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海南省番木瓜根结线虫病病原的鉴定及其检测方法的研究

胡永坚  
【摘要】: 根结线虫(Meloidogyne spp.)为植物根系内寄生物,可对农作物造成严重的危害。在中国目前已报道的根结线虫有效种为39种,而西班牙根结线虫(Meloidogyne hispanica Hirschmann,1986)近期已于海南省被首次发现。为了评估该线虫的潜在经济危害性,以及提供控制其传播扩散的有效实用手段,对源自海南省的西班牙根结线虫群体的同工酶、寄主范围、mtDNA及rDNA位点的特征和IGS2-RFLP检测方法进行了研究。 对2个代表性西班牙根结线虫群体在7种常见经济作物11个品种上的繁殖力进行了测试。结果显示番茄为西班牙根结线虫的高度适宜寄主,西瓜、大豆为低度适宜寄主,辣椒、花生、棉花为非寄主。寄主范围的测试结果表明西班牙根结线虫是一种具有潜在危害性的农作物病原物。 对西班牙根结线虫与其它常见根结线虫在mtDNA和rDNA位点的核酸序列的异同进行了比较分析。西班牙根结线虫的mtDNA的COII-lrRNA基因间隔区的扩增产物约1.8 kb,与南方根结线虫(M.incognita)和爪哇根结线虫(M.javanica)的扩增产物大小相同;西班牙根结线虫的rDNA的ITS区和IGS2区的扩增产物分别约760和710bp,与4个常见种的扩增产物大小相似。rDNA-ITS序列比较分析揭示,西班牙根结线虫与南方、爪哇、花生和北方根结线虫的ITS序列的同源性分别为99.69%,99.38%,99.85%和82.03%。rDNA-IGS2序列比较分析显示,西班牙根结线虫与南方、爪哇、花生和北方根结线虫的IGS2序列同源性分别为93.31%,93.75%,94.32%和57.01%。 研制了西班牙根结线虫的快速分子检测方法。该方法利用选择限制性内切酶TaqI对IGS2区的PCR扩增产物进行酶切,获得了西班牙根结线虫的554bp的特异性条带。通过对4种常见根结线虫单条线虫的测试,验证了其可靠性。本方法具有快速、灵敏的特点,可用于西班牙根结线虫单条线虫的直接鉴定。


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