收藏本站
《南京医科大学》 2004年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

失敏态脑N受体药理学特征的研究

孙秀兰  
【摘要】:第一部分 失敏态脑N受体药理学特征 N受体失敏是指胆碱能N受体在激动剂的反复或长期刺激下对激动剂的反应降低或丧失。传统观点认为,失敏态N受体是一种无功能状态。但是,本研究室的前期工作表明失敏态N受体只是不再介导N样反应,并非处于无功能状态,而是具有特定的生物学作用。基于脑科学研究的神经网络学观点,本文从基因表达、蛋白质功能及整体行为学表现等不同层次探讨了N受体失敏对脑功能的影响,为进一步了解失敏态脑N受体的药理学特征,分析失敏态脑N受体在烟碱耐受和成瘾中的重要作用提供了一定的实验依据。 一.N受体失敏时脑内神经生物学相关基因表达谱的变化 大鼠予以1.2mg/kg剂量的烟碱皮下注射,每天两次,连续用药两周后取全脑,提取总RNA,逆转录合成cDNA,体外转录合成生物素化RNA,并将其片断化后与芯片杂交,对荧光强度进行扫描分析,并用RT-PCR方法验证芯片分析结果。实验结果显示反复摄入烟碱诱导N受体慢性失敏时,脑内共有224个基因表达发生变化。其中,有94个蛋白激酶、膜受体和离子通道相关的基因表达发生改变。在蛋白激酶中,丝裂原激活的蛋白激酶等13种上调,三磷酸肌醇等6种激酶表达下调;在膜受体中,N-甲基-天门冬氨酸受体等9种表达上调,谷氨酸受体D等14种表达下调;钾、钠和钙通道的基因表达均发生变化:电压依赖性K~+通道中外向整流型K~+通道和Ca~(2+)激活的K~+通道表达下调,而Kv2.3r等电压依赖性K~+通道表达上调;电压依赖性Na~+通道的β_2亚基表达增加,而α和β_1亚基基因表达减少;电压依赖性Ca~(2+)通道的β_3亚基基因表达增加。反复给予烟碱诱导N受体失敏时,脑内膜受体基因、信号转导相关基因和离子通道基因的表达水平发生的上述变化可能与烟碱耐受和成瘾密切相关。 南京医科大学博士学位论文 二.烟碱诱导N受体失敏对脑内蛋白激酶A和C功能的影响 在烟碱诱导大鼠脑N受体分别处于激动态、亚急性失敏、急性失敏 和慢性失敏态时,取大鼠全脑匀浆。分别加入PKA特异性生物素化底物 Kemptide和PKe特异性生物素化底物决uro脚nine,用’ZP掺入底物法 测定脑内蛋白激酶A和C的活性。同时,结合基因芯片实验分析慢性失 敏时PKA和PKC相关基因表达的变化。研究结果显示:N受体激动状 态下对PKA和PKC的活性没有影响;N受体处于亚急性失敏、急性和 l漫性失敏状态时,使PKA和PKC的活性降低。基因芯片研究结果显示二 慢性失敏时,PKCIn基因表达增加,而PKC中a、Y、花等亚基的基因 表达没有变化;cAN[P反应元素结合蛋白、cANIP反应元素调节因子、 cAMP磷脂酶、cAN于依赖性蛋白激酶H等6种基因表达也无明显改变。 实验结果提示:烟碱作用使N受体失敏时,可降了却亩内PKA和PKC 的活性,使脑内信号转导通路发生适应性改变,这些变化是烟碱成瘾的 重要的生化基础。 三.失敏态脑N受体对其它递质受体功能的调节 在N受体失敏的小鼠及大鼠动物模型上,以小鼠的自主活动、延缓 的非匹配位置作业中大鼠选择游泳的正确率及时间为检测指标,观察N 受体失敏对多巴胺受体、a:肾上腺素受体、5一HT IA受体、阿片受体、 GABA受体以及M受体功能的影响。研究结果显示:N受体失敏增强 阿扑吗啡对小鼠自主活动的调节作用;减弱可乐定、8一OH一DPAT和安定 对小鼠自主活动的的抑制作用;但不影响吗啡对小鼠自主活动的调节。 在安定致学习记,忆损伤的动物模型上,N受体失敏可改善大鼠的学习记 忆能力;而在阿托品致学习记,忆损伤的动物模型上,N受体失敏对大鼠 的学习记J忆能力没有明显影响。上述实验结果表明:N受体失敏时,影 响脑内多种递质受体的功能,同样提示脑N受体失敏可以调节神经网络 系统的功能。 