收藏本站
《南通大学》 2010年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

卡氏肺孢子菌p55基因片段DNA疫苗免疫保护作用的研究

易亮衡  
【摘要】:目的构建卡氏肺孢子菌真核表达质粒pcDNA3.1(+)-582,并在真核细胞表达系统中进行表达。用构建的质粒免疫小鼠后检测其体液免疫及细胞免疫反应。用该质粒免疫SD大鼠,观察其抗肺孢子菌肺炎的免疫保护作用。 方法利用PCR技术从提取的卡氏肺孢子菌基因组DNA中扩增出p55基因片段,将其连接至pGEM-T载体进行筛选和鉴定,通过酶切和连接,将此片段连接至真核表达载体pcDNA3.1(+)上,构建真核表达质粒pcDNA3.1(+)-582;经鉴定序列正确后将此表达质粒瞬时转染COS-7细胞,分别通过RT-PCR及Western-blotting鉴定其RNA及蛋白表达。将此质粒免疫BALB/c小鼠后,检测抗体滴度,用MTT法测定脾淋巴细胞增殖活性;同时以此质粒免疫SD大鼠,用Real-time PCR法检测该疫苗的免疫保护效果。 结果经酶切鉴定、PCR和测序分析结果表明,真核表达质粒pcDNA3.1(+)-582构建成功,此质粒免疫小鼠后能诱导产生特异性抗体,小鼠的T淋巴细胞增殖活性增强。免疫大鼠后DNA疫苗组大鼠肺组织菌体含量与空质粒组相比有明显降低(P0.05)。 结论成功构建了卡氏肺孢子菌DNA疫苗,此疫苗能诱导BALB/c小鼠产生一定的细胞免疫和体液免疫,对大鼠肺孢子菌感染具有一定的免疫保护效果。
【学位授予单位】:南通大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:R392.1

手机知网App
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 沈比先;爱滋病人卡氏肺囊虫肺炎的影像学诊断[J];临床放射学杂志;2000年05期
2 王永芬,席磊,黄炎坤;核酸疫苗研究新进展[J];郑州牧业工程高等专科学校学报;2004年02期
3 段义农;董永生;朱丹丹;王建新;陈金铃;秦永伟;;卡氏肺孢子虫MSG抗原基因片段真核表达质粒构建与表达[J];现代预防医学;2008年22期
4 陈志琳,D.Williams,N.Clark;白细胞介素12对卡氏肺孢子虫感染的保护性免疫研究[J];江苏临床医学杂志;1999年05期
5 安春丽,苏晓平,A.G.Harmsen;不同品系小鼠对卡氏肺孢子虫的易感性及其免疫反应的研究[J];中国寄生虫学与寄生虫病杂志;2002年04期
6 王建新;段义农;陈金铃;董永生;;卡氏肺孢子虫p55抗原基因片段原核表达质粒的构建与表达[J];中国寄生虫学与寄生虫病杂志;2007年04期
7 李学荣,余新炳;核酸疫苗及其免疫机制研究[J];中国人兽共患病杂志;2000年06期
8 苏晓平,安春丽,郭福生,王敏;我国卡氏肺孢子虫肺炎100例综合分析[J];中国人兽共患病杂志;2002年06期
9 段义农;王建新;陈金铃;;卡氏肺孢子虫P55抗原表位与蛋白特性的分析[J];中国人兽共患病学报;2006年11期
10 段义农;王建新;陈金铃;董永生;;大鼠源卡氏肺孢子菌p55抗原基因克隆和序列分析[J];中国人兽共患病学报;2007年07期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 石毅;;核酸疫苗的研究进展[J];安徽农业科学;2006年04期
2 王豪;孙晓红;;利用PCR技术快速检测水产品中副溶血性弧菌[J];安徽农业科学;2009年15期
3 康发亮;;蜱分类的方法及我国蜱分类的研究进展[J];安徽农业科学;2011年33期
4 马丽娜,夏佩莹;结核分枝杆菌疫苗研究进展[J];蚌埠医学院学报;2005年02期
5 何云;赵清霞;孙燕;李三景;;46例艾滋病死亡患者机会性感染分析[J];传染病信息;2008年06期
