,酸性蛋白酶发酵酶活达6428 U/g,果胶酶和纤维素酶发酵酶活分别为8245 U/g和4911 U/g。 3酸性蛋白酶粗酶液的提取及其稳定剂的研究 比较了不同溶剂从固体发酵物中提取酸性蛋白酶粗酶的效果,结果表明用0.1mol/L乳酸-乳酸钠缓冲液(pH3.5)浸提的效果最好,与2%氯化钠相比回收率提高约50%。在此基础上确立了最适的浸提工艺,即采用10倍的0.1 mol/L的磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液(pH5.0)于40℃下浸泡60 min后,酸性蛋白酶粗酶的提取较为完全。在对粗酶液的酶学性质进行研究后表明,其适宜pH范围为2.0~4.0。最适作用pH为3.0,pH稳定性范围为3.0~6.0;适宜的温度作用范围为50~60℃,最适作用温度为55℃,粗酶液在30℃和40℃下都较为稳定。 粗酶液稳定性的试验结果表明,5%的丁醇、5%的山梨酸钾、氯化钠、明胶、黄原胶和淀粉均有利于粗酶液酶活的保存。粗酶液稳定性长效试验表明1%的黄原胶能使粗酶液的酶活在25℃下保持约45 d。 4 An SL2-111酸性蛋白酶的分离纯化及其酶学特性 采用硫酸铵盐析、DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换层析、Sephacryl S-200分子筛层析和高效液相色谱等方法,从An SL2-111的发酵液中提取了一种酸性蛋白酶,经SDS-PAGE验证该酶纯化水平已达到电泳纯。纯化酶的表观分子量约为47×10~3,最适pH值为3.0,最适pH范围为2.6~3.6,pH稳定性范围为4.0~5.0,最适温度为60℃,最适温度范围为50~65℃,该酶有较好的热稳定性,在40℃或50℃下处理60 min,仍保持85%以上的活力。Cu~(2+)、Mn~(2+)对纯化酶有激活作用,Hg~(2+)、Ag~(2+)则对纯化酶有轻度的抑制作用。纯化酶的氨基酸组成中,极性酸性氨基酸占17.29%,极性碱性氨基酸占4.50%,极性中性氨基酸占38.50%,其它为非极性氨基酸;N端氨基酸序列为SKGSAVTTPQ,经序列同源性比对,表明该酶与其它曲霉菌株酸性蛋白酶具有极高的同源性。 酸性蛋白酶对酪蛋白的水解性能最强,对牛血红蛋白及牛血清白蛋白次之,而对鸡卵清蛋白的水解性能最弱。动力学研究结果表明,酪蛋白的米氏常数最小(Km=0.22g/L),最大反应速度Vmax为555.56μg Tyr/min mL,亲和常数最大(Vmax/Km=2525.27),因此酪蛋白是该酶的最适底物。 5 An SL2-111酸性蛋白酶活性必需基团的研究 采用N-溴代琥珀酰亚胺(NBS)、对氯汞苯甲酸(PCMB)、N-乙酰咪唑(N-AI)、二硫苏糖醇(DTT)、乙酰丙酮(Acetyl acetone)、顺丁烯二酸酐(MA)、溴代乙酸(BrAc)和碘化-环已基-3-(3-三甲氨基丙基)碳二亚胺(CDC)等8种化学修饰剂对酸性蛋白酶的氨基酸侧链基团进行修饰,然后检测残留酶活,结果表明,色氨酸残基、组氨酸残基、酪氨酸残基以及二硫键是酶活性必需基团,而氨基、巯基、羧基和精氨酸残基与酶活性无关。 6 An SL2-111酸性蛋白酶基因的克隆与序列分析 采用RT-PCR和PCR技术从An SL2-111的菌丝体中克隆了酸性蛋白酶的基因序列,该序列包含有1339 bp,包含有4个外显子和3个内含子,与An和Aspergillus saitoi的曲霉胃蛋白酶Ⅰ染色体组DNA的核苷酸序列的同源性达到97%,该基因所编码的蛋白质含有前体,N端70~79位氨基酸序列为SKGSAVTTPQ。 7 An SL2-111产饲料复合酶制剂对猪的饲养效果 利用An SL2-111发酵生产的饲料复合酶制剂中含有酸性蛋白酶6290 U/g、纤维素酶4909 U/g、果胶酶5196 U/g和淀粉酶52385 U/g,将其按0%、0.5%、1.0%和1.5%的不同添加量,饲喂35日龄长白×大约克二元杂交仔猪128头,试验期为63d,每21d测定一次增重和耗料、营养物质表观消化率和血液生化指标。结果表明,饲料复合酶制剂能够明显提高仔猪的生产性能和营养物质的消化率,粗纤维、粗蛋白、粗灰分、钙和磷表观消化率的差异均达到显著水平(P<0.05),血清中的总蛋白、白蛋白、球蛋白、葡萄糖和尿素氮的水平均有不同程度地增加,酶制剂对猪只的心脏、肝脏和肾脏的结构与功能没有影响。所有加酶的处理组中,以0.1%的加酶组效果最好,它能使3个生长阶段的仔猪增重分别比对照组提高13.57%、30.47%和34.10%,料肉比分别降低21.26%、9.88%和13.11%,而且各种营养物质的表观消化率均与对照组有显著差异(P<0.05)。
