收藏本站
《南京医科大学》 2010年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

软骨细胞和骨髓间充质干细胞混合培养构建组织工程软骨的实验研究

陈刚  
【摘要】: 目的: 探讨软骨细胞和骨髓间充质干细胞(BMSCs)混合培养对构建组织工程软骨的影响,并确定两者的最佳比例。 方法: 取一月龄新西兰兔六只,雌雄不限。体外分离培养扩增兔关节软骨细胞和BMSCs。收获第一代末的软骨细胞和BMSCs,按不同比例(软骨细胞/BMSCs:4/1,2/1,1/1,1/2,1/4,单纯软骨细胞)混合培养一代。以4×107/ml的细胞终浓度接种40μl于聚乳酸聚羟基乙酸聚合物支架( PLGA:4mm×4mm×2mm)上静态培养2天,移入周期性压力场下培养(压力:0~200kPa ,频率:0.1 Hz,时间:8h/d)三周。三周后观察各组组织工程软骨的大小﹑形态﹑质地﹑光泽和组织弹性;HE染色法观察组织工程软骨细胞增殖及分布;甲苯胺蓝染色法观察氨基糖胺聚糖(GAG)的分泌及分布状况,并用1,9二甲基亚甲蓝法定量检测GAG的含量;采用Ⅱ型胶原免疫组织化学法观察Ⅱ型胶原的分泌及分布,并用image-proplus6.0图象分析系统对Ⅱ型胶原染色面积行半定量分析;比色法测定组织工程软骨的DNA含量观察组织工程软骨的细胞增殖情况。 结果: 软骨细胞和BMSCs混合培养组与单纯软骨细胞组相比,体积较大,表面光滑,有弹性,有光泽。组织学显示混合培养组结构致密,细胞外基质分布更均匀,其中2/1组可见软骨陷窝。混合培养组的Ⅱ型胶原染色面积、GAG含量、DNA含量高于单纯软骨细胞组,其中2/1组含量最高,差异有统计学意义(P0.05)。 结论: 软骨细胞和BMSCs混合培养能显著提高组织工程软骨的质量,其中软骨细胞和BMSCs的浓度比为2/1时效果最好。
【学位授予单位】:南京医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:R329

免费申请
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前6条
1 吕晓杰;周广东;李宏;曹珲;刘霞;刘凯;崔磊;刘伟;曹谊林;;灌流-液压式反应器体外构建组织工程化软骨[J];上海交通大学学报(医学版);2006年09期
2 杨志明,解慧琪,李胜富,孙爱民,王跃,钟亚玲,杨振琳;应用无支架离心管培养技术构建组织工程化关节软骨[J];中华骨科杂志;2000年09期
3 李旭升,胡蕴玉,范宏斌,吕荣,白建萍,王军;组织工程骨软骨复合物的构建与形态学观察[J];中华实验外科杂志;2005年03期
4 范卫民;蔡俊;;周期性压力对组织工程软骨的影响及其作用机制[J];中华实验外科杂志;2006年08期
5 张广程;范卫民;马益民;岳海涛;刘瑞平;;不同频率周期性压力对组织工程软骨的影响[J];中华实验外科杂志;2007年06期
6 吕昌伟,胡蕴玉,崔玉明,白健萍,廉凯;应力环境下三维诱导组织工程种植细胞修复关节软骨缺损[J];中国矫形外科杂志;2004年Z1期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 怀南;股骨颈骨折经皮内固定探讨[J];安徽中医临床杂志;2000年01期
2 盛永华,王应堂;朱氏洗方防治创伤后关节僵硬300例报告[J];安徽中医临床杂志;2000年03期
3 汪光晔,徐斌;改进三点压垫法治疗肱骨髁上骨折预防肘内翻的临床研究[J];安徽中医临床杂志;2003年02期
4 丁小新;;手法治疗移位跟骨关节内骨折30例[J];中医药临床杂志;2007年06期
5 陈多军;;闭合复位克氏针髓内固定联合夹板外固定治疗掌骨干骨折13例[J];中医药临床杂志;2010年02期
6 胡继功;洪登北;;小承气汤合四物汤治疗胸腰段脊柱骨折后腹胀便秘31例报告[J];中医药临床杂志;2010年07期
7 李宝;王准;孙鲁;王明喜;;髓内固定系统治疗股骨粗隆间骨折进展[J];中医药临床杂志;2011年02期
8 王勇;;中药熏洗配合推拿治疗股骨髁上骨折内固定术后关节功能障碍临床观察[J];中医药临床杂志;2011年04期
9 杨成华;徐禄基;赵立勇;洪登北;;空心钉固定结合中药治疗新鲜股骨颈骨折58例[J];中医药临床杂志;2011年04期
