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《南京医科大学》 2009年
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结肠癌中肠道干细胞标志Musashi-1的检测

朱敬华  
【摘要】:结肠癌中肠道干细胞标志Musashi-1的检测 背景:恶性肿瘤的发病机制至今未完全明了,存在多种假说,其中一种为“肿瘤干细胞学说”。该学说认为肿瘤起源于少数肿瘤干细胞(cancer stem cell ,CSC),这种细胞能不断增殖,一方面进行自我更新,另一方面产生出有限分裂和分化能力的肿瘤细胞,形成肿瘤。肿瘤干细胞对放化疗抗拒,是肿瘤复发和转移的根源。并认为肿瘤干细胞可能是正常干细胞累积突变的结果。近年来结肠癌的发病率逐渐上升,结肠肿瘤干细胞的标志目前仍未明确。Musashi-1通常被认为是正常肠道干/祖细胞的标记,有关Musashi-1在人恶性结肠肿瘤组织中的表达情况罕见报道。 目的:本实验通过检测结肠癌患者肿瘤组织和远端正常组织中Musashi-1mRNA和Musashi-1蛋白的表达情况,了解在肿瘤组织和远端正常组织中Musashi-1mRNA和Musashi-1蛋白表达有无差异。 方法:本实验分两部分: 1、分别提取25例结肠癌患者肿瘤组织和远端正常组织中Musashi-1mRNA,用RT-PCR方法及实时荧光定量RT-PCR方法检测Musashi-1mRNA在肿瘤组织和远端正常组织中表达情况。肿瘤组织相对于远端正常组织的Musashi-1mRNA的表达量用2-△△CT的方法计算。 2、结肠癌患者肿瘤组织和远端正常组织同时进行固定,制成病理切片用免疫组化方法检测Musashi-1蛋白在肿瘤组织和远端正常组织表达情况。提取8例结肠癌患者肿瘤组织和远端正常组织中Musashi-蛋白,Western-blotting方法检测Musashi-1蛋白在肿瘤组织和远端正常组织表达量的差异。 结果: 1、经RT-PCR方法检测Musashi-1mRNA在肿瘤组织和远端正常组织中均有表达。经实时荧光定量RT- PCR法检测,结肠癌组织中Musashi-1mRNA的表达与远端正常结肠组织相比有差异(P0.01),且是远端正常结肠组织的4.24倍(1.9.1-9.23)。低分化组织与高、中分化组织相比,Musashi-1mRNA的表达有差异(分别为P 0. 001、P0. 005)。低分化组织中Musashi-1的表达是高分化组织的5.54倍(3.07-9.98)。 2、免疫组化方法显示Musashi-1蛋白在肿瘤组织和远端正常组织中均有表达。在远端正常组织中Musashi-1蛋白主要表达在隐窝的底部及隐窝中、下1/3细胞的细胞浆及细胞核内,而在肿瘤组织内Musashi-1蛋白表达广泛,不仅在隐窝的底部及隐窝中、下1/3,隐窝的上部均有表达。Western-blotting方法显示Musashi-1蛋白在肿瘤组织和远端正常组织表达量有差异(P0.05)。Musashi-1蛋白在肿瘤组织的表达量高于远端正常组织。 结论: Musashi-1mRNA及Musashi-1蛋白在肿瘤组织和远端正常组织均有表达,且表达量有均差异。肿瘤组织表达Musashi-1mRNA及Musashi-1蛋白均高于远端正常组织。且在肿瘤组织中,低分化组织与高、中分化组织相比,Musashi-1mRNA的表达有差异,低分化组织Musashi-1mRNA表达高于高、中分化组织。正常肠干/祖细胞标志物Musashi-1在结肠癌组织中尤其是低分化组织中的高表达提示Musashi-1可能在结肠肿瘤的发生发展中起着一定的作用。
【学位授予单位】:南京医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2009
【分类号】:R735.3

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【参考文献】
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