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《南京医科大学》 2009年
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载药纳米微粒对恶性黑色素瘤治疗作用体内、体外实验研究

郑东辉  
【摘要】:目的: 恶性黑色素瘤是常见皮肤恶性肿瘤,早期可以手术治疗,晚期、转移性肿瘤手术效果差,化疗药物效果欠佳,且有较大毒副作用。寻找新的有效治疗药物成为热点。多西紫杉醇(Docetaxel,DOC)和姜黄素(Curcumine)是两种近期被确证对恶性黑色素瘤有治疗效果的药物,但两者存在水溶性差、过敏反应多、作用时间短、使用途径少、一定毒副作用等缺点。这些缺点严重限制了两种药物的效果和使用范围。纳米载药系统拥有靶向特性、缓释特性、高度稳定性、低毒性。聚乙二醇(PEG)-聚己内脂(PCL)壳核结构纳米微球具有双向溶解性,本研究利用PEG-PCL分别包裹多西紫杉醇和姜黄素,在体外、体内对这两种载药纳米微粒的作用、副作用进行了研究,探讨纳米微粒性状、溶解性、药物包裹的效率、靶向性、缓释性、黑色素瘤肿瘤细胞杀伤性,及动物实验效果和毒副作用。 方法: (1)采用开环聚合法(ring-opening method)合成聚乙二醇和聚己内酯(mPEG-PCL)嵌合体;采用溶剂分散法制备载DOC的PEG-PCL壳核纳米微粒(DOCNP),观察是否达到预想效果。并观察其水溶液颜色、透明度。以原子力显微镜、透射电镜观察粒子形态,动态光散射仪测定粒径分布(D)及Zeta电位(U )。高效液相色谱法测定并计算出DOCNP在不同投药比例时的包封率与载药量。 (2)运用透析法测定DOCNP与DOC裸药累积体外释放曲线并进行比较,探讨以PEG-PCL纳米微粒作为载体系统对DOC作用时间的影响;用荧光显微镜观察纳米微粒在肿瘤细胞中的分布;用MTT细胞毒实验比较DOCNP与DOC裸药杀伤肿瘤细胞能力。 (3)用B16细胞注射ICR小鼠,制作异体移植的黑色素瘤小鼠模型。静脉给以DOCNP、DOC,测量瘤体大小的变化,同时通过检测小鼠体重变化、观察一般情况比较载药纳米微粒与裸药对小鼠的毒副作用。 (4)瘤体内分别注射DOCNP和DOC裸药,测量瘤体大小的变化,同时通过检测小鼠体重变化、观察一般情况比较载药纳米微粒与裸药对小鼠的毒副作用。 (5)制备载姜黄素的PEG-PCL壳核纳米微粒(姜黄素NP),观察是否达到预想效果,并观察其溶液颜色、透明度。以原子力显微镜、透射电镜观察粒子形态,动态光散射仪测定粒径分布(D)及Zeta电位(U );测定姜黄素纳米微粒包封率与载药量。 (6)运用透析法测定姜黄素NP与姜黄素裸药释放曲线并进行比较,探讨以PEG-PCL纳米微粒作为载体系统对姜黄素作用时间的影响;用MTT细胞毒实验比较姜黄素载药纳米粒与姜黄素裸药杀伤肿瘤细胞能力。 (7)用B16细胞注射ICR小鼠,制作异体移植的黑色素瘤小鼠模型,瘤体内分别注射姜黄素纳米粒和姜黄素裸药,观察瘤体大小的变化,同时通过检测小鼠体重、观察一般情况比较载药纳米微粒和裸药对小鼠的毒副作用。 结果: (1)DOCPEG-PCL纳米微粒在生理盐水中溶解性明显高于DOC裸药,原子力显微镜、透射电镜显示微粒直径均小于100nm。载药纳米微粒形态呈表面光滑的圆形。动态光散射仪测定微粒电位-5mV ,远低于没有PEG外壳的普通纳米微粒表面的-35mv,证明PEG外壳降低了细胞对纳米粒的排斥力。DOCNP的包封率达90%,最高载药量达19.4%。 (2)在B16细胞中,DOCNP的释放曲线明显低于DOC裸药的释放曲线,提示DOCNP有良好的缓释效果;免疫荧光显示与香豆素-6共同包裹的DOCNP进入了肿瘤细胞的细胞核周围的细胞浆,提示有良好的靶向性;细胞毒试验显示DOCNP杀死肿瘤细胞的效率较DOC裸药略强。 (3)黑色素瘤移植瘤小鼠,静脉注射DOCNP和DOC裸药后,相同剂量组比较:DOCNP组小鼠肿瘤生长较裸药组缓慢,两组肿瘤生长速度差异有统计学意义;DOCNP组小鼠体重减轻明显低于DOC组。 (4)黑色素瘤移植瘤小鼠,瘤体内注射DOCNP和DOC裸药后,相同剂量比较:DOCNP组小鼠瘤内注射肿瘤生长较静脉注射缓慢,体重减轻低于静脉注射小鼠。瘤内注射DOCNP组小鼠肿瘤生长明显较瘤内注射DOC组缓慢,两组肿瘤生长速度差异有统计学意义;DOCNP组小鼠体重减轻明显低于DOC组。 (5)姜黄素纳米微粒生理盐水中溶解度明显高于姜黄素裸药,透射电镜、原子力显微镜显示微粒直径100 nm,形态呈表面光滑的圆形。动态光散射仪测定平均微粒电位外壳的普通-7.6mV,低于无PEG外壳的纳米微粒。姜黄素NP的包封率89%,最高载药量达16.3%。 (6)在B16细胞中,姜黄素NP释放曲线明显低于姜黄素裸药的释放曲线,提示姜黄素NP有良好的缓释效果;细胞毒试验提示姜黄素NP杀死肿瘤细胞的效率较姜黄素裸药有增强。 (7)黑色素瘤移植瘤瘤体内注射姜黄素NP和姜黄素裸药后,姜黄素NP组小鼠肿瘤生长明显较姜黄素组缓慢,姜黄素NP组小鼠体重减轻低于姜黄素裸药组,一般情况优于姜黄素组小鼠。 结论: (1)多西紫杉醇载药纳米微粒具有良好的水溶性,有缓释特性;与多西紫杉醇裸药比较体外有略高的杀黑色素瘤细胞效果;载药纳米粒静脉注射较裸药静脉注射有明显增强的抑制肿瘤生长的作用;载药纳米粒瘤内注射较静脉注射有明显增强的抑制肿瘤生长的作用,副作用明显降低;载药纳米粒瘤内注射较裸药瘤内注射有明显增高的抑制肿瘤生长的作用,副作用明显降低。 (2)姜黄素载药纳米微粒具有良好的水溶性;与姜黄素裸药比较体外杀肿瘤细胞效果有增强;瘤内注射抑制肿瘤生长效果较裸药明显增强,副作用明显降低。 (3)两种载药纳米微粒在本研究中都表现出良好的治疗效果和明显减轻的毒副作用,纳米载药研究将为黑色素瘤的治疗提供有力帮助。
【学位授予单位】:南京医科大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2009
【分类号】:R739.5

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【参考文献】
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1 杨祥良,徐辉碧,吴继洲,谢长生;基于纳米技术的中药基础问题研究[J];华中科技大学学报;2000年12期
2 张晓晶;王甦;刘云鹏;侯科佐;王舒宝;;紫杉醇诱导黑色素瘤细胞凋亡的研究[J];中国医科大学学报;2006年02期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 王锐;高峰;何晓雄;;纳米技术在生物医学工程中的应用[J];安徽建筑工业学院学报(自然科学版);2006年05期
2 马应龙;李淑红;;纳米中药研究进展[J];安徽农学通报;2007年09期
3 张继瑜;刘根新;吴培星;李剑勇;董鹏程;周绪正;魏小娟;;纳米药物的研究现状与展望[J];安徽农学通报;2007年18期
4 盛勇;潘年松;张学愈;;阿魏酸哌嗪的超细化探讨[J];成都医学院学报;2009年04期
5 胡晓丽;施中凯;吴晓岩;刘玉凤;胡慧静;;纳米化四君子汤对免疫抑制小鼠肠道菌群的影响[J];成都中医药大学学报;2010年01期
6 全从娟,傅正义,马培燕,苏艳丽;纳米技术在中药开发中的应用[J];材料科学与工程学报;2003年04期
7 邹龙;纳米科技在中药现代制备中的应用[J];中国医师杂志;2003年10期
8 刘根新;张继瑜;吴培星;李剑勇;董鹏程;周绪正;魏小娟;;纳米技术在中药研究中的应用进展[J];动物医学进展;2008年11期
9 张幸开,龚月生;纳米技术在畜禽饲养业中的应用前景[J];饲料工业;2004年07期
10 国秋菊,郑少华,任振,王平;纳米技术与中药[J];中国粉体技术;2005年05期
