收藏本站
《南京医科大学》 2010年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

培养基血清浓度对人表皮干细胞增殖分化的影响

李云剑  
【摘要】: 目的 比较不同血清浓度培养体系对表皮干细胞增殖分化的影响。 方法 采用两步酶消化法和Ⅳ型胶原差速贴壁相结合的方法获得人原代表皮干细胞,分别以0%、5%、10%、15%和20%血清浓度的培养基在96孔板中进行培养。观察表皮干细胞形态,克隆形成及增殖的情况,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测各组细胞存活和生长情况,分析量效和时效关系;持续传代培养细胞,每次传代的同时取适量细胞,用免疫细胞化学的方法进行表皮干细胞和表皮细胞相应标志物(K19、K14和K10)的测定。 结果 表皮干细胞在各种血清浓度的培养基内均能形成克隆,增殖良好。用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定,所得相同时间点各组OD值在统计学上没有差异(P0.05),表皮干细胞生长速度各组间无差异。第1代表皮干细胞K19均有表达,而K14和K10表达均为阴性;其后高血清浓度(15%、20%)培养基中细胞较低血清浓度(0%、5%)先出现K14、K10蛋白的表达;培养至第10代是各组细胞均出现K10高表达,而K19、K14表达阴性。 结论 在低血清浓度(0%、5%)的培养基中表皮干细胞生长良好,且能够相对较好保持表皮干细胞的特性。
【学位授予单位】:南京医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:R329

【参考文献】
中国期刊全文数据库 前6条
1 胡葵葵,胡琼华,戴育成;皮肤干细胞的研究进展[J];国外医学.皮肤性病学分册;2004年02期
2 ;Putative epidermal stem cell convert into corneal epithelium-like cell under corneal tissue in vitro[J];Science in China(Series C:Life Sciences);2007年01期
3 李建福 ,付小兵 ,盛志勇 ,杨银辉 ,孙同柱;表皮干细胞体外分离与培养[J];解放军医学杂志;2002年05期
4 暴丽华;李振华;孙晋浩;丛丽;刘文静;高英茂;;血清对联合培养神经上皮干细胞与Schwann细胞的影响[J];山东大学学报(医学版);2007年05期
5 刘媛,龙在云,曾琳,伍亚民,陈恒胜,廖维宏;不同培养条件对神经干细胞分化的影响[J];中国临床康复;2003年31期
6 付小兵,孙晓庆,孙同柱,董永洪,顾小曼,陈伟,盛志勇;表皮细胞生长因子通过诱导皮肤干细胞分化加速受创表皮再生的研究[J];中国修复重建外科杂志;2002年01期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 曾琳;李民;刘媛;龙在云;李书林;伍亚民;;原浆型和纤维型星形胶质细胞调控神经干细胞定向分化的比较研究[J];创伤外科杂志;2007年02期
2 李民;曾琳;刘媛;龙在云;李书林;伍亚民;;原浆型星形胶质细胞调控神经干细胞定向分化的优化比例筛选[J];创伤外科杂志;2008年01期
3 彭好;周宏;熊英;;碱性成纤维生长因子对HIBD新生大鼠脑组织nestin表达的影响[J];中国当代儿科杂志;2006年03期
4 刘维政;何明丰;高振和;陶江;李灿辉;;重组人表皮生长因子(rhEGF)对污染性Ⅱ度创面的疗效观察[J];当代医学;2009年27期
5 周鹏翔,罗成群,谷永红,贺全勇,李高峰,彭长缨,彭浩;角蛋白19在Ⅲ度烧伤创面修复过程中的表达及意义[J];中国医师杂志;2003年09期
