水飞蓟宾对高糖诱导人足细胞中血管内皮生长因子和Ⅳ型胶原表达的影响
【摘要】：
目的:本实验以体外培养的永生化正常人足细胞株为研究对象,探讨水飞蓟宾对高糖诱导的足细胞中血管内皮生长因子(VEGF)和Ⅳ型胶原表达的影响。
方法:将体外培养的永生化人足细胞在33℃传代培养,37℃分化14天后,更换含1%胎牛血清、5.5mmol/L葡萄糖的培养液,使细胞同步化24小时后将细胞分组:1.高糖(HG,葡萄糖30mmol/L)分别刺激0小时组、24小时组、48小时组、72小时组;2.正常糖(NG,葡萄糖5.5mmol/L)组、甘露醇对照(MN,甘露醇24.5mmol/L +葡萄糖5.5mmol/L)组、高糖(HG,葡萄糖30mmol/L)组、HG+低浓度水飞蓟宾(HG+LS,水飞蓟宾5μg/ml)组、HG+中浓度水飞蓟宾(HG+MS,水飞蓟宾10μg/ml)组、HG+高浓度水飞蓟宾(HG+HS,水飞蓟宾20μg/ml)组、HG+二甲亚砜(HG+D,DMSO1mg/ml)组,均刺激48小时。RT-PCR半定量法及Western印迹法检测足细胞VEGF mRNA及蛋白表达水平,同时收集足细胞培养的上清液用ELISA法检测Ⅳ型胶原的表达水平。
结果:1.与高糖刺激0小时组比较,高糖诱导的VEGF和Ⅳ型胶原表达呈时间依赖性,随着高糖刺激时间的延长,VEGF和Ⅳ型胶原表达逐渐增多(P0.05或P0.01)。2.高糖刺激48h后,与NG组比较,足细胞VEGF基因、蛋白和Ⅳ型胶原表达均显著增加(P0.01);与HG组比较,加用5～20μg/ml水飞蓟宾均可抑制HG所诱导VEGF基因、蛋白和Ⅳ型胶原表达,并呈浓度依赖性(P0.05)。MN组与NG组比、HG+D组与HG组比,VEGF和Ⅳ型胶原表达变化均无显著差异(P0.05)。
结论:高糖可使足细胞表达VEGF和Ⅳ型胶原增加,而水飞蓟宾通过抑制高糖诱导的足细胞产生过多VEGF和Ⅳ型胶原,可能具有潜在保护足细胞和防治糖尿病肾病的作用。
【关键词】：水飞蓟宾 高糖 足细胞 血管内皮生长因子 Ⅳ型胶原 【学位授予单位】：南京医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2010
【分类号】：R587.2
【目录】：
- 一、缩略词4-6
- 二、中文摘要6-8
- 三、英文摘要8-10
- 四、正文10-37
- （一） 前言10-12
- （二） 材料与方法12-26
- （三） 结果26-31
- （四） 讨论31-36
- （五） 小结36-37
- 五、参考文献37-42
- 六、文献综述42-53
- 参考文献49-53
- 七、攻读学位期间发表文章情况53-62
- 八、致谢62
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