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~(99)Tc~m-DOTA-NOC的制备及其对乳腺癌荷瘤鼠显像与生长抑素受体表达水平的相关性研究

高玉婷  
【摘要】:目的探讨~(99)Tc_m标记第三代生长抑素类似物DOTA-NOC的反应条件及放化纯、稳定性,观察其在正常小鼠体内的生物分布和代谢情况,并观察乳腺癌荷瘤鼠肿瘤部位对其的放射性摄取,进而行标记物~(99m)Tc-DOTA-NOC与乳腺癌组织生长抑素受体表达水平的相关性研究。 方法以DOTA-NOC的四氮杂环结构为螯合基团进行~(99)Tc_m标记,制备合成~(99)Tc_m-DOTA-NOC,寻求最适标记条件,用纸层析法(PC)和高效液相色谱仪法(HPLC)测定其标记率及标记化合物的稳定性,于不同时间点眼球取血处死小鼠,测定血液及各主要脏器的放射性,通过计算各脏器的%ID/g,分析~(99)Tc_m-DOTA-NOC在正常小鼠及人乳腺癌荷瘤裸鼠体内的生物分布[每克组织百分注射剂量率(%ID/g)]和代谢情况。建立人乳腺癌荷瘤鼠模型进行显像和受体表达水平的相关性研究,通过尾静脉注射乳腺癌荷瘤鼠模型,行~(99)Tc_m-DOTA-NOC显像,勾画ROI计算肿瘤与对侧正常组织(T/NT)的放射性比值并测定肿瘤及主要脏器单位组织的放射性摄取百分值(%ID/g),采用逆转录聚合酶反应(RT-PCR)检测肿瘤组织中各SSTR亚型mRNA的表达水平,对SSTR亚型表达水平与T/NT放射性摄取比值进行相关性研究。 结果标记合成~(99)Tc_m-DOTA-NOC的反应条件为PH值为4.1、浓度为0.2mol/L的醋酸缓冲液115μl、DOTA-NOC5μl(5μg)、~(99)Tc_mO4100μl(148MBq)、SnCl2·Hcl 30μl(30μg)、反应温度50℃、反应条件水浴、反应时间45min,标记率可达95%,6h后标记率仍可达90%以上。HPLC测定标记物呈单峰。~(99)Tc_m-DOTA-NOC主要分布于正常小鼠的肝脏与肾脏,%ID/g值分别为12.41及5.15。~(99)Tc_m-DOTA-NOC在荷瘤鼠组织器官分布与正常小鼠分布相似,但肿瘤部位有较高的放射性浓聚,与对侧正常组织T/NT比值较高,4h达到2.41±0.21;~(99)Tc_m-DOTA-NOC荷瘤鼠体内生物分布示药物在肿瘤部位有较高的摄取;RT-PCR示乳腺癌组织中有着丰富的SSTR表达,SSTR3和SSTR2亚型表达水平较高,相对表达量分别为1.07±0.13、0.95±0.11,两者mRNA的表达水平与荷瘤鼠显像T/NT比值呈正相关(两者分别r=0.94,r=0.81,P0.05)。 结论~(99)Tc_m-DOTA-NOC的标记方法简单,标记率高,标记化合物稳定,理化性质优良,无需进一步纯化,显像效果好。与SSTR表达阳性的乳腺癌有较高的亲和力,呈放射性浓聚。乳腺癌细胞株SSTR mRNA的表达水平与肿瘤组织对~(99m)Tc-DOTA-NOC的摄取呈正相关。对乳腺癌有较好的影像诊断价值,对于乳腺癌PRRT治疗有较好的临床指示作用,有望成为一种新型SSTR阳性肿瘤显像剂,有利于临床的推广应用。


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