【学位授予单位】:南京农业大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2006
【分类号】:S828.5

【引证文献】
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1 邵淑娟;李铁柱;李倬林;孙悦;杨贞耐;;凝乳酶高产菌株的超声波-紫外复合诱变育种及其发酵条件的优化[J];中国酿造;2011年02期
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1 刘金海;黑曲霉菌在生物发酵饲料上的应用及其产品对动物抗病力的影响[D];吉林大学;2012年
【参考文献】
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1 朱元招,刘亚力,陈宏,韩定忠;补饲不同配方酶制剂对断奶犊牛生产性能的影响[J];中国草食动物;2001年03期
2 史钧;饲用酶制剂对布列塔尼亚兔红细胞免疫吸附性能的影响[J];中国草食动物;2005年02期
3 张璘,鱼红闪,金凤燮;真菌中RNA的提取方法[J];大连轻工业学院学报;2004年01期
4 刘文斌,周岩民,王荣根;两种酶制剂在中华鳖养殖中的应用研究[J];淡水渔业;1997年06期
5 胡薛英,蔡双双;肠道疾病:猪群生长速率和效益的大敌[J];动物医学进展;2000年03期
6 许怡;杨福定;;用酸性蛋白酶添加剂饲喂小肉猪试验[J];饲料工业;1993年12期
7 王冉,周岩民,刘迎春;肉鸡玉米—豆粕型日粮中添加酶制剂的试验研究[J];饲料工业;1999年09期
8 杨玉华,刘德海,李新杰,王松岭;复合酶在北京肉鸭日粮中的应用效果[J];饲料工业;2000年01期
9 李玲;世界饲料添加剂工业发展趋势[J];饲料工业;2000年04期
10 卿中全,于炎湖,吴谋成,齐德生,刘耘,陈慈麟,李新元,程烨,王友平;酶制剂处理“双低”菜籽粕饲喂生长肥育猪研究[J];饲料工业;2000年04期
【共引文献】
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1 高淑霞;饲用酶制剂及其在畜禽饲养中的应用研究进展[J];山东农业科学;2001年05期
2 张桂芝;武彬;井庆川;刘辉;石天虹;刘雪兰;魏祥法;刘瑞亭;;微小毛霉凝乳酶基因的克隆及在毕赤酵母GS115中的表达[J];山东农业科学;2009年11期
3 张桂芝;武彬;黄保华;刘雪兰;石天虹;井庆川;刘雪兰;魏祥法;;重组凝乳酶摇瓶发酵条件的初步优化研究[J];山东农业科学;2009年12期
4 王磊;张丙春;李金香;赵平娟;;磷酸氢钙中钙含量测定方法的改进[J];山东农业科学;2010年07期
5 孙玉军,陈彦,王洵,李燕斐;蜜环菌胞外多糖的分离纯化及其性质研究[J];安徽大学学报(自然科学版);2005年05期
6 王晓林;陶玉贵;李鹤飞;肖苏峰;;酸性蛋白酶饲料固态发酵条件的研究[J];安徽工程科技学院学报(自然科学版);2006年02期
7 叶生梅;;稻草秸秆预处理实验研究[J];安徽工程科技学院学报(自然科学版);2008年04期
8 朱旺生,陈双梅;酶制剂在家禽生产中的应用[J];安徽农学通报;2004年02期
9 侯新东;盛桂莲;张桦;腊萍;;质粒DNA提取方法的探讨[J];安徽农学通报;2006年13期
10 蔡海路;苏加义;;酶制剂对獭兔生产性能影响的研究[J];安徽农学通报;2007年12期