南京医科大学博士学位论文 第二部分神经性N受体介导的神经元保护作用及其机制的研究 以高浓度谷氛酸(smmol.L一l)诱导PC12细胞产生兴奋性毒性为实 验模型,通过M竹试验、共聚焦显微镜、RT一PCR以及免疫细胞化学等 技术,观察烟碱诱导N受体失敏时对谷氨酸诱导PC12细胞损伤的保护 作用和N受体拮抗剂美加明对烟碱作用的影响,并进一步研究N受体失 敏对月包内钙离子浓度以及对凋亡相关因子bc}一2和bax基因及蛋白表达的 调节,以探讨神经性N受体产生细胞保护作用的可能途径。 研究结果显示10 nmol.L一’一1.0~ol.L一’浓度范围内烟碱能对抗谷氨 酸造成的兴奋性毒性,该保护作用可被美加明(1尽mol.L’)所阻断,提 示N受体介导烟碱的保护作用。烟碱预孵育24h可增加对谷氨酸引起的 钙超载的缓冲作用,上调bel一21宜RNA和蛋白的表达,下调bax及其蛋 白的表达。上述这些调节作用与神经性N受体介导的细胞保护作用有关。
【学位授予单位】:南京医科大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2004
【分类号】:R96

手机知网App
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 肖雁;吴昌学;官志忠;;血管性痴呆大鼠海马神经型胆碱能受体的变化[J];临床神经病学杂志;2009年06期
2 王越,刘跃,王怀经,汪海;M受体在烟碱提高大鼠空间工作记忆中的作用[J];神经解剖学杂志;2005年02期
3 陈宇;桑韩飞;马丽;霍婷婷;熊利泽;;尼古丁对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的神经保护作用[J];神经解剖学杂志;2010年05期
4 王浩然,高祥荣,张开镐,韩济生;药物成瘾及成瘾记忆的研究现状[J];生理科学进展;2003年03期
5 孙秀兰,胡刚,汪海;失敏态烟碱样受体[J];中国药理学通报;2003年12期
6 孙秀兰,刘跃,胡刚,汪海;烟碱对脑内膜受体及信号转导系统基因表达的调节作用[J];中国药理学通报;2004年02期
7 王超;张志国;贾晓旭;倪君贤;康立源;;自发性高血压大鼠脑损伤研究概况[J];中国药理学通报;2009年10期
8 孙秀兰,刘跃,胡刚,汪海;烟碱对大鼠脑内蛋白激酶A和C活性的影响[J];中国临床药理学与治疗学;2004年01期
9 何进,邓春玉,陈汝筑,朱小南,余剑平;烟碱诱导的海马脑片CA_1区长时程增强呈钙离子依赖性(英文)[J];Acta Pharmacologica Sinica;2000年05期
10 ;Neuronal nicotinic acetylcholine receptors serve as sensitive targets that mediate β-amyloid neurotoxicity[J];Acta Pharmacologica Sinica;2006年10期
中国博士学位论文全文数据库 前6条
1 卢家红;α7nAChR的克隆、表达及在Alzheimer病发病机制中作用的研究[D];复旦大学;2003年
2 杨闯;α_4β_2烟碱受体竞争性拮抗剂对注意缺陷多动障碍模型-SHR大鼠非选择性注意、记忆、行为及α_4β_2烟碱受体表达影响的对照研究[D];四川大学;2005年
3 郭田友;ABT-418和哌醋甲酯对ADHD动物模型SHR大鼠运动、空间学习、焦虑、非选择注意及α_4β_2烟碱受体表达影响的对照研究[D];四川大学;2005年
4 汪惠丽;儿童血铅水平与ADHD关系及药物防治铅中毒的实验研究[D];中国科学技术大学;2006年
5 温晓明;淋巴细胞非神经性胆碱能受体药理学特征的研究[D];中国协和医科大学;2006年
6 李琪;尼古丁在吸烟导致气道慢性炎症中的独特效应[D];重庆医科大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 王昊飞;α7胆碱能受体激动剂DMXB对Aβ损伤认知功能的影响及其分子机制[D];南京医科大学;2009年
2 赵璞;帕瑞昔布钠对老年关节置换术患者术后认知功能的影响[D];郑州大学;2010年