6 徐盈斌,利天增,祁少海,张涛,谢举临,柯昌能,赵李平;荷负电气溶胶对大鼠烫伤创面表皮细胞生长因子和β_1整合素表达的影响[J];第三军医大学学报;2005年12期
7 刘莉,蒋志宏,杨明洁;金因肽治疗儿童难愈合伤口的疗效考察[J];儿科药学杂志;2005年04期
8 王志勇;施耘;曲年震;阮建春;;联合外用表皮生长因子和成纤维细胞生长因子凝胶制剂促进中厚植皮供区愈合的疗效[J];广东医学;2012年10期
9 安剑铮,朱巍;大鼠胚胎神经干细胞的培养及体外基因转染研究[J];国际医药卫生导报;2005年14期
10 付小兵;李建福;盛志勇;;表皮干细胞:实现创面由解剖修复到功能修复飞跃的新策略[J];感染.炎症.修复;2002年04期
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 钟清玲;糖尿病大鼠表皮干细胞β-catenin和cyclinD1的表达及其在创面修复中的作用研究[D];南昌大学;2011年
2 朱巍;转基因神经干细胞移植对脑缺血后神经血管保护作用的研究[D];复旦大学;2003年
3 丁国斌;人胎儿表皮干细胞的分离培养、基因转染及向毛囊的定向分化[D];第四军医大学;2004年
4 赵慧英;神经干细胞和皮肤干细胞的体外培养及诱导分化神经细胞的研究[D];西北农林科技大学;2004年
5 宋庆高;转染γ-干扰素的口腔黏膜细胞片修复裸露硬腭的上颌骨生长发育研究[D];四川大学;2005年
6 李海红;细胞分化调控对皮肤及其附属结构损伤修复与再生作用的基础研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2006年
7 李建福;汗腺发生的基础及诱导表皮干细胞直接分化为汗腺细胞的实验研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2002年
8 祝寿荣;重组人IL-10基因表达载体转染角膜细胞及其抑制角膜移植排斥反应的实验研究[D];青岛大学;2006年
9 王先成;EGF基因转染人脂肪干细胞体外诱导表皮细胞修复创面的实验研究[D];中国协和医科大学;2006年
10 尹兴平;人老化进程中头发生长的变化[D];中国协和医科大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 陈兰;龟板有效成分对胎鼠表皮干细胞凋亡的影响[D];广州中医药大学;2011年
2 郭锐;PKC-ζ活化在SDF-1趋化人表皮干细胞迁移中作用的初步研究[D];第三军医大学;2011年
3 董为;Wnt/β-catenin信号通路在HBx基因体外诱导大鼠卵圆细胞恶化过程中的作用[D];华中科技大学;2010年
4 毛庆龙;电动磨痂治疗深Ⅱ度烧伤创面的临床研究[D];广西医科大学;2004年
5 王启凤;黇鹿和牧羊犬皮肤细胞的分离与培养研究[D];南京农业大学;2003年
6 杨燕妮;自异体微粒皮混合移植对创面愈合影响的实验研究[D];第三军医大学;2004年
7 牛云飞;表皮干细胞的体表分布及其分离、培养和鉴定[D];第二军医大学;2004年
8 刘族安;人表皮细胞培养及细胞膜片在供皮区应用的研究[D];第二军医大学;2004年
9 李伟;山羊表皮干细胞分离纯化的研究[D];西北农林科技大学;2005年
10 邱泽亮;人表皮干细胞的分离和培养的研究[D];江西医学院;2005年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前8条
1 张蕾,陈沅,田杰,张文,朱静;心肌细胞介导骨髓间充质干细胞的心肌样分化[J];第三军医大学学报;2005年16期
2 刘仕勇,张可成,杨辉,吕胜青;IL-1β和胎牛血清对大鼠神经干细胞分化的影响[J];中国组织化学与细胞化学杂志;2000年04期
3 刘媛,龙在云,曾琳,伍亚民,陈恒胜,廖维宏;不同培养条件对神经干细胞分化的影响[J];中国临床康复;2003年31期
4 孙晓庆,付小兵,盛志勇;表皮干细胞[J];中华创伤杂志;2000年10期