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1 王在贵;何瑞国;钱世钧;刘朝良;;特异腐质霉纤维素酶的酶谱分析[A];现代农业理论与实践——安徽现代农业博士科技论坛论文集[C];2007年
2 张新妙;马润宇;;用膜结晶技术制备蛋白质晶体的研究[A];第二届全国膜分离技术在食品工业中应用研讨会论文集[C];2006年
3 高娟;唐明森;王艳玲;蒋再学;竺薇;罗满林;;重组猪α干扰素发酵工艺的研究[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集[C];2012年
4 邓利玲;胡小芳;卢明玥;钟耕;;冷榨南瓜子饼蛋白粉酶法水解工艺及其产物性质研究[A];管产学研助推食品安全重庆高峰论坛——2011年中国农业工程学会农产品加工及贮藏工程分会学术年会暨全国食品科学与工程博士生学术论坛论文集[C];2011年
5 马天良;谢幸珠;张覃华;孙祥明;;苏云金杆菌发酵动力学研究[A];杀虫微生物[C];1992年
6 李彦臻;杨利国;;奶牛Y精子膜蛋白的提取与分析[A];第三届中国奶牛发展大会论文集[C];2008年
7 吕贞龙;尹召华;徐庆龙;俞步清;;复合酶对泌乳奶牛生产性能的影响[A];首届中国奶业大会论文集(上册)[C];2010年
8 唐茂妍;王海彦;计成;;最佳酶制剂应用体系(OEA)的理论与实践[A];饲用酶制剂开发与应用技术交流研讨会论文集[C];2010年
9 王大海;林兆京;舒会友;张和良;金俭;;酶制剂在断乳仔猪上的应用[A];饲用酶制剂开发与应用技术交流研讨会论文集[C];2010年
10 刘彩琴;阮晖;傅明亮;周兵;陈启和;何国庆;;α-半乳糖苷酶的液体发酵条件和酶学性质研究[A];饲用酶制剂开发与应用技术交流研讨会论文集[C];2010年
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5 隋建新;单增李斯特菌鸡卵黄抗体的抑菌性能及其机理研究[D];中国海洋大学;2010年
6 李彧娜;微孢根霉华根霉变种CICIM F0088生淀粉酶系的研究[D];江南大学;2010年
7 郭金玲;酵母全细胞不对称还原法合成光学纯α-羟基酸及其脱氢酶特性的研究[D];江南大学;2010年
8 徐军;富苯丙氨酸碱性短肽的发现及其对蛋白质等电点和免疫交叉反应的影响[D];华南理工大学;2010年
9 黄曼;电子束辐照在线杀虫/菌效果及对小麦品质影响的研究[D];华南理工大学;2010年
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1 李浩丽;Bacillus pumilus CN8菌株高效降解猪血Hb酶的分离纯化与降解机制探讨[D];华中农业大学;2010年
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3 荣保华;藕带多酚氧化酶性质及藕带保鲜初步研究[D];华中农业大学;2010年
4 侯玮玮;纳他霉素产生菌的发酵工艺优化[D];华中农业大学;2010年
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7 杜学敏;蚯蚓纤溶酶的分离纯化及部分组分的性质[D];河北大学;2007年
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9 洪伟;酪蛋白中血管紧张素转换酶(ACE)抑制肽的研究[D];安徽工程大学;2010年
10 季爱云;聚β-羟基丁酸酯高产菌株的选育及发酵和提取工艺研究[D];山东科技大学;2010年
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1 袁其朋,马润宇;黑曲霉产酶过程中变温操作的研究[J];北京化工大学学报(自然科学版);1999年02期
2 孙君社,李雪,董秀芹;纤维素酶高产菌株的选育及产酶条件的研究[J];北京林业大学学报;2002年02期
3 张明峰,王立明;大豆中抗营养因子的研究概况[J];大豆通报;1999年05期