10 夏宝玉;冯后祥;张双宝;吴锁印;徐为迅;宗金权;;手术治疗跟骨关节内骨折51例体会[J];中医药临床杂志;2011年06期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 王志相;段裕庭;杨凤云;涂宏;邓许勇;;锁定钢板治疗肱骨外科颈42例分析[A];江西省中医药学会2011年学术年会论文集[C];2011年
2 李振宝;郭汝松;田强;林应强;;定点按压正骨手法治疗急性踝关节扭伤的60例临床观察[A];第十二次全国推拿学术年会暨推拿手法调治亚健康临床应用及研究进展学习班论文集[C];2011年
3 吴志忠;孙瑞花;;闭合复位外固定微创治疗前臂尺桡骨双骨折160例体会[A];甘肃省中医药学会第五次会员代表大会、甘肃省针灸学会第三次会员代表大会暨学术研讨会论文汇编[C];2006年
4 张亚维;王亚伟;;老年病人腰椎间盘突出症的手术治疗[A];甘肃省中医药学会2010年会员代表大会暨学术年会论文汇编[C];2010年
5 苏建华;翟睿;孙琪;朱巧雪;;折顶回旋法闭合复位,配合外敷中药、小夹板固定治疗科雷氏骨折[A];甘肃省中医药学会2010年会员代表大会暨学术年会论文汇编[C];2010年
6 阿尖措;张建宁;李占银;;锁定型接骨板治疗肱骨近端骨折疗效观察[A];第六届西部骨科论坛暨贵州省骨科年会论文汇编[C];2010年
7 吴术红;刘毅;张天宏;;应用锁骨钩钢板治疗肩锁关节脱位及锁骨外端骨折[A];2007年贵州省医学会骨科学分会学术年会论文汇编[C];2007年
8 雷国亮;周玉坤;张波;;锁骨钩钢板治疗锁骨外端骨折与肩锁关节脱位的疗效分析[A];2007年贵州省医学会骨科学分会学术年会论文汇编[C];2007年
9 陈洪强;赵滨;贾湘谦;陈艺新;;钢板内固定治疗跟骨关节内骨折[A];2007年贵州省医学会骨科学分会学术年会论文汇编[C];2007年
10 王世强;李鹏;邓江;陆双明;;切开复位钢板内固定治疗移位跟骨骨折[A];2007年贵州省医学会骨科学分会学术年会论文汇编[C];2007年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 王亮;脂肪来源的间充质干细胞经软骨诱导后以复合支架修复兔关节软骨缺损的实验[D];吉林大学;2011年
2 陈江;静水压下芹菜素对人椎间盘髓核细胞凋亡及基质代谢的影响[D];北京中医药大学;2011年
3 陈欢;阳离子聚合物介导的基因输送在复合组织再生修复中的应用及免疫效应研究[D];南京大学;2011年
4 巫子涵;电温针对膝骨关节炎患者血清细胞因子与生存质量的影响[D];广州中医药大学;2011年
5 农鲁明;周期性机械应力下大鼠软骨细胞面积扩增和迁移部分通过Src-PLCγ1-ERK1/2信号通路[D];南京医科大学;2011年
6 李真;构建组织工程软骨中机械刺激的作用研究[D];浙江大学;2010年
7 刘松波;藻酸钙载体制备及复合软骨细胞修复关节软骨缺损的研究[D];第四军医大学;2001年
8 马春光;骨盆韧带的生物力学研究及旋转不稳定骨盆骨折的治疗[D];河北医科大学;2003年
9 朱耀旻;体内初步构建组织工程化颌下腺的研究[D];中国医科大学;2005年
10 孔清泉;体外构建组织工程软骨的实验研究[D];四川大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 盛英俊;不同持续时间的周期性压力对构建组织工程软骨的影响[D];南京医科大学;2009年
2 黄益桃;医用臭氧治疗慢性膝关节滑膜炎(湿热内蕴证)的临床研究[D];湖南中医药大学;2010年
3 黄济嘉;复骨健步片对大鼠模型骨折不同时相骨痂质量影响的研究[D];湖南中医药大学;2010年
4 李骥;“跌打膏”对胸腰段椎体单纯压缩性骨折(气滞血瘀型)的中医证候疗效观察[D];湖南中医药大学;2010年
5 曹连波;手法整复经皮克氏针固定治疗踝关节骨折的临床研究[D];黑龙江中医药大学;2010年
6 杨吉业;伤科续骨丸促进骨折愈合的临床观察[D];黑龙江中医药大学;2010年
7 朱庄臣;HA与关节运动促进关节软骨缺损修复的实验研究[D];泰山医学院;2007年
8 王宾;骨髓间充质干细胞向软骨细胞转化的实验研究[D];泰山医学院;2007年
9 谭风金;不同类型内固定治疗老年股骨粗隆间骨折疗效分析[D];山东中医药大学;2010年
10 梁志勇;反向股骨远端LISS治疗老年股骨粗隆间粉碎性骨折的临床研究[D];山东中医药大学;2010年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 吴永辉,李涤尘,卢秉恒,王臻;基于RP的组织工程细胞外基质——载体制造问题研究[J];国外医学.生物医学工程分册;2001年03期
