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《南京医科大学》 2010年
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莪术、槟榔促结肠运动的量效关系、作用机制及中药助溶剂的研究

吕涛  
【摘要】:目的: 1.通过离体实验,观察莪术( RC )煎液对离体大鼠结肠平滑肌收缩运动的影响,并初步探讨其作用机制。 2.观察槟榔( AS )煎液对离体大鼠结肠平滑肌收缩运动的影响及量效关系,并初步探讨其作用机制。 3.观察二甲基亚砜( Dimethyl Sulfoxide, DMSO )对离体大鼠结肠平滑肌活性的影响,并探讨其作为脂溶性中药成分助溶剂的可行浓度范围。 方法: 1.制备大鼠结肠平滑肌肌条,将肌条置于微量多导体外器官水平浴槽中固定。在37℃恒温、通氧和Krebs液灌注条件下,分别以9 g/L NaCl溶液( NS )、莪术或槟榔为对照组,分别记录单独使用莪术、槟榔或阻断剂(酚妥拉明、维拉帕米和阿托品)孵育后莪术、槟榔对肌条收缩效应的影响。 2.制备大鼠结肠平滑肌肌条,将肌条置于微量多导体外器官水平浴槽中固定。在37℃恒温、通氧和Krebs液灌注条件下,分别观察不同浓度(浴槽内终浓度:0.2%,0.4%,0.6%,0.8%,1.0%,1.4%,1.8%,2.2%,2.6%,3.0%, 3.4%,3.8%,4.2%,4.6%,5.0%,5.4%,5.8%,以V/V表示浓度)的DMSO对结肠平滑肌自发收缩的影响以及对Ach ( 1×10-6 mol/L )引起的结肠平 滑肌收缩的抑制作用。 结果: 1.莪术对结肠平滑肌自发收缩的影响:以Ach ( 1×10-6 mol/L )激发的平滑肌收缩的观察指标为100%。结果显示随莪术浓度的增大,其促进结肠平滑肌收缩的作用逐渐增强。各组最大收缩振幅:RC 0.01g/L 48.95%±4.91% ( P=0.961 ),RC 0.1g/L 50.23%±4.04% ( P=0.523 ),RC 1g/L 63.92%±2.06% ( P=0.0001 ),RC 10g/L 76.27%±2.28% ( P=0.0001 )。各组收缩曲线下面积:RC 0.01g/L 29.76%±12.91% ( P=0.994 ),RC 0.1g/L 30.82%±10.66% ( P=0.881 ),RC 1g/L 44.09%±11.10% ( P=0.043 ),RC 10g/L 55.66%±10.29% ( P=0.001 )。各组与NS对照组比较,RC 1g/L,RC 10g/L组最大收缩振幅和面积的比较均有统计学意义( P0.05 )。阻断剂孵育后莪术对结肠平滑肌收缩效应的影响:以莪术( 10g/L )引起的平滑肌收缩的观察指标为100%,并作为对照组。加入阻断剂后各组最大收缩振幅:酚妥拉明组98.85%±3.819% ( P=0.812 ),维拉帕米组87.35%±50.49% ( P=0.016 ),阿托品组33.97%±15.18% ( P=0.0001 )。各组收缩曲线下面积:酚妥拉明组98.67%±3.61% ( P=0.767 ),维拉帕米组73.80%±9.37% ( P=0.001 ),阿托品组27.55%±11.56% ( P=0.0001 )。与对照组相比,阿托品、维拉帕米对肌条的收缩有抑制作用,其收缩振幅和面积的比较均有统计学意义( P0.05 ),可以认为其有阻断作用;而酚妥拉明组的比较则没有统计学意义( P0.05 )。 2.槟榔对结肠平滑肌自发收缩的影响:以Ach ( 1×10-6 mol/L )激发的平滑肌收缩的观察指标为100%。结果显示随槟榔浓度的增大,促进作用逐渐增强。各组最大收缩振幅:AS 0.01g/L 63.53%±19.87% ( P=0.303 ),AS 0.1g/L 81.62%±7.03% ( P=0.019 ),AS 1g/L 106.52%±26.93% ( P=0.0001 ),AS 10g/L 122.11%±26.75% ( P=0.0001 )。各组收缩曲线下面积:AS 0.01g/L41.80%±11.04% ( P=0.334 ),AS 0.1g/L 68.16%±12.56% ( P=0.002 ),AS 1g/L 151.07%±27.78% ( P=0.0001 ),AS 10g/L 222.32%±24.54% ( P=0.0001 )。各组与NS对照组比较,AS终浓度0.1g/L、1g/L、10g/L组最大收缩振幅和面积的比较均有统计学意义( P0.05 )。阻断剂孵育后槟榔对结肠平滑肌收缩效应的影响:以槟榔( 1g/L )引起的平滑肌收缩的观察指标为100%,并作为对照组。