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《南京农业大学》 2007年
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蛋白核小球藻(Chlorella pyrenoidosa)多糖的制备和In vitro抗肿瘤活性研究

盛建春  
【摘要】: 论文优化了超声波辅助提取蛋白核小球藻(Chlorella pyrenoidosa)多糖的工艺,采用膜分离技术对多糖进行初步分离,根据带电性质和分子量采用DEAE C-52和Sephadex G-100纯化出不同的多糖组分,研究了两个多糖组分CPPSⅠa和CPPSⅡa的结构及其In vitro抗肿瘤活性。主要研究结果如下: 1.本研究确定的多糖最佳提取条件为:温度68℃,时间55 min,超声波功率200W,料液比1:20,提取次数2次,多糖的得率为3.52%,纯度为44.44%。在相同条件下,不运用超声波,多糖的得率为1.92%,运用超声波技术使多糖得率增加近1倍。 2.三氯乙酸结合微滤(0.1μm)技术可以使蛋白清除率达到83.30%,显著高于相同条件下用三氯乙酸的51.64%。通过对超滤膜孔径的筛选,确定截留分子量分别为30kDa和1 kDa的膜。优化超滤过程中的最佳工艺参数,分别为操作压力为11 psi,温度40℃,时间1.5 h。DEAE C-52和Sephadex G-100纯化得到2个单一多糖组分CPPSⅠa,CPPSⅡa。 3.红外光谱解析表明CPPSⅠa,CPPSⅡa呈现出多糖的特征吸收峰,均为吡喃糖且以β-构型为主。HPLC法测定了CPPSⅠa,CPPSⅡa的峰值分子量(Mp)分别为69658 Da,109408 Da。气相色谱法分析表明CPPSⅠa,CPPSⅡa均由D-鼠李糖、D-甘露糖、D-葡萄糖、D-半乳糖组成,摩尔比分别为:2.21:1:2.13:5.48和3.27:1.20:1:2.11。另外在CPPSⅠa,CPPSⅡa中均含有一种未知多糖,相对百分含量分别为10.45%和26.71%。CPPSⅠa,CPPSⅡa对人肺癌细胞A549的In vitro生长抑制作用呈剂量依赖关系,在1 mg/mL时,抑制率分别为68.70%和49.50%。
【学位授予单位】:南京农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:R94;R73-36

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【参考文献】
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