6 于凤凯;刘铁利;隋如新;;HIV阴性卡氏肺囊虫肺炎的影像学表现[J];大连医科大学学报;2008年04期
7 景志忠,才学鹏,陈娟;预防兽医学分子生物学技术发展概况[J];动物医学进展;2002年04期
8 吴红军;吴国娟;沈红;稻富秀夫;长泽弘;;栝楼根提取物抗肿瘤作用初探[J];动物医学进展;2006年06期
9 苏瑞芳;陈永辉;赵建青;;艾滋病合并卡氏肺囊虫肺炎16例CT表现[J];临床医学;2010年01期
10 鲁植艳;田志雄;徐霁;毕勇毅;;艾滋病患者卡氏肺孢子虫肺炎的影像学研究[J];公共卫生与预防医学;2006年05期
中国重要会议论文全文数据库 前2条
1 张海龙;田兆丰;董志;张晏如;张飞云;;多花黑麦草斑驳病毒外壳蛋白基因在大肠杆菌中的表达[A];2010植物免疫机制研究及其调控研讨会论文集[C];2010年
2 刘宜存;董联合;王建伟;;某中小型猪场猪瘟野毒感染的净化及评估[A];中国畜牧兽医学会养猪学分会第五次全国会员代表大会暨养猪业创新发展论坛论文集[C];2010年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 冯燕梅;卡氏肺孢子菌p55-v3DNA疫苗的构建及其对大鼠免疫保护作用的研究[D];重庆医科大学;2011年
2 华东;TLR4信号通路介导的前列腺癌侵袭转移的研究[D];苏州大学;2011年
3 师东方;猪轮状病毒和传染性胃肠炎病毒核酸免疫的研究[D];东北农业大学;2002年
4 王祥;猪乙型脑炎减毒活疫苗与基因免疫研究[D];华中农业大学;2001年
5 魏战勇;猪细小病毒体外增殖的抑制因素、VP2基因变异及核酸疫苗的研究[D];南京农业大学;2004年
6 李羽;永生化人胚胎肝细胞系的建立及肝细胞移植的实验研究[D];第四军医大学;2005年
7 林军;银杏叶提取物(EGb)对糖尿病大鼠学习记忆障碍保护作用的机制研究[D];广西医科大学;2005年
8 李福民;水痘—带状疱疹病毒糖蛋白E DNA疫苗的免疫原性研究[D];四川大学;2005年
9 李明;重组嵌合抗菌多肽的构建及其在抗感染和抗肿瘤免疫中的作用[D];四川大学;2005年
10 徐建国;甲型流感病毒DNA疫苗双表达载体的构建及免疫效果的研究[D];吉林大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 王若;口蹄疫病毒结构蛋白VP4基因的真核表达[D];河北农业大学;2010年
2 孟冬冬;发酵法生产1,3-丙二醇菌株的选育[D];山东轻工业学院;2011年
3 吴玉蓉;瑞香素联合母牛分支菌治疗卡氏肺孢子菌肺炎的实验研究[D];重庆医科大学;2011年
4 彭娟;猪胸膜肺炎放线杆菌的分离鉴定及其核酸疫苗的初步研究[D];四川农业大学;2011年
5 杨晓圆;鸭瘟病毒US4基因的原核表达及应用[D];四川农业大学;2011年
6 孙丰;蓝果忍冬(LONICERAL.SUBSECT.CAERULEAE)SRAP反应体系的建立及遗传多样性分析[D];东北农业大学;2011年
7 李婷;黑鲷MSTNⅡ基因分子特征[D];宁波大学;2009年
8 黄伟;大黄鱼肌肉组织cDNA文库的构建及EST序列分析[D];宁波大学;2009年
9 吴璋;曼氏无针乌贼微卫星位点筛选及群体多态性分析[D];宁波大学;2011年
10 胡怡杉;微量铜离子对SBR中除磷菌多样性影响的研究[D];天津大学;2012年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 黄韵红,黄慧强;非霍奇金氏淋巴瘤化疗后合并卡氏肺囊虫感染一例[J];癌症;1999年03期
2 王俊英,舒志荣;血小板减少性紫癜并卡氏肺囊虫肺炎1例[J];青岛医学院学报;1996年02期