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1 李伟;张兴祥;;聚乳酸纳/微胶囊技术及其应用[A];第六届功能性纺织品及纳米技术应用研讨会论文集[C];2006年
2 张秀娟;于华;季宇彬;;杨梅树皮素诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡机制的研究[A];2009年中国药学大会暨第九届中国药师周论文集[C];2009年
3 张秀娟;于华;季宇彬;;杨梅树皮素诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡机制的研究[A];2010年中国药学大会暨第十届中国药师周论文集[C];2010年
4 苏艳丽;傅正义;;超微粉碎三七及其显微结构[A];第十届全国青年材料科学技术研讨会论文集(C辑)[C];2005年
5 韩伟;李娆娆;;纳米中药的研究概况[A];中华中医药学会中药炮制分会2008年学术研讨会论文集[C];2008年
6 张景红;李红玉;;雄黄的微生物炮制及其药效、毒性的重新评价[A];中华中医药学会中药炮制分会2008年学术研讨会论文集[C];2008年
7 张景;邱晓莉;秦少容;李宇;;纳米技术在中医药领域的应用[A];第二届全国药用新辅料与中药制剂新技术应用研讨会会议论文汇编[C];2005年
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1 高宁宁;多壁碳纳米管的表面化学修饰调节其免疫毒性的机理研究[D];山东大学;2011年
2 朱振舒;聚乙烯吡咯烷酮纳米药物传输系统研究[D];南京大学;2011年
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4 戴晓晖;生物降解脂肪族聚酯与聚准轮烷及其含糖嵌段共聚物的合成与性能研究[D];上海交通大学;2008年
5 范黎;壳聚糖智能靶向抗肿瘤药物运载系统研究[D];第四军医大学;2011年
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3 ;脉络膜及睫状体的良性黑色素瘤(痣)[J];医学文摘(眼科学);1966年03期
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6 张孝通,吴学愚,常荣先;70例鼻腔、鼻窦恶性黑色素瘤临床分析[J];肿瘤;1990年02期
7 马栋才;张燕;李清芬;;喉恶性黑色素瘤的诊断与治疗[J];河北医药;1991年03期
8 任勇亚,高国亮;原发性结肠恶性黑色素瘤一例[J];山西医药杂志;1993年02期
9 杜向慧;杨关海;;鼻咽原发恶性黑色素瘤1例报告[J];浙江肿瘤;1994年02期
10 高建钢,张瑞明,张丽英,王光;乳腺恶性黑色素瘤一例报告[J];实用肿瘤杂志;1995年03期
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1 邓德权;倪杏艳;车敦发;胡文星;;误诊为甲癣的甲下恶性黑色素瘤1例[A];2010全国中西医结合皮肤性病学术会议论文汇编[C];2010年
2 杜培革;吕刚;田丹;安丽萍;韩笑;徐广宇;杨松;高莉囡;;GHGKHKNK八肽抑制小鼠恶性黑色素瘤B16-F10转移及其机制的实验研究[A];全国第十一届生化与分子药理学学术会议论文集[C];2009年
3 北京快中子治疗协作组;;快中子治疗恶性黑色素瘤初报[A];Fast Neutron Radiation Therapy--Proceedings of CCAST (World Laboratory) Workshop[C];1999年
4 苏立众;徐文娟;陈盈;;鼻腔恶性黑色素瘤诊治分析[A];浙江省抗癌协会头颈肿瘤外科专业委员会成立大会暨第一届学术会议论文汇编[C];2006年
