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青春期小鼠睾丸SF-1对睾酮生成酶的调节

祝辉  
【摘要】: 睾丸Leydig细胞合成和分泌雄激素,其主要反应途径是:胆固 醇 胆固醇侧链裂解酶(P450scc) 孕烯醇酮 3β-羟甾脱氢酶(3βHSD) 孕酮 17α- 羟化酶(P450c17) 17-羟孕酮 P450c17 雄烯二酮 17-羟甾脱氢酶(17βHSD) 睾 酮。在这一过程中,4种睾酮生成酶的作用非常重要,它们的表达量 直接影响到Leydig细胞的睾酮合成量。在机体中,辜酮生成酶的表达 受到多种因素在多个水平的调节,近年来有研究发现类固醇生成因子 -1(steroidogenic factor 1,SF-1)也可能调节睾酮生成酶的表达, 影响睾酮合成。SF-1属于核受体蛋白,1992年首先由Lala等从牛肾 上腺细胞核提取物及鼠肾上腺细胞核提取物中纯化得到。通过对一些 睾酮生成酶基因的序列分析,发现牛和鼠类P450scc、P450c17基因以 及人Ⅱ型3βHSD基因的5’端转录起始点上游均存在SF-1的结合位点, 诱导这些位点突变导致目的基因转录水平下降,或使得它们对hCG的 反应性下降,提示SF-1可能和这些睾酮生成酶的转录调节有关,影响 睾酮合成。然而,目前只有资料间接显示胚胎期SF-1与睾丸雄激素生 成具有相关性,本研究目的旨在直接阐述青春期SF-1对睾酮生成的调 节作用。 实验共分三个部分进行:第一部分探讨青春期小鼠睾丸组织是 否有SF-1表达以及它与睾酮生成酶的表达是否具有相关性;第二部分 在证实青春期睾丸SF-1与睾酮生成酶表达具有相关性的基础上,进一 步检测SF-1是否在青春期睾丸Leydig细胞有表达,从形态学方面证 实SF-1对睾酮生成的调节作用;第三部分在确定SF-1在青春期Leydig 细胞中表达的基础上,进一步直概研究Leydig细胞中SF-1对睾酮生 成酶表达以及睾酮合成的调节作用。 南京医科大学硕士学位论文 第啼分:青糊小鼠睾丸中SF《与睾酮生成酶InRNA M的相 关性研究 运用半定量盯平CR方法,分别测定了 5天、2 0天和 3 0天。J。鼠睾 丸组织中SF一1及P450scc、P450c17、30HSD、170HSD的mRNA水平, 结果显示:5天小鼠性腺功能仍未成熟;睾丸中肝<:RNA水平毗; 2 0 k,1、鼠开kbil?LN青春期发育,睾丸中辟八 水平驯上升,但 与5天小鼠相大无明显差异(P>0.05),与此同时P450SCC mRNA水平 也升高;3 0天小鼠个步发育成熟,睾丸 SF叶 水平进一步增高, 与 5天,J、鼠相比有显著差异u北.05);k匕时P45肿cc mRNA的水平也 达多高峰,与 5天小鼠相比有显著差异汀刎.05)。提示SF叶与 P45kCC mRNA的水平呈正相关变化。& SF-lmRNA水平与 P450c17、36HSD、 17即SD mRNA水平之间朋相关性。这一结肌分子水平间蝴示了 SF叶与青春期睾酮生成之间的相关性,它可能参与调节P450北c的转 录,影响睾酮的合成。 第二部分:青春期小鼠睾丸中SF<的表达 运用免疫组化的方法,测定了 5天、2 0天和 3 0天,J、鼠睾丸中”< 的表达,结果显示:5天小鼠Leydg细胞属于未成熟型,分泌的雄激 素水平毗,细触中未见SF上表达;20天小鼠进入青春期,30天 小鼠进一步发育成熟,它们的 Leydig细胞驯发育为成熟型,分雌 激素,f则嫡中耶-1大量表达。由此可见,SFl在Lcydig细胞中的 表达与细胞的功能发育及激素生成水平相一致,进一步帅态学方面 证实了 SF<可能参与调节青春期睾酮的生成。同时,实鞭显示:5 天小鼠睾丸曲细精管仍为实。C细胞索,只有A型桶细胞和未成熟型 Sertoli细胞,此时 S咖li细胞中有盯4表达,6 A型精原细胞未见 SF-l表达;20、30 A,J、鼠曲细精管开kb出现管腔,S咖h细胞转化为 成熟型;SFq表达消失。生精细胞同时帐育分化,开始出现B型精 原细胞、初级精母细胞、次级精母细胞、精子细胞等各级生精细胞, SF 4在B型舶细帆细线期、偶线期、粗线期初级精母细B咙中表 达。这一结果揭示了 SF叶在精子发生腑中顺的作用,尤其在 B 2 南京医科大学硕士学位论文 型舶细胞向初级精母细胞洲以及初蝴母细胞的第一次成熟分裂 隙中起重抓用,它可能对一些与精子发生相关的基固姊调节作 用。 第三部分:青釉小鼠睾丸中的叶对N 5 os CC及 3耶D的调节 作用 分离青春期小鼠睾丸 LCydig细胞,槽以体内环境,建立体外培养 细胞的方法,在培养眯中加入 hCG刺激,测定细胞的睾酮分泌量及 细胞内 P45帖CC和36HSD mRNA水平。结果显示:在LH/hG作用 下,培养的 Leydig细胞内 P450scc和 VI型邓HSD mRNA表棚加, 促进睾酮合成,这一结果与体内情况相符合。 在此实验基础上,将SF+的反义躺替酸转染进入培养的Leydig 细胞,阻断SF<蛋白质的表达,测定细胞的睾酮分泌量及细胞内 P450SCC和30HSDtnRN水平。结果显示:反义SF4+hCG作用组的 睾酮含量与空白组相比无显著差异,却明显低于正义SF地CG组及 hCG作用组,提示比G对睾SNob&.的刺邮用翩于辟l的存在,


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13 王燕蓉,周亚东,沙家豪;枸杞多糖对体外培养小鼠睾丸组织形态学影响的研究[J];中华男科学;1997年02期
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