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植物血凝素的药效学研究及安全性评价

许巧丽  
【摘要】: 1植物血凝素的安全性评价 植物血凝素(PHA)是从红芸豆中提取的植物糖蛋白,即一种低聚糖与蛋白质的复合物,是一种新型的广谱抗病毒药,并能增强机体的免疫能力。本研究对植物血凝素进行了安全性毒理学评价。结果表明,小鼠腹腔注射植物血凝素的半数致死量LD_(50)为1065mg/kg·bw,属于低毒,轻度蓄积毒性;30天亚慢性实验结果显示,各剂量组脾脏系数明显增加(p<0.01)。100mg/kg·bw剂量组的肝脏系数与对照组比差异极显著(p<0.01);50mg/kg·bw剂量组的肝脏系数与对照组比差异显著(p>0.05),中低剂量组(50mg/kg·bw和10mg/kg·bw)ALP活性明显降低(p<0.01),分别降低了21%和27%。最大无作用剂量为10mg/kg·bw;小鼠精子畸形实验和骨髓细胞微核实验均为阴性;植物血凝素Ames试验结果表明:在0.5~5000μg/皿范围内,植物血凝素(PHA)对鼠伤寒沙门氏菌TA97、TA98、TA100、TA102四株试验菌株,在加与不加S-9时,均未见有致基因突变作用,亦无剂量-反应关系。说明植物血凝素无致突变和遗传毒性。植物血凝素安全性毒理评价初步认为其是安全可靠的。 2植物血凝素对鸡新城疫疫苗免疫和重组禽流感灭活疫苗(H_5N_1,Re-1株)效果的影响 本试验对免疫增强剂植物血凝素对雏鸡新城疫疫苗免疫效果的影响进行了研究。1日龄依莎雄性雏鸡200只随机分成4组,分别为A、B、C、D(生理盐水组),分别于7d、21d用接种Ⅳ系LaSota弱毒疫苗,免疫后按照2mg/kg·bw、1mg/kg·bw、0.5mg/kg·bw一次肌肉注射植物血凝素。各鸡群于免疫后1w、2w、3w、4w、5w、7w、9w测定血液中新城疫特异性抗体水平。结果表明,经两次免疫后,1mg/kg·bw剂量组免疫器官指数均高于对照组,但无显著差异;鸡血清抗体滴度效价最高达9.6log2,比对照组高出1.4个滴度(p<0.05)。由此证明PHA能显著增强鸡对LaSota活疫苗的免疫反应,可以作为高效免疫增强剂。 200只雏鸡随机分成4组,2周龄时用重组禽流感灭活疫苗(H_5N_1,Re-1株)免疫,1~3组于免疫同时肌肉注射植物血凝素剂量分别为2mg/kg·bw、1mg/kg·bw、0.5mg/kg·bw,第4组为溶剂对照组。各组鸡群于免疫后1w、2w,各组剖杀5只鸡,计算免疫器官指数,并于免疫后1w~8w,9w,11w采血测定AI疫苗的HI效价。结果表明,各剂量组的胸腺指数低于对照组,但差异不显著(p>0.05);1mg/kg·bw组和2mg/kg·bw组法氏囊指数显著升高(p<0.05)。0.5mg/kg·bw组和1mg/kg·bw组的脾脏指数均显著升高(p<0.05)。1mg/kg·bw剂量组从免疫后第2周开始到第7周抗体滴度均显著高于对照组(p<0.05),且第4周和第5周最高达到7.9log_2,比对照组高出1.6个滴度(p<0.01)。0.5mg/kg·bw剂量组第5周和第6周高于对照组(p<0.05)。2mg/kg·bw组与对照组差异不显著(p>0.05)结论:1mg/kg·bw增强AI疫苗免疫效果较好。 3植物血凝素对人工感染鸡新城疫的防治效果研究 随机挑选160只35日龄雏鸡分成4组,即高、中、低剂量组和溶剂对照组。分别以2mg/kg·bw、1mg/kg·bw、0.5mg/kg·bw和溶剂0.4mL肌肉注射,连续3天。注射后三天人工感染鸡新城疫病毒,观察植物血凝素对鸡ND的预防效果。结果表明植物血凝素能够很好的减少鸡新城疫病的发病率,且存活率明显增加。人工感染NDV,待出现临床症状时,肌肉注射植物血凝素2mg/kg·bw、1mg/kg·bw、0.5mg/kg·bw和生理盐水0.4mL进行治疗,观察14天,结果用药组治愈率均升高。


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