2 熊卓,颜永年,张人佶,孙磊,张曙明;骨组织工程聚左旋乳酸多孔框架快速成形研究[J];清华大学学报(自然科学版);2002年02期
3 颜炜群,佟明华,宇莉,余涛,侯立中,杨同书,高贵,张家颖;培养软骨细胞再形成生长板样软骨组织的研究[J];实验生物学报;1994年02期
4 颜永年,张人佶,崔福斋,卢清萍;用于人工骨制造的喷射成形技术[J];中国机械工程;2000年10期
5 王常勇,王永红,郭希民,赵强,段翠密,杜芝燕,郭梅,薄斌,范明;应用旋转生物反应器和微载体技术体外大规模扩增人骨髓间充质干细胞[J];中华实验外科杂志;2002年04期
6 郝杰,郑启新,郭晓东,刘苏南;含锌煅烧牛松质骨复合骨髓基质细胞构建组织工程骨[J];中华实验外科杂志;2004年01期
7 陆宁,卢世璧,王继芳,王岩;采用自体成熟关节软骨细胞的软骨组织工程修复[J];中华实验外科杂志;2005年03期
8 范卫民;蔡俊;;周期性压力对组织工程软骨的影响及其作用机制[J];中华实验外科杂志;2006年08期
9 尹战海,刘淼,王金堂,曹峻岭,郑钧;诱导骨髓间充质干细胞表达软骨细胞表型[J];中国矫形外科杂志;2002年06期
10 方泽强,王常勇,李慧增,杨军;基于永生化软骨细胞和骨髓基质干细胞的工程化软骨形成的实验研究[J];中国矫形外科杂志;2003年02期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 王建,杨志明,解慧琪;离心管内组织工程软骨培养的研究[J];中华实验外科杂志;2003年11期
2 杨林;武延格;纪玲;王正;Walter Weder;;旋转生物反应器培养对组织工程气管软骨力学强度的影响[J];中国医药生物技术;2008年02期
3 刘玲玲;田晋洪;;兔耳软骨细胞与聚羟基丁酯-聚丙交酯复合物相容性的实验研究[J];山西医药杂志;2010年06期
4 李军政;陈就好;江东新;陈伟南;黄建民;刘志;陈文弦;;组织工程化软骨的低温保藏[J];中国组织工程研究与临床康复;2009年25期
5 赵斌;郝彤;邢更彦;张仲文;;软骨细胞三维培养扩增与液态凝胶复合构建软骨的实验研究[J];实用骨科杂志;2009年08期
6 李殿威;周强;郭平;宋磊;刘涌;;压应力对组织工程软骨细胞增殖的影响[J];南方医科大学学报;2010年11期
7 李忠,杨柳,陈光兴,林炎水,段小军;绿色荧光蛋白在组织工程关节软骨构建中的示踪作用[J];中国临床康复;2005年30期
8 李忠,杨柳,林炎水,陈光兴;胶原凝胶包埋软骨细胞接种骨胶原基质支架体外构建组织工程软骨[J];四川医学;2005年10期
9 毛艳;张西正;;软骨组织工程中细胞外基质的研究[J];中国临床康复;2006年29期
10 欧阳彬;范卫民;马益民;刘锋;;壳聚糖、Ⅱ型胶原和PGA三种支架体外构建组织工程软骨的比较研究[J];江苏医药;2007年09期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 冷薇;冯文周;邹学农;;骨性关节炎(OA)临床研究进展及药物治疗[A];2010年中国药学大会暨第十届中国药师周论文集[C];2010年
2 张继帅;郝振明;谭晓红;王友亮;毛春明;吕娅歆;程萱;杨晓;;软骨细胞特异性Smad4基因剔除导致小鼠长骨发育异常[A];中国的遗传学研究——中国遗传学会第七次代表大会暨学术讨论会论文摘要汇编[C];2003年
3 赵阳;柳子星;王颖;张惠珍;王树军;葛海良;;大鼠IL—10真核表达载体在软骨细胞中的瞬时表达[A];中国免疫学会第四届学术大会会议议程及论文摘要集[C];2002年
4 刘献祥;;毫米波抑制TNF-α诱导NF-κB信号转导通路的实验研究[A];2010中国医师协会中西医结合医师大会摘要集[C];2010年
5 任宏造;;软骨细胞的超生结构病理[A];第六次全国电子显微学会议论文摘要集[C];1990年
6 杨仁轩;王昭佩;许树柴;郭玉海;邓晋丰;;人参皂苷Rg_1对软骨细胞增殖及表型的影响[A];中医药研究学术研讨会论文集[C];2004年
7 张亚;王晓东;尹航;张锡庆;董寅生;;兔骺板软骨细胞与多孔聚乳酸、多孔丝素材料的体外相容性[A];中华医学会第八次全国小儿外科学术会论文集[C];2010年
