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《南京医科大学》 2007年
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金雀异黄素对高糖诱导的人视网膜色素上皮细胞的保护作用

帅捷  
【摘要】: 糖尿病性视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)是糖尿病微血管最重要的病变之一,是一种具有特异性改变的眼底病变,已经成为糖尿病患者致盲的首位原因。研究表明视网膜病变与自由基介导的氧化损伤有关。氧化应激反应可调节细胞的生理功能和生化反应,在细胞增殖分化过程中发挥重要作用,并可导致细胞凋亡,促进新生血管形成。人视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelium,RPE)处于富含血管的脉络膜和视网膜神经上皮层之间,是视网膜重要的营养、维护、代谢组织,视网膜色素上皮细胞的特殊位置和功能使其易受氧化攻击,造成氧化损伤,从而导致多种视网膜病变。 金雀异黄素(Genistein,Gen)是大豆及大豆蛋白中所含的多酚类混合物,在预防乳腺癌、前列腺癌、心脑血管等疾病中起到重要作用。以往的研究中,金雀异黄素作用机制主要集中在抑制酪氨酸激酶,调控DNA拓扑异构酶及发挥雌激素的作用。近年来发现金雀异黄素还是一种理想的抗氧化剂,具有加速脂质清除、抑制自由基的产生,清除、熄灭自由基的作用,且其药物毒性小,可能成为新的治疗糖尿病性视网膜病变的方法。在此,我们主要观察高糖对RPE细胞增殖的影响,以及Genistein对高糖诱导的RPE细胞的保护作用,并初步探讨了Genistein对高糖诱导的RPE细胞的保护作用的机制。 我们体外培养人RPE细胞,分别以Gen0、50、100、200umol/L的药物浓度作用高糖(33mmol/L)培养的RPE细胞48h,倒置显微镜下观察细胞形态;噻唑蓝比(methylthiazolyltetrazolium,MTT)检测细胞活性;流式细胞仪检测细胞周期;激光共聚焦显微镜检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;黄嘌呤氧化酶法测定细胞内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性。 结果表明:与对照组与对照组相比,应用含33mmol/L葡萄糖的DMEM培养基处理RPE细胞48h可见细胞胞体变薄,形态表现多样,不规则细胞增多;高糖可以抑制RPE细胞增殖,高糖培养的RPE细胞内活性氧(ROS)产生明显增多,超氧化物歧化酶活力(SOD)降低,加入金雀异黄素预处理后,可抑制细胞增殖的作用减弱,降低细胞内活性氧(ROS)的表达,增加细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性,各指标差异有显著性(P<0.01),且金雀异黄素的作用呈剂量依赖性。 通过以上研究,我们得出下列结论: 1.高糖抑制RPE细胞的增殖,Genistein减弱高糖对细胞增殖的抑制作用。 2.Genistein主要通过降低细胞内活性氧的表达,增加细胞内超氧化物歧化酶活性的途径发挥对RPE细胞的保护作用
【学位授予单位】:南京医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:R774.1;R587.1

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