4 胡薛英,蔡双双;肠道疾病:猪群生长速率和效益的大敌[J];动物医学进展;2000年03期
5 杨玉华,刘德海,李新杰,王松岭;复合酶在北京肉鸭日粮中的应用效果[J];饲料工业;2000年01期
6 李玲;世界饲料添加剂工业发展趋势[J];饲料工业;2000年04期
7 卿中全,于炎湖,吴谋成,齐德生,刘耘,陈慈麟,李新元,程烨,王友平;酶制剂处理“双低”菜籽粕饲喂生长肥育猪研究[J];饲料工业;2000年04期
8 汪莉,苏军,蒲德伦,龙翔;溢多酶与柠檬酸结合对断奶仔猪生产性能及猪舍粪臭的影响[J];饲料工业;2000年10期
9 曹亚彬,郭丽姝,王惠民;饲料用酸性蛋白酶研究[J];饲料工业;2000年10期
10 李永泉;羊毛织物减量加工新工艺研究[J];纺织学报;2001年02期
【二级引证文献】
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1 龚国利;陈松;王娜;刘丽丽;;埃博霉素B高产菌株的诱变育种及其发酵条件的优化[J];中国酿造;2012年12期
【二级参考文献】
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1 韩庆,罗玉双,夏维福,刘良国,王文彬;鱼粉和豆饼的比例对黄颡鱼生长的影响[J];水产科学;2002年01期
2 赵勋国;稳定的加酶液体洗涤剂[J];日用化学工业;1987年02期
3 黄忠,常德新,范黎辉;植酸酶在产蛋鸡饲粮中的应用价值[J];当代畜牧;1997年01期
4 王令玲;仇潜如;邹世平;刘寒文;吴福煌;;黄颡鱼生物学特点及其繁殖和饲养[J];淡水渔业;1989年06期
5 明根·朝格图,汪儆;非淀粉多糖及其对家禽的抗营养作用[J];动物营养学报;1996年02期
6 计成,周庆,田河山,岳才军,谢志浩,李建魁;断乳前后乳猪消化道(胰、小肠内容物)几种消化酶活性变化的研究[J];动物营养学报;1997年03期
7 刘强,冯学琴;非淀粉多糖酶制剂的研究与应用进展[J];动物营养学报;1999年02期
8 高大威;;酶制剂在饲料中的应用[J];饲料工业;1992年01期
9 蒋宗勇;;饲用酶制剂的生产及在动物饲养中的应用[J];饲料工业;1992年09期
10 田允波,葛长荣,韩剑众,陈小波,李琦华;绿色饲料添加剂的研制与开发[J];饲料工业;1999年04期
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5 梁新红;孙俊良;唐玉;郭祖峰;;黑曲霉糖化酶分离纯化与酶学性质研究[J];河南科技学院学报(自然科学版);2011年04期
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1 曹治云;王水顺;谢必峰;施巧琴;吴松刚;;黑曲霉酸性蛋白酶的分离纯化和N端序列[A];2004年全国生物技术学术研讨会论文集[C];2004年
2 汤燕花;牛海涛;谢必峰;;黑曲霉Aspergillus niger SL2-111木聚糖酶的分离纯化及其性质[A];华东六省一市生物化学与分子生物学学会2006年学术交流会论文集[C];2006年
3 尹姣;瞿国胜;李洋;王行国;;Klebsiella sp.601细菌漆酶基因的克隆表达、蛋白纯化与酶学性质研究[A];湖北省暨武汉市生物化学与分子生物学学会第八届第十七次学术年会论文汇编[C];2007年
4 袁多多;刘丽;郭占云;戚正武;;新型I3-超家族芋螺毒素的分离纯化及基因克隆[A];第八届中国生物毒素学术研讨会论文摘要集[C];2007年
5 袁多多;刘丽;郭占云;戚正武;;新型I3-超家族芋螺毒素的分离纯化及基因克隆[A];第八届中国生物毒素学术研讨会论文摘要[C];2007年
6 汪伦记;董英;邹风;郭凯;;马克斯克鲁维酵母胞外菊粉酶的分离及酶活性研究[A];华东六省一市生物化学与分子生物学会2008年学术交流会论文摘要汇编[C];2008年
7 曹治云;谢必峰;施巧琴;吴松刚;;黑曲霉酸性蛋白酶的化学修饰[A];2004年全国生物技术学术研讨会论文集[C];2004年