3 陈宇;内源性大麻素系统参与尼古丁预处理对局灶性脑缺血损伤的神经保护效应[D];第四军医大学;2010年
4 王丽波;通脉益智丹治疗血管性痴呆大鼠的实验研究[D];辽宁中医学院;2003年
5 李永军;慢性脑缺血大鼠认知障碍与甲状腺激素系统关系[D];第一军医大学;2004年
6 潘超;人乙型淀粉样蛋白(hAbeta)的基因克隆、原核高效表达及分离纯化[D];安徽师范大学;2006年
7 韩芙蓉;失敏态脑N受体与帕金森氏病关系的研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2007年
8 左佳佳;甲苯亚慢性吸入成瘾的实验研究[D];安徽医科大学;2008年
9 张磊;可卡因诱导神经元树突重塑的分子机制研究[D];南方医科大学;2009年
10 陈小荣;胆碱能系统功能障碍对大鼠空间学习记忆和海马自发放电活动的影响及其机制研究[D];山西医科大学;2010年
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 汪海,崔文玉,刘传缋;在离体豚鼠回肠上失敏N受体对M受体的调节[J];中国应用生理学杂志;1992年01期
2 万勤,罗质璞,汪海;N和M胆碱能受体之间的相互调节[J];中国药理学通报;2003年01期
3 孙秀兰,刘跃,胡刚,汪海;烟碱对大鼠脑内蛋白激酶A和C活性的影响[J];中国临床药理学与治疗学;2004年01期
4 汪海,龙超良;N受体拮抗效应在胆碱酯酶抑制剂中毒防治中的作用[J];中华急诊医学杂志;2004年10期
5 孙秀兰,刘跃,胡刚,汪海;烟碱对脑内膜受体及信号转导系统基因表达的调节作用[J];中国药理学通报;2004年02期
6 孙秀兰,刘跃,胡刚,汪海;烟碱对脑钾、钠和钙通道表达的调节作用[J];中国应用生理学杂志;2004年04期
7 鲁涛,杨雄里;AMPA受体失敏和快速兴奋性突触传递[J];生理科学进展;1997年03期
8 杨东仁;膜受体失敏的生化机制[J];国外医学.卫生学分册;1998年01期
9 罗王倩;崔文玉;汪海;;神经元N受体α_4β_2、α_4β_4和α_7亚型在激动剂作用下功能失敏的特征[J];中国药理学通报;2009年03期
10 罗王倩;崔文玉;汪海;;神经元N受体α4β2亚型在激动剂作用下功能失敏后再激活及宾赛克嗪的拮抗作用[J];中国临床药理学与治疗学;2008年10期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 金旻;戚华兵;黄炜;王小凤;陈林;;基因芯片研究结合FGFR3的核心短肽对小鼠前软骨细胞的作用[A];中华医学会第六次全国骨质疏松和骨矿盐疾病学术会议暨中华医学会骨质疏松和骨矿盐疾病分会成立十周年论文汇编[C];2011年
2 刘全海;;基因芯片和新药研制[A];中国药理学会第九届制药工业药理学术会议论文摘要汇编[C];2000年
3 王文勇;黄晓峰;闫庆国;王伯澐;;激光捕获显微切割技术应用研究新进展[A];中华医学会病理学分会2009年学术年会论文汇编[C];2009年
4 裴军;;用基因芯片寻找差异表达基因[A];中国生物工程学会第三次全国会员代表大会暨学术讨论会论文摘要集[C];2001年
5 赖沛龙;杜欣;翁建宇;凌伟;吴穗晶;罗成伟;郭荣;陆泽生;;应用基因芯片筛选硬皮病样慢性移植物抗宿主病相关基因的初步研究[A];第13届全国实验血液学会议论文摘要[C];2011年
6 孙啸;谢建明;陆祖宏;;高密度基因芯片设计和信息分析[A];第九次全国生物物理大会学术会议论文摘要集[C];2002年
7 贾坤;罗长保;鱼海琼;赵吟;谢凯英;林志雄;李守军;;牛分支杆菌与结核分枝杆菌基因芯片检测探针的筛选[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会论文集(下册)[C];2009年
8 李轶博;于明;;相位保留小波去噪法及其在基因芯片图像中的应用[A];现代通信理论与信号处理进展——2003年通信理论与信号处理年会论文集[C];2003年
