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《南京农业大学》 2007年
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类胡萝卜素体外模拟吸收研究

杨文平  
【摘要】: 本文旨在进一步探索类胡萝卜素的吸收机理。首先建立了稳定的较纯的牛和鸡肠上皮细胞体外原代培养模型,并在此基础上模拟牛和鸡肠道内环境,系统研究了两种肠上皮细胞对类胡萝卜素的两种典型代表全反式β-胡萝卜素和黄体素的吸收特点。 牛和鸡小肠上皮细胞体外原代培养体系的建立联合使用胰蛋白酶和EDT∧作为消化酶液能分离出健全的肠绒毛隐窝单位,经碱性磷酸酶染色鉴定培养至第11-14d的牛和鸡肠上皮细胞为分化完全、功能健全的成熟肠上皮细胞。本试验为肠上皮细胞的体外原代培养提供了可行的方法,所获得的肠上皮细胞完全可供相关研究之用。 时间和浓度对类胡萝卜素吸收的影响牛和鸡肠上皮细胞对β-胡萝卜素和黄体素的吸收具有时间依赖性、饱和性。低浓度下(≤2.5uM),两种细胞对两种类胡萝卜素的吸收量与浓度呈直线相关,高浓度下(3-27uM),吸收量与浓度呈曲线相关;当浓度≥18uM时,吸收达到最大值。 牛和鸡肠上皮细胞对类胡萝卜素的选择性吸收牛和鸡肠上皮细胞对β-胡萝卜素和黄体素的吸收表现出一定的选择性。鸡肠上皮细胞对β-胡萝卜素和黄体素的吸收均极显著高于牛肠上皮细胞(p<0.01);牛和鸡肠上皮细胞均优先累积β-胡萝卜素,当浓度为1uM、1.6uM和2.2uM时,两种肠上皮细胞对β-胡萝卜素的吸收量均极显著高于黄体素(p<0.01);同一浓度下(0.5~27uM),两种细胞对β-胡萝卜素吸收量是黄体素的1.3~2倍;在吸收量与浓度呈直线相关的范围内,培养16h,牛肠上皮细胞对β-胡萝卜素的吸收率为10.1±1.8%,而对黄体素的吸收率为7.1±0.5%,鸡肠上皮细胞对β-胡萝卜素的吸收率为12.2±1.1%,而对黄体素的吸收率为8.9±0.6%。 类胡萝卜素在吸收过程中的相互影响细胞外相对高浓度的βC(或LUT)对细胞LUT(或βC)的吸收并未产生不利影响,随着细胞外βC(或LUT)浓度的升高,牛和鸡肠上皮细胞对LUT(或βC)的吸收量逐渐增大,当浓度为24uM时,细胞对LUT(或βC)的吸收量均极显著高于对照组(p<0.01)。细胞内高浓度的βC(或LUT)对牛和鸡肠上皮LUT(或βC)的吸收并未产生显著影响(p>0.05)。
【学位授予单位】:南京农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:S852.2

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