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《南通大学》 2010年
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榄香烯乳对人肺腺癌A549细胞株体外放射增敏作用的实验研究

周兴芹  
【摘要】:目的探讨榄香烯乳对人肺腺癌A549细胞株体外放射增敏作用及其相关机制,为肺癌的放射增敏治疗提供新的思路和方法。 方法(1)体外培养人肺腺癌A549细胞株,定期换液及传代,保持细胞生长良好。(2)四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT法)测定不同浓度榄香烯乳在不同作用时间下对A549细胞株的生长抑制作用。利用IC软件LOGIT法计算出榄香烯乳作用24h后,10%的细胞抑制浓度(IC10)。为避免药物自身毒性影响,实验采用24h的接近IC10的浓度研究放射增敏效应。(3)将各组细胞(空白对照组和加药联合照射组)置于不同照射剂量0Gy、2Gy、4Gy、6Gy、8Gy、10Gy X射线下照射,常规培养14d天后通过集落形成法观察榄香烯乳对A549细胞株的放射增敏作用,利用单击多靶数学模型拟合放射剂量-细胞存活曲线,并计算平均致死量(D_0)、准阈剂量(Dq)等相关参数。(4)流式细胞术检测榄香烯乳作用24h后A549细胞株的周期及凋亡变化。(5)免疫细胞化学染色观察榄香烯乳作用24h后A549细胞的Bcl-2、Bax、Survivin及VEGF蛋白的表达变化。(6)数据采用SPSS 17.0统计软件包进行分析,采用单因素方差分析。 结果(1)榄香烯乳对人肺腺癌A549细胞株增殖具有抑制作用。随作用浓度的增加,细胞的增殖抑制率升高,随作用时间的延长,细胞的增殖抑制率亦升高,即抑制率呈时间和剂量依赖性。IC软件LOGIT法计算出榄香烯乳作用24h后,IC10为43.49μg/ml。(2)榄香烯乳联合照射组细胞生存曲线左移,D_0减低,Dq变小,细胞的放射敏感性提高。(3)流式细胞术分析显示:榄香烯乳可以影响A549细胞株的周期分布,作用24h后,G_2/M期比例明显升高而抗拒射线的S期细胞比例显著下降,凋亡率增加。(4)榄香烯乳作用于肺腺癌A549细胞株24h后,促进细胞凋亡的Bax蛋白表达增加,细胞质着色增强;抑制细胞凋亡的Bcl-2蛋白表达下降,细胞质着色减弱;增殖蛋白Survivin和VEGF的表达下降,且具有浓度相关性。 结论(1)榄香烯乳对人肺腺癌A549细胞株有明显的抑制作用,呈浓度依赖性和时间依赖性。(2)低浓度的榄香烯乳即具有一定的放射增敏作用。(3)榄香烯乳的增敏机制可能与榄香烯乳引起细胞G_2/M期阻滞及上调凋亡相关蛋白表达,诱导凋亡有关。
【学位授予单位】:南通大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:R734.2

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【参考文献】
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