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《南京医科大学》 2009年
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四溴二苯醚对人甲状腺细胞生存和功能的影响

蒋潇  
【摘要】:目的: (1)观察四溴二苯醚对于原代培养的人甲状腺细胞凋亡的影响。 (2)观察四溴二苯醚对于人甲状腺细胞功能的影响。 (3)探讨四溴二苯醚对于人甲状腺细胞产生影响的可能机制。 方法: (1)分别用浓度为10-12mol/L、10-10mol/L和10-8mol/L的PBDE-47处理原代培养的人甲状腺细胞24h,以噻唑兰(MTT)法检测细胞毒性作用。 (2)流式细胞术检测细胞凋亡。 (3)电发光法检测细胞上清液中甲状腺球蛋白(Tg)的浓度。 (4)半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测凋亡相关的Bax/Bcl-2基因,功能相关的Tg基因和双链复合蛋白8(Pax-8)基因的表达。 结果: (1) PBDE-47处理人原代甲状腺细胞24h,在10-10~10-8mol/L的浓度,呈剂量依赖性的抑制细胞增殖活性(与空白对照组相比,P0.05)。 (2) PBDE-47在10-10~10-8mol/L的浓度,呈剂量依赖性的诱导细胞凋亡(与空白对照组相比,P0.05)。 (3) PBDE-47浓度为10-12mol/L、10-10mol/L的两组Tg分泌量较空白对照组明显减少,且组间有显著性差异,而10-8mol/L PBDE-47组的Tg分泌量与对照组无显著性差异。 (4) PBDE-47在10-12~10-8mol/L的浓度,凋亡基因Bax的表达随PBDE-47浓度的增加而上调,凋亡抑制基因Bcl-2的表达量随之下降,各浓度组均有差异(P0.05)。 (5) PBDE-47在10-12~10-8mol/L的浓度,甲状腺功能相关Tg基因和Pax-8基因的表达量随PBDE-47浓度的增加而下降,各浓度组间有显著性差异(P0.05)。 结论: (1) PBDE-47对于离体培养的人原代甲状腺细胞有毒性作用,可导致细胞增殖活性降低和凋亡率增高。 (2) PBDE-47对甲状腺细胞的功能有抑制作用。 (3)而促凋亡基因Bax的表达增加,凋亡抑制基因Bcl-2表达下调可能是PBDE-47对甲状腺细胞毒性作用机制之一。 (4)甲状腺功能相关Tg基因和Pax-8基因的表达下调可能是PBDE-47抑制甲状腺功能的作用机制之一。
【学位授予单位】:南京医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2009
【分类号】:R965

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