3 宫玉香,张忠广,韩敏;人体卡氏肺孢子虫肺炎(附1例报告)[J];青岛医学院学报;1999年02期
4 袁有忠,杨学仪,丁美娟,孟沛霖;成人血液病并发卡氏肺囊虫肺炎4例报告[J];山西白血病;1994年04期
5 童守全,邱加闽;卡氏肺孢子虫肺炎1例报告[J];重庆医学;1997年02期
6 姜华;贺联印;;北京卡氏肺孢子虫感染1例报告[J];传染病信息;1994年01期
7 孙建宏,曹殿军;细胞的抗原表位研究方法[J];动物医学进展;2004年05期
8 吴忠舜,郑志仁;肺孢子虫肺炎一例病理报告[J];华西医科大学学报;1986年01期
9 刘先蓉 ;许国章 ;余廷龙 ;马行一 ;唐科仕;;肾移植术后并发卡氏肺孢子虫病(附1例报告)[J];华西医讯;1988年04期
10 罗盛鸿;21-三体综合征并卡氏肺囊虫肺炎1例[J];河南医药信息;1998年06期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 梁紫岩 ,王宏卫;丙型肝炎DNA疫苗的研究进展[J];国外医学.预防.诊断.治疗用生物制品分册;2002年06期
2 郭继华,樊明文,边专,贾荣,陈智,彭彬,范兵;靶向融合防龋DNA疫苗研究(Ⅱ)—编码人Ig基因的质粒pJIg的构建[J];口腔医学研究;2002年04期
3 孙怡;弓形虫疫苗研究进展[J];临沂医学专科学校学报;2005年05期
4 袁立新;DNA疫苗抗血吸虫感染具有显著免疫效果[J];中华医学信息导报;1997年20期
5 张彤,张光磊;免疫刺激DNA序列生物学功能及其在DNA疫苗中的作用[J];国外医学.预防.诊断.治疗用生物制品分册;1998年04期
6 田庚善,姜英;一种可能用于治疗的新疫苗─—DNA疫苗简介[J];中国医刊;1998年03期
7 方玲,姚玉成,景宏彪,谢庆东,赵书民,王忠华,余宏宇,胡以平;HBV表面抗原DNA疫苗对小鼠脏器影响的实验研究[J];癌变畸变突变;2000年04期
8 魏泉德,叶苓,徐劲,余新炳:;DNA疫苗在小鼠体内的组织分布及安全性研究[J];中国人兽共患病杂志;2001年05期
9 邱庆林;抗原靶向APC的嵌合DNA疫苗的研究进展[J];细胞与分子免疫学杂志;2002年01期
10 韩双艳,郭勇;DNA疫苗的研究进展[J];药物生物技术;2002年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 居巍;刘君炎;;结核杆菌HSP65佐剂DNA疫苗的实验研究[A];第6次全国微生物学与免疫学大会论文摘要汇编[C];2004年
2 姜秀云;何昭阳;;活体电穿孔法导入DNA:牛结核病免疫接种新技术[A];人畜共患传染病防治研究新成果汇编[C];2004年
3 靳彦文;钟辉;马清钧;;恶性疟原虫DNA疫苗的安全性研究[A];中国生物工程学会第三次全国会员代表大会暨学术讨论会论文摘要集[C];2001年
4 田洁;刘君炎;;ConA与结核杆菌HSP65DNA疫苗联合应用的研究[A];湖北省暨武汉市免疫学会第八届学术会议论文集[C];2003年
5 熊金虎;赵民;邱小萍;伍欣星;;人乳头瘤病毒嵌合型DNA疫苗的构建及其免疫效应研究[A];湖北省暨武汉市生物化学与分子生物学学会第七届第十四次学术年会论文摘要集[C];2003年
6 江云波;方六荣;肖少波;牛传双;张辉;陈焕春;;修饰的ORF5基因增强猪繁殖与呼吸综合征DNA疫苗的免疫反应[A];中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次研讨会论文集[C];2005年
7 吴长有;;DNA疫苗与免疫记忆[A];2005全国第二届核酸疫苗研讨会论文集[C];2005年
8 崔保安;魏战勇;杨明凡;张素梅;;DNA疫苗免疫佐剂的研究进展[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会成立20周年庆典暨第十次学术研讨会论文集(上)[C];2003年