5 万虹,安沂华,王红云,孙梅珍,刘暌,王忠诚,张亚卓;雪旺氏细胞促进共培养大鼠胚胎神经干细胞的分化[J];中华神经外科杂志;2002年02期
6 安沂华,万虹,王红云,张泽舜,孙梅珍,张亚卓,王忠诚;大鼠雪旺氏细胞支持人胚胎神经干细胞的生长并诱导其分化[J];中华神经外科杂志;2002年05期
7 傅小兵,孙同柱,王亚平,杨银辉,蒋礼先,顾小曼,常国友,盛志勇;表皮细胞生长因子与碱性成纤维细胞生长因子促进创面修复效应的比较性研究[J];中国修复重建外科杂志;1999年05期
8 付小兵;再论成纤维细胞生长因子与软组织创伤修复[J];中国修复重建外科杂志;2000年05期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 吴树荣;万古霉素的临床药代动力学[J];国外医药.抗生素分册;1988年02期
2 陈寄花;;抗癫痫药物血液浓度监测的滥用[J];国际神经病学神经外科学杂志;1989年01期
3 吴凤祥;刘树清;;血清锂浓度高低对健康的影响[J];医学与社会;1992年01期
4 赵秀梅;冯文茹;胡人杰;;异种动物血清对体外培养人肿瘤细胞生长的影响[J];中国比较医学杂志;2010年06期
5 陈伟华;陈娟;张明明;崔秋英;帖彦清;;血清、关节液中葡萄糖6-磷酸异构酶抗原浓度测定对诊断类风湿关节炎的意义[J];现代中西医结合杂志;2010年25期
6 周铭贤;绵羊血清代替人血清体外培养保存恶性疟原虫[J];国际医学寄生虫病杂志;1982年05期
7 陆明盛;安定溶液在直肠滴注与注射后的人体吸收[J];国外医学.药学分册;1982年02期
8 Fenster PE;朱毓仁;;药物代谢动力学原理在心血管药物方面的应用[J];国际心血管病杂志;1983年03期
9 杨筠;;用氮磷检测器同时测定血清中1-四氢呋喃-5-氟脲嘧啶和5-氟脲嘧啶的气相色谱法[J];药学进展;1986年02期
10 韩晋;;西米替丁与甲苯咪唑[J];药学实践杂志;1990年01期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 李云剑;林樾;燕辛;周宏礽;谭谦;;培养基血清浓度对人表皮干细胞增殖分化的影响[A];美丽人生 和谐世界——中华医学会第七次全国医学美学与美容学术年会、中华医学会医学美学与美容学分会20周年庆典暨第三届两岸四地美容医学学术论坛论文汇编[C];2010年
2 李祺福;洪水根;;中国鲎血低分子活性物质对癌细胞增殖分化的调控[A];新世纪 新机遇 新挑战——知识创新和高新技术产业发展(上册)[C];2001年
3 陶灵;李世荣;刘剑毅;戴霞;李喆;;CTGF刺激人增生性瘢痕成纤维细胞增殖分化作用机制研究[A];第八届西南五省一市烧伤整形学术会议暨贵州省医学会烧伤整形分会2010年学术年会论文汇编[C];2010年
4 龚宇;宋波;熊恩庆;金锡御;;膀胱出口梗阻对逼尿肌增殖分化状态的影响[A];全面建设小康社会:中国科技工作者的历史责任——中国科协2003年学术年会论文集(下)[C];2003年
5 高瑞兰;陈小红;林筱洁;钱煦岱;徐卫红;吴超群;;三七皂苷诱导造血细胞基因表达谱的研究[A];全国中西医结合血液病学术研讨会、浙江省中西医结合学会血液病专业委员会成立大会首次学术年会暨继续教育学习班论文汇编[C];2006年
6 曲杨;贾心善;;组蛋白去乙酰化酶1在人支气管干细胞增殖分化过程中的时空表达[A];中华医学会病理学分会2006年学术年会论文汇编[C];2006年
7 姚丽娟;陈义增;徐晓薇;林绍生;陈中林;曾爱平;;大花蕙兰无菌播种技术试验[A];2006浙江林业科技论坛论文集[C];2006年
8 高瑞兰;陈小红;林筱洁;钱煦岱;徐卫红;吴超群;;三七皂苷诱导造血细胞基因表达谱的研究[A];2006年浙江省血液病学学术年会论文汇编[C];2006年