9 裴军;;基因芯片在毒理基因组学研究中的应用[A];中国毒理学会第三届全国学术会议论文(摘要)集[C];2001年
10 李红丽;杨忠;蔡文琴;Lawrence;李泽桂;;基因芯片筛选维甲酸(RA)诱导神经管缺陷相关基因的研究[A];解剖学杂志——中国解剖学会2002年年会文摘汇编[C];2002年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 记者 季明 徐寿松;基因芯片亮相上海[N];新华每日电讯;2002年
2 记者 刘熙;省一院基因芯片诊断技术获卫生部认证[N];云南日报;2010年
3 周向东;基因芯片:神奇的医生[N];中国医药报;2001年
4 林海慧;共建全国最大基因芯片基地[N];证券时报;2000年
5 南方日报记者 陈枫 通讯员 宋忠雷 彭文斌;省二医应急大楼:全省首家“移动医院” 省妇幼番禺新院:有了地贫基因芯片[N];南方日报;2011年
6 记者 季洪光;基因芯片可望大规模临床应用[N];科技日报;2003年
7 吕建强;深圳积极创新基因芯片检测方法[N];中国食品报;2010年
8 《金周刊》记者 朱杰;基因芯片:窥见巨额利润[N];中国经营报;2001年
9 ;基因芯片——新世纪医学的“宠儿”[N];市场报;2001年
10 记者 郑晓强 通讯员 陈海峰;全国首个遗传病基因芯片开放式检测平台在厦建成[N];福建日报;2009年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 孙秀兰;失敏态脑N受体药理学特征的研究[D];南京医科大学;2004年
2 杨林;猪瘟病毒基因芯片诊断技术的研究及应用[D];中国农业大学;2005年
3 刘雪强;乌头碱逆转耐药性人口腔上皮鳞状癌细胞分子机制研究[D];北京中医药大学;2005年
4 周盛年;电刺激大鼠癫痫模型及基因芯片检测谷胱苷肽-巯-转移酶基因的表达[D];山东大学;2004年
5 许明火;表皮参与瘢痕形成的实验和临床研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2006年
6 王珍祥;增生性瘢痕的基因芯片分析及意义[D];第三军医大学;2002年
7 祁震宇;人脑胶质瘤中二条差异表达基因的研究[D];苏州大学;2003年
8 刘学端;海底及污染环境中微生物群落分子多样性研究[D];湖南农业大学;2003年
9 孙波;基因芯片技术在子痫前期外周血白细胞差异表达基因研究中的初步应用[D];吉林大学;2006年
10 祁小飞;骨髓增生异常综合征患者的基因表达谱研究[D];苏州大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 殷晓峰;失敏态脑N受体α_7亚型对M受体功能的调节作用[D];南京医科大学;2004年
2 韩芙蓉;失敏态脑N受体与帕金森氏病关系的研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2007年
3 胡明;人退变椎间盘基因表达谱的研究[D];第二军医大学;2004年
4 王玉鹏;基于基因芯片的基因表达模式分析[D];厦门大学;2007年
5 戴奇刚;鼻咽癌转移相关基因表达谱的研究[D];广西医科大学;2008年
6 朱利娜;酵母基因芯片的制备及其在热休克基因表达谱研究中的应用[D];第一军医大学;2002年
7 江远;基因芯片技术研究莪术不同成分对HSC-T6细胞基因表达的影响[D];湖北中医学院;2004年
8 陈喜林;淋巴瘤寡核苷酸芯片的制备及其在淋巴瘤细胞系基因表达谱研究中的应用[D];中国人民解放军军事医学科学院;2003年
9 宋光辉;应用基因芯片研究同型半胱氨酸对ECV-304细胞基因谱表达的影响[D];郑州大学;2004年
10 沈征;2型糖尿病大鼠建模、基因表达谱与细胞凋亡研究[D];浙江大学;2004年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026