5 许建锋;;睫状体恶性黑色素瘤1例的超声表现[A];中国超声医学工程学会第七届全国眼科超声诊断学术会议论文摘要汇编[C];2009年
6 张英;;32例恶性黑色素瘤的术后护理[A];中华护理学会全国肿瘤护理学术交流暨专题讲座会议论文汇编[C];2009年
7 林国础;邱蔚六;张锡泽;陆昌语;顾基中;周国瑜;;107例口腔颌面部恶性黑色素瘤治疗评估[A];中华口腔医学会成立大会暨第六次全国口腔医学学术会议论文汇编[C];1996年
8 陈腊梅;王宁;廖明俊;张代伦;;恶性黑色素瘤乳腺转移一例[A];第二届全国乳腺影像诊断与技术应用研讨会暨学习班论文汇编[C];2007年
9 罗峻;;鼻侧切开鼻腔鼻窦恶性黑色素瘤术后护理[A];全国眼耳鼻喉科护理学术交流会议论文汇编[C];2011年
10 张佳佳;郭红燕;韩劲松;乔杰;;女性阴道恶性黑色素瘤一例[A];中华医学会第一届全球华人妇产科学术大会暨第三次全国妇产科中青年医师学术会议论文汇编[C];2007年
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1 王伦;应加强恶性黑色素瘤防治[N];科技日报;2007年
2 王亦卫;治疗恶性黑色素瘤[N];科技日报;2006年
3 王伦;国内首家恶性黑色素瘤病区成立[N];科技日报;2006年
4 天津肿瘤医院骨与软组织肿瘤科教授 邢汝维;痣与黑色素瘤易区分[N];健康时报;2007年
5 通讯员 张献怀;304医院治疗晚期恶性黑色素瘤有新法[N];大众科技报;2006年
6 受访专家 北京肿瘤医院肾癌黑色素瘤病区主任 郭军采访者 王伦 刘晨;黑色素瘤早治疗可痊愈[N];健康报;2007年
7 倪方;黑色素瘤早治疗可痊愈(一)[N];医药养生保健报;2008年
8 特约记者 崔玉艳;突然便血小心恶性黑色素瘤作怪[N];卫生与生活报;2007年
9 保健时报特约记者 张献怀;新思路啃掉了黑色素瘤[N];保健时报;2006年
10 张献怀;成功治愈晚期恶性黑色素瘤患者[N];中国消费者报;2006年
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1 张凯;细丝蛋白A调控表皮生长因子受体活化在恶性黑色素瘤发病中的作用[D];河北医科大学;2014年
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9 王玉芳;恶性黑色素瘤细胞凋亡相关基因和蛋白表达谱[D];四川大学;2004年
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1 郑中秋;消化道恶性黑色素瘤6例临床分析并文献复习[D];浙江大学;2010年
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3 王俊凤;细丝蛋白A的表达对恶性黑色素瘤的调节作用[D];吉林大学;2012年
4 李雪飞;足底恶性黑色素瘤的切除与创面修复[D];吉林大学;2012年
5 郭丰霞;原发性女性生殖道恶性黑色素瘤的临床分析[D];山东大学;2012年
6 杜金;皮肤恶性黑色素瘤33例临床分析[D];新疆医科大学;2013年
7 许三雄;乙酰肝素酶与β联蛋白及淋巴样增强因子-1在人肢端恶性黑色素瘤中基因表达的对比研究[D];昆明医科大学;2013年
8 彭巧;纳秒脉冲治疗裸鼠恶性黑色素瘤的疗效观察[D];重庆医科大学;2013年
9 王月;自体CIK细胞联合化疗治疗恶性黑色素瘤的临床观察[D];苏州大学;2012年
10 张晓晶;CD_(44)V_5、Ki-67在皮肤恶性黑色瘤中的表达及其临床意义[D];中国医科大学;2002年
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