9 刘向荣;邢海燕;田征;唐克晶;饶青;王敏;王建祥;;AML1a对小鼠造血细胞增殖分化的影响[A];第11次中国实验血液学会议论文汇编[C];2007年
10 马小波;贾心善;;气管干细胞增殖分化过程中Notch信号的表达及意义[A];中华医学会病理学分会2007年学术年会暨第九届全国病理大会论文汇编[C];2007年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 万同己;血清浓度不是地高辛中毒惟一指标[N];中国医药报;2004年
2 衣晓峰 庄磊;测血清浓度可查辐射损伤[N];中国安全生产报;2005年
3 ;短链脂肪酸对人结肠癌Caco-2细胞增殖分化的影响与临床意义[N];中国医药报;2003年
4 李水根;基因芯片研究中药有突破[N];健康报;2006年
5 刘建勋 韩笑 孙宇扬;双参通冠方血清药理研究有新发现[N];中国医药报;2006年
6 王惟恒;哺乳期慎用抗生素[N];中国中医药报;2006年
7 白冰;缓释型拉莫三嗪治疗依从性更佳[N];中国医药报;2007年
8 陆志城;Pegvisomant效果不错[N];医药经济报;2001年
9 欧柏生;治疗梅毒不宜用水剂青霉素[N];健康报;2004年
10 冯友根;胆道感染的抗菌药应用[N];中国医药报;2003年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 李萍;心脏特异性新激酶TNNI3K在心肌细胞缺氧/缺血损伤时的作用及机制[D];南昌大学;2007年
2 王蓓;OSAHS患者心功能测定、心血管相关因子检测及β_1-肾上腺素受体基因多态性研究[D];山西医科大学;2008年
3 郑翠玲;低血清浓度培养的间充质干细胞特性及其对人Th细胞的免疫调节作用[D];中国协和医科大学;2009年
4 蒋吉英;胚胎肝干细胞的增殖、分化及其调控因素[D];四川大学;2004年
5 张波;脑梗死后自体神经干细胞原位激活及其蛋白质组学的实验研究[D];中国协和医科大学;2005年
6 王晔玲;老龄兔骨髓间充质干细胞体外分离、培养及移植治疗心肌梗死的研究[D];吉林大学;2007年
7 杨力;腹腔镜辅助小切口次全子宫切除手术的临床研究[D];第二军医大学;2007年
8 王泽;人肝细胞—乳鼠原位移植模型构建中细胞免疫机制的研究[D];山东大学;2009年
9 徐清斌;自体干细胞移植治疗冠心病的研究[D];南京医科大学;2004年
10 王力;巴戟天对大鼠骨髓基质细胞增殖、成骨分化及Cbfα1基因表达的影响[D];福建中医学院;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 李云剑;培养基血清浓度对人表皮干细胞增殖分化的影响[D];南京医科大学;2010年
2 王兰梅;TGFβ1基因多态性及血清浓度对先心病心肌纤维化的相关性研究[D];中南大学;2011年
3 崔立全;乌鲁木齐市汉族健康成人IGF-1的血清浓度测定[D];新疆医科大学;2011年
4 李鹏;滋补脾阴方药保护谱系限制性神经前体细胞抗过氧化损伤的实验研究[D];大连医科大学;2008年
5 潘雪君;MTX保守治疗胎盘植入乳汁及血清浓度监测[D];遵义医学院;2011年
6 寇歆馨;卵巢上皮性肿瘤组织中激肽释放酶蛋白14和CA_(125)的表达及其相关性分析[D];郑州大学;2007年
7 孙星;血清转化生长因子-β1在肾缺血再灌注损伤患者中的表达规律及临床意义[D];大连医科大学;2008年
8 玉石;骨髓基质干细胞体外诱导分化及移植治疗脑外伤患者的临床观察[D];第四军医大学;2009年
9 张华;重庆市区健康成人五种骨生长因子血清(浆)浓度测定[D];重庆医科大学;2007年
10 赵强;瓣膜置换患者围术期炎性反应和心肌损伤干预治疗的初步研究[D];第四军医大学;2009年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026