8 郭金学;李宇国;吴胜伟;李文新;;多壁碳纳米管γ辐照后的化学修饰[A];第6届辐射研究与辐射工艺学术年会论文集[C];2004年
9 冯优;滕莉;王凤山;;超氧化物歧化酶的研究进展[A];山东省药学会第一届学术年会论文集(下)[C];2005年
10 靳玉广;李志礼;余皓;王红鹃;彭峰;;磺酸化单壁碳纳米管作为固体酸催化剂的研究[A];第十三届全国催化学术会议论文集[C];2006年
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2 刘越西 徐仁元 记者 金姝;世界首例赖氨酸转基因克隆奶牛在吉大农学部培育成功[N];吉林日报;2011年
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4 记者 施慧;帝斯曼公布黑曲霉基因组DNA序列[N];中国化工报;2007年
5 许沈华;什么是基因克隆[N];家庭医生报;2007年
6 王婷婷;我国完成世界首例转基因克隆兔实验[N];科技日报;2007年
7 曹斌;血癌新病毒基因克隆成功[N];团结报;2000年
8 王有佳;全球首例转基因克隆兔在沪诞生[N];人民日报;2007年
9 李建平;首例荧光转基因克隆猪所产猪崽再次被确认具有荧光特征[N];大众科技报;2008年
10 马浩剑李昕;王柯:五年做到国内第一[N];常州日报;2007年
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1 郑腾;黑曲霉产酶特性研究及其酶制剂在猪饲料中的应用[D];南京农业大学;2006年
2 马春玲;海洋酵母普鲁兰类酵母碱性蛋白酶发酵生产、特性研究及基因克隆[D];中国海洋大学;2007年
3 段冷昕;梅花鹿茸多肽的化学结构及其抗肝纤维化作用[D];吉林大学;2007年
4 王元凤;茶多糖的分离纯化、结构及构效关系研究[D];江南大学;2005年
5 赵林果;β-葡萄糖苷酶的制备与回收利用及其基因的克隆表达[D];南京林业大学;2007年
6 陆志科;竹叶生物活性成分提取分离及其抗菌活性研究[D];中南林学院;2004年
7 徐金瑞;黑大豆种皮花色苷抗动脉粥样硬化及其抗氧化机制研究[D];西北农林科技大学;2006年
8 韩俊友;牛蛙皮肤抗菌肽分离纯化、基因克隆表达及生物学特性的研究[D];吉林大学;2007年
9 李静;海洋酵母菌Metschnikowia reukaufii W6b酸性蛋白酶的生产、基因克隆和表达的研究[D];中国海洋大学;2008年
10 陈杰;高密度培养盘基网柄菌及重组可溶性人Fas配体表达的研究[D];浙江大学;2008年
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1 曹治云;黑曲霉产酸性蛋白酶催化机制和稳定剂研究[D];福建师范大学;2005年
2 朱劼;酸性β-甘露聚糖酶产生、纯化及特性的研究[D];江南大学;2005年
3 龙元;重组耐热植酸酶的分离纯化及其酶学性质研究[D];同济大学;2007年
4 王琪;芋螺毒素的纯化、基因克隆及进化分析[D];中国科学院研究生院(上海生命科学研究院);2005年
5 吴吟妮;扩展青霉FS1884碱性脂肪酶的表征研究及其晶体的培养[D];福建师范大学;2005年
6 薛仁风;伯氏嗜线虫致病杆菌蛋白酶抑制因子基因的克隆、表达及生物活性的研究[D];中国农业科学院;2009年
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8 吕鸿周;玉竹凝集素(polygonatum odoratum(Mill.)Druce lectin,POL)的纯化、性质和构象研究[D];四川大学;2006年
9 王亚红;银杏果仁中一种抗菌蛋白的分离纯化及基因克隆[D];西北农林科技大学;2007年
10 杨寿运;嗜线虫沙雷氏菌金属蛋白酶的分离纯化、理化活性研究与基因克隆[D];南京农业大学;2008年
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