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《南京农业大学》 2007年
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兔产气荚膜梭菌病、大肠杆菌病病原的分离鉴定及其二联油乳剂灭活疫苗的研制

周永银  
【摘要】: 兔产气荚膜梭菌、大肠杆菌是引起幼兔细菌性腹泻的最主要的两种病原菌,由它们引起的幼兔腹泻发病率和死亡率均较高,给兔业养殖户带来重大经济损失。为了更好地控制疾病,我们从不同兔场具有典型症状的患病兔病料中分离出了兔产气荚膜梭菌和大肠杆菌,并进行鉴定,筛选免疫原性较优的菌株作为菌种制作二联油乳剂苗对兔的这两种传染病进行预防,取得了良好效果。研究内容如下: 兔产气荚膜梭菌病病原的分离鉴定对20份可疑病兔病料进行病原菌分离鉴定,共分离到17株有荚膜、有芽孢的革兰氏阳性粗大杆菌,分离菌株在绵羊全血琼脂平板上培养后形成双溶血圈。动物回归试验证实,分离菌可致兔发病死亡,并从试验致死兔病料中分离到了与自然病例相一致的细菌,结合临床症状、病理变化、生化试验和血清学试验结果等,判定其为兔A型产气荚膜梭菌。 兔大肠杆菌病病原的分离鉴定从6个兔场送检的发病兔病料中分离到27株革兰氏阴性球杆菌,菌落在麦康凯琼脂平皿上成红色,生化试验结果均符合大肠杆菌特征,结合病理变化,确定病原菌为大肠杆菌,分离菌对青霉素、氨苄青霉素耐受,对其它药物敏感程度存在较大差异。经致病性试验筛选出21株致病性菌株,经血清型鉴定,21株大肠杆菌分属O_(26)(4.7%),O_(18)(19.1%),O_(103)(28.5%),O_(109)(33.3%),O_(85)(4.7%),O_(142)(4.7%)几个血清型。在这6个血清型中,O_(103),O_(109),O_(18)占定型菌株的80.9%。 兔产气荚膜梭菌病型、大肠杆菌病二联油乳剂灭活疫苗的研制用上述鉴定过的兔产气荚膜梭菌和大肠杆菌作为制苗菌种接种适宜培养基进行大量增殖,采用膜过滤的方法进行浓缩,经甲醛灭活,按一定比例加入佐剂,制成兔产气荚膜梭菌及大肠杆菌病多价二联油乳剂灭活苗。多项实验室试验研究证明,该二联苗稳定性好,使用安全。实验动物免疫后21天攻毒,对产气荚膜梭菌病的保护率为91.6%对大肠杆菌保护率为83.3%。如东某兔场200多只仔兔免疫接种该二联苗后,6个月来未发现一例可疑病例,有效预防和抑制了兔产气荚膜梭菌和大肠杆菌病的发生和流行,效果可靠,可进一步推广应用。
【学位授予单位】:南京农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:S858.291;S852.5

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