8 张春雷;孙美乐;姚洪菊;;抗氧化剂和透明质酸对软骨细胞的保护作用[A];中国细胞生物学学会第五次会议论文摘要汇编[C];1992年
9 张艳;柴岗;刘伟;周广东;崔磊;曹谊林;;体外培养过程中去分化的人软骨细胞基因表达谱的变化[A];第四届华东六省一市整形外科学术会议暨2007年浙江省整形、美容学术会议论文汇编[C];2007年
10 钟玉;李荣亨;;复元胶囊含药血清对软骨细胞P38信号通路的影响[A];全国第七届中西医结合风湿病学术会议论文汇编[C];2008年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 保健时报特约记者 方序;体外“养”一块软骨补膝盖[N];保健时报;2011年
2 记者 邰举;韩用猪软骨细胞制成生物材料[N];科技日报;2008年
3 吴一福;西安交大:用人胎儿软骨细胞培养成功软骨组织工程种子细胞[N];中国医药报;2006年
4 本报记者 王丹 通讯员 罗国金;组织工程软骨 关节修复的点睛之笔[N];健康报;2011年
5 陈如为;骨关节炎折磨千万人软骨细胞缺氧是元凶[N];医药经济报;2000年
6 于峰;哪些运动有助孩子长高[N];中国中医药报;2008年
7 徐亚静;上海两项自然科学基金项目通过鉴定[N];中国医药报;2005年
8 杨春;药物增高不可信[N];大众卫生报;2005年
9 姚乐;保护关节要趁年轻[N];农村医药报(汉);2008年
10 暨南大学医药生物技术研究开发中心 姚成灿;TGF-β:重塑傲骨舍我其谁[N];医药经济报;2001年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 杨朝晖;钠离子通道阻断剂利多卡因体内外干预关节软骨的生物学效应[D];山西医科大学;2011年
2 陈书军;组织工程软骨的构建及修复关节软骨缺损的实验研究[D];中国人民解放军第四军医大学;2003年
3 李元城;微流控芯片上胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对兔关节软骨细胞体外增殖的影响[D];大连医科大学;2010年
4 祁军;大鼠骺板软骨细胞体外三维培养及细胞响应力学信号的初步机制[D];华中科技大学;2011年
5 郭常安;TGF-β_1基因修饰软骨细胞和骨髓间充质干细胞构建新型组织工程软骨种子细胞[D];复旦大学;2003年
6 孙宝宾;鼻中隔软骨细胞与神经肽关系的实验研究[D];复旦大学;2004年
7 杜佳梅;以小耳残耳软骨细胞为种子细胞的组织工程软骨的实验研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2008年
8 杨运东;骨炎定对体外培养软骨细胞的影响[D];广州中医药大学;2001年
9 胡建华;骨性关节炎软骨细胞凋亡的研究[D];中国协和医科大学;1999年
10 傅捷;含软骨细胞的纤维蛋白胶修复兔关节软骨缺损的实验研究[D];第二军医大学;2000年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 温叶飞;耳廓软骨细胞生物学特性研究及组织工程软骨的体外构建初探[D];西北农林科技大学;2004年
2 王结果;异种关节软骨与MSCs体外共同培养的实验研究[D];南京医科大学;2010年
3 陈刚;软骨细胞和骨髓间充质干细胞混合培养构建组织工程软骨的实验研究[D];南京医科大学;2010年
4 邱丽燕;人骨髓间充质干细胞的分离、培养及向软骨细胞方向的诱导[D];浙江大学;2003年
5 孙和炎;自固化磷酸钙/纤维蛋白凝胶双相支架负载软骨细胞修复兔关节软骨缺损的实验研究[D];安徽医科大学;2003年
6 朱金文;膝关节腔内同种异体脱钙骨复合软骨细胞\骨髓间充质干细胞组织工程软骨培养的试验研究[D];安徽医科大学;2008年
7 杨万波;胰岛素样生长因子对软骨细胞复合物体外成软骨能力的影响[D];武汉大学;2004年
8 王利刚;中药鹿茸生长素对家兔关节软骨细胞代谢的影响[D];江西医学院;2004年
9 王宁;等离子刀不同能量对软骨辐射效应的研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2010年
10 孙涛;同种异体软骨细胞移植术后关节软骨蛋白多糖的测定[D];青岛大学;2003年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026