9 杨慧兰;葛梦林;杨太成;刘荣卿;;单纯疱疹病毒gD2 DNA疫苗免疫动物诱导的细胞免疫应答[A];2003中国中西医结合皮肤性病学术会议论文汇编[C];2003年
10 张冉;易新元;曾宪芳;;日本血吸虫新基因克隆及DNA疫苗的构建和保护性研究[A];中国动物学会全国第九次寄生虫学学术讨论会论文摘要集[C];2003年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 蒋明 周汉桥;DNA疫苗研究取得突破[N];健康报;2005年
2 林明贵 金关甫;DNA疫苗 战胜结核的希望[N];健康报;2003年
3 ;防治早老性痴呆DNA疫苗问世[N];新华每日电讯;2004年
4 王济宪;西域试饮孢子酒[N];中国民族报;2001年
5 ;DNA疫苗“饿”杀小鼠肿瘤[N];医药经济报;2003年
6 陈勇;西尼罗病毒DNA疫苗开始临床试验[N];健康报;2005年
7 吴文治;孢子油违规宣传抗癌卖天价[N];北京商报;2007年
8 成都同源生物科技开发有限公司董事长 宋平根;桫椤绿化苗生产技术规程[N];中国花卉报;2010年
9 刘霞;敢将文明数字化[N];科技日报;2008年
10 田月;EP4号无孢子平菇高产栽培[N];中国特产报;2000年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 张洪英;口蹄疫多表位DNA疫苗的免疫原性和安全性研究[D];第二军医大学;2003年
2 张静;轮状病毒分子流行病学调查及脂质体DNA疫苗研究[D];重庆医科大学;2002年
3 王涛;嗜肺军团菌mip基因DNA疫苗初步研究[D];四川大学;2004年
4 宋立强;异种同源钙激活Cl~-通道DNA疫苗对小鼠哮喘模型的防治作用[D];第四军医大学;2004年
5 时阳;MAGE-1与IL-18共表达DNA疫苗的构建及体内外功能验证[D];吉林大学;2004年
6 郭瀛军;猪带绦虫囊虫病DNA疫苗的中试及免疫效力研究[D];第二军医大学;2004年
7 张梦寒;汉城病毒M片段和汉滩病毒部分S片段核酸疫苗pEGFP-M-S的构建及基因免疫研究[D];苏州大学;2005年
8 焦解歌;猪Endoglin DNA疫苗诱导抗肿瘤血管生成机理研究[D];中南大学;2005年
9 郭慧琛;O型口蹄疫病毒多基因DNA疫苗的研制[D];中国农业科学院;2004年
10 张含;口服DNA疫苗防治实验性脉络膜血管新生[D];中国医科大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 易亮衡;卡氏肺孢子菌p55基因片段DNA疫苗免疫保护作用的研究[D];南通大学;2010年
2 张恒;鸡贫血病毒DNA疫苗的研究[D];山东师范大学;2003年
3 曾政;布鲁氏菌新型疫苗的构建及其免疫原性研究[D];西北农林科技大学;2004年
4 杨帆;鸡传染性支气管炎病毒分离株IBV_(WHNJ)M基因DNA疫苗研究[D];四川农业大学;2004年
5 杨璇;癌胚抗原DNA疫苗的构建及佐剂对其免疫效应的影响[D];郑州大学;2002年
6 黄力;口蹄疫多表位DNA疫苗的免疫原性[D];河北医科大学;2004年
7 张强哲;H5亚型禽流感病毒HA DNA疫苗的研究[D];西北农林科技大学;2003年
8 蒋英;白细胞介素12对结核病DNA疫苗效应的增强作用[D];重庆医科大学;2003年
9 蒋文明;以减毒沙门氏菌为载体传递猪繁殖与呼吸综合征病毒DNA疫苗的口服免疫应答[D];南京农业大学;2004年
10 贾文影;新孢子虫PO基因的真核表达及DNA疫苗的初步研究[D];延边大学;2010年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026