人睾丸特异转录本基因（PRC-T）的克隆和研究

【摘要】：睾丸的精子发生是一个独特复杂的细胞分裂分化过程。睾丸生精小管中的生精细胞先后经过三个阶段的变化：精原细胞的增殖，精母细胞的减数分裂和精子细胞的变态过程，最终产生成熟的精子。许多在睾丸中特异或高度表达的基因参与这一过程。 克隆睾丸精子发生相关基因并研究其功能，对于揭示精子发生过程中减数分裂和变态的分子机制，对于临床男性不育的诊断和治疗以及男性分子节育等均具有重要的意义。 为了克隆组织中表达的新基因，许多基于基因差异显示的方法，如抑制性差减杂交(SSH)，差异显示逆转录PCR(DDRT-PCR)和cDNAmicroarray杂交技术等已得到了应用和改进。与传统的杂交法相比，cDNAmicroarray有大规模、高通量、结果客观性强等优点。 本室运用人睾丸cDNA microarray，比较了人胚胎期睾丸和成年期睾丸的基因表达差异，克隆了一个新的睾丸特异的转录本基因，编码蛋白酶体RP亚基的一个亚单位，命名为PRC-T。 PRC-T cDNA全长1316bp，包含一个1056 bp的开放阅读框，编码351个氨基酸，该序列已输入GenBank，接收号为AY359879。基因组比对显示，PRC-T基因定位于3p21，跨越了染色体上13427个碱基，由8个外显子构成，序列分析显示该基因是p44S10基因家族的一条新的转录本基因。推测的蛋白质序列包括‘RPN7’和‘PCI’结构域，参与降解泛素化的蛋白。系统发育学分析显示，该基因在进化中高度保守。实验证实，PRC-T基因特异地高表 南京医科大学硕士学位论文 达于人争丸组织以及成熟精子。 综上，朋c--厂是p44s10家族中迄今发现的唯一的争丸特异的转录本。 推测该基因编码生殖细胞特异的蛋白酶体调控元件的亚单位，可能与精子 发生和精子生理功能潜在相关。有关朋C--厂基因的确切功能有待进一步研 究。

【学位授予单位】：南京医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2004
【分类号】：R321