各组最大收缩振幅:酚妥拉明组101.32%±5.90% ( P=0.764 ),维拉帕米组74.03%±9.49% ( P=0.0001 ),阿托品组12.77%±9.98% ( P=0.0001 )。各组收缩曲线下面积:酚妥拉明组98.16%±3.41% ( P=0.676 ),维拉帕米组73.10%±11.92% ( P=0.0001 ),阿托品组11.45%±8.54% ( P=0.0001 )。与对照组相比,阿托品组、维拉帕米组对肌条的收缩有抑制作用,其收缩振幅和面积的比较均有统计学意义( P0.01 ),可以认为其有阻断作用;而酚妥拉明组的比较则没有统计学意义( P0.05 )。 3. DMSO对结肠平滑肌自发收缩的影响: NS为对照组,以其最大收缩振幅和相应曲线下面积为100%。各组最大收缩振幅:DMSO 0.2%组99.99%±0.08% ( P=1.000 ),0.4%组100.04%±0.17% ( P=1.000 ),0.6%组100.11%±0.15% ( P=0.958 ),0.8%组99.94333±0.61% ( P=1.000 ),1.0%组99.94%±1.79% ( P=1.000 ),1.4%组88.225%±5.34% ( P=0.086 ),1.8%组72.93%±7.63% ( P=0.011 ),2.2%组67.87%±12.18% ( P=0.043 ),2.6%组65.26%±11.02% ( P=0.019 ),3.0%组57.80%±12.70% ( P=0.015 ),3.4%组47.33%±10.65% ( P=0.002 ),3.8%组39.34%±12.87% ( P=0.003 ),4.2%组33.45%±9.61% ( P=0.001 ),4.6%组32.18%±8.25% ( P=0.001 ),5.0%组24.05%±8.78% ( P=0.001 ),5.4%组22.70%±8.57% ( P=0.001 ),5.8%组16.83%±7.52% ( P=0.001 )。与NS组比较,在1.8%~5.8%的范围内,最大收缩振幅的比较均有统计学意义( P0.05 );在2.2%~5.8%浓度组的范围内,各组曲线下面积的比较均有统计学意义( P0.05 )。DMSO对Ach引起的结肠平滑肌收缩的影响: Ach ( 1×10-6 mol/L )为对照组,以其激发平滑肌最大收缩的振幅和相应曲线下面积为100%。各组最大收缩振幅如下:DMSO 0.2%组100%±0.01% ( P=1.000 ),0.4%组100.00%±0.09% ( P=1.000 ),0.6%组100.03%±0.41% ( P=1.000 ),0.8%组100.03%±0.38% ( P=1.000 ),1.0%组99.92%±0.50% ( P=1.000 ),1.4%组96.70%±3.55% ( P=0.814 ),1.8%组83.90%±7.41% ( P=0.091 ),2.2%组76.86%±8.37% ( P=0.034 ),2.6%组60.71%±9.46% ( P=0.006 ),3.0%组55.29%±14.04% ( P=0.018 ),3.4%组62.32%±18.73% ( P=0.012 ),3.8%组46.81%±13.33% ( P=0.007 ),4.2%组39.57%±7.96% ( P=0.001 ),4.6%组36.53%±11.29% ( P=0.001 ),5.0%组29.59%±9.67% ( P=0.001 ),5.4%组17.23%±9.03% ( P=0.001 ),5.8%组11.58%±7.44% ( P=0.001 )。与Ach对照组比较,在2.2%~5.8%的浓度范围内,各组最大收缩振幅的比较均有统计学意义( P0.05 );在2.2%~5.8%的浓度范围内,各组曲线下面积的比较均有统计学意义( P0.05 )。 结论: 1.莪术对大鼠结肠平滑肌的收缩活动有兴奋作用,且呈正相剂量关系,引起的收缩效应可被M受体阻断剂阿托品和Ca2+阻断剂维拉帕米阻断,而未能被α-受体阻断剂酚妥拉明阻断,为临床用药提供实验依据,或者对开发新药都具有一定的意义。 2.槟榔对大鼠结肠平滑肌的收缩活动有兴奋作用,且呈正相剂量关系,引起的收缩效应可被M受体阻断剂阿托品和Ca2+阻断剂维拉帕米阻断,而未能被α-受体阻断剂酚妥拉明阻断,为临床辨病、辨证用药提供依据,或者对开发新药都具有一定的意义。 3. DMSO在浓度不大于1.4% ( V/V )时对大鼠结肠平滑肌的活性无明显影响,对于作为脂溶性中药的助溶剂有运用价值。
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