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《南京中医药大学》 2013年
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基于糖基化终末产物分析生地—山茱萸特征成分保护糖尿病血管病变的作用机制

吴佳蕾  
【摘要】:目的: 选择最适AGEs浓度及最佳刺激时间,建立AGEs致HUVEC损伤模型。观察生地特征成分梓醇、水苏糖、毛蕊花糖苷,山茱萸特征成分马钱苷、莫诺苷、齐墩果酸、熊果酸对AGEs损伤HUVEC的保护作用,并分析其作用机制。观察糖基化终产物AGEs的主要成分之一CML的致HUVEC损伤作用,探索其是否可替代AGES;同时采用生地中特征成分梓醇、水苏糖、毛蕊花糖苷和山茱萸中特征成分马钱苷、莫诺苷、齐墩果酸、熊果酸进行干预,观察其对CML损伤HUVEC的保护作用。 方法: 体外培养HUVEC,用不同浓度(50、100、200、400mg/L)的AGEs刺激24、48h,并设空白对照组、0-BSA (400mg/L)组作为对照,MTT法于490nm处测定OD值。同样培养HUVEC,24h后取细胞上清液,检测细胞上清液中LDH、SOD、MDA、NO的变化。 体外培养HUVEC,加入生地、山茱萸特征成分梓醇、水苏糖、毛蕊花糖苷、马钱苷、莫诺苷、齐墩果酸、熊果酸(终浓度分别为0.05、0.1、0.5、1、5、10μmol/L)及阳性对照物氨基胍,预孵1h后,加入终浓度为200mg/L的的AGEs,24h后,MTT法于490nm处检测OD值。选择加入特征成分(终浓度分别为1、10、100μmol/L)及氨基胍预孵1h后,加入终浓度为200mg/L的的AGEs,24h后取细胞培养上清液,检测ROS、LDH、SOD、 MDA、NO、ET、AngⅡ、TGF-β、IL-1β等含量。 体外培养HUVEC,用不同浓度(50、100、200、400mg/L)的CML刺激24、48h;同时设空白组、赖氨酸组(400mg/L)组作为对照,MTT法于490nm处检测OD值。细胞培养24h后取细胞培养上清液,检测细胞上清液中LDH、SOD、MDA、NO的变化。加入阳性对照物氨基胍及各成分(终浓度分别为0.05、0.1、0.5、1、5、10μmol/L)预孵1h后,加入终浓度为200mg/L的的CML,在培养箱内孵育24后,MTT法于490nm处检测OD值。 结果: AGEs浓度在50mg/L时,对细胞增殖无明显作用,但在100、200、400mg/L时,对细胞增殖具有抑制作用,与空白对照组比较具有显著性差异(P0.01)。AGEs四个浓度(50、100、200、400mg/L)对内皮细胞产生的LDH、MDA均有升高作用,对SOD、NO都有减少作用,与空白对照组比较具有显著性差异(P0.01)。 生地、山茱萸特征成分对AGEs损伤HUVEC的增殖抑制均有一定的保护作用。梓醇、水苏糖、马钱苷在终浓度1、5、10μmol/L时,毛蕊花糖苷、齐墩果酸、熊果酸在终浓度0.5、1、5、10μmol/L时,对AGEs损伤HUVEC具有显著的增殖保护作用(p0.05,p0.01)。IC25分别为:氨基胍30.56μmol/L、梓醇3.59μmol/L、水苏糖4.69μmol/L、毛蕊花糖苷17.46μmol/L、马钱苷1.38μmol/L、莫诺苷1.32μmol/L、齐墩果酸1.60μmol/L、熊果酸1.15μmol/L。模型组细胞上清液中SOD、NO活性降低(p0.05,p0.01),MDA、ET、AngⅡ、TGF-β、IL-1β、ROS含量增加(p0.05,p0.01);而生地山茱萸特征成分可不同程度的提高SOD活性、增加NO水平,降低MDA、ET、AngⅡ、TGF-β、IL-1β、ROS水平,与模型组比较有显著性差异(p0.05,p0.01)。 CML浓度在50mg/L时,对细胞增殖无明显作用,而在100、200、400mg/L时,对细胞增殖具有抑制作用,与空白对照组比较具有显著性差异(p0.01)。CML浓度为400mg/L时,对内皮细胞产生的LDH、MDA有增多的作用,对SOD都有减少的作用,与空白组比较具有显著性差异(p0.05,p0.01)。CML对NO无明显作用。生地山茱萸特征成分对CML损伤HUVEC的增殖均有一定的保护作用。梓醇、水苏糖在终浓度5、10μmol/L时,毛蕊花糖苷、莫诺苷、齐墩果酸在终浓度1、5、10μmol/L时,熊果酸在终浓度0.5、1、5、10μmol/L时,马钱苷在终浓度0.1、0.5、1、5、10μmol/L时,对CML损伤HUVEC具有显著的增殖保护作用(p0.05,p0.01)。 结论: 不同浓度AGEs对HUVEC均有一定程度的损伤作用,AGEs浓度越高,损伤越明显。根据AGEs对HUVEC增殖作用的量效、时效关系,并参考其细胞增值抑制率,确定终浓度200mg/L的AGEs刺激24h为合适的细胞刺激条件。 生地、山茱萸特征成分对AGEs损伤内皮细胞的保护作用随着浓度的增加而增强。在细胞增殖方面,山茱萸中特征成分马钱苷、莫诺苷、齐墩果酸、熊果酸作用较强,其次是生地中的梓醇、水苏糖;在抗细胞损伤方面,生地中特征成分水苏糖、毛蕊花糖苷、梓醇作用较强,其次是山茱萸中的马钱苷、莫诺苷;在抗氧化应激方面,山茱萸中特征成分莫诺苷、马钱苷、齐墩果酸、熊果酸作用较强,其次是生地中的毛蕊花糖苷、梓醇;在调节细胞分泌及功能方面,山茱萸中特征成分莫诺苷、马钱苷、齐墩果酸、熊果酸作用较强,其次是生地中的梓醇、毛蕊花糖苷;在抗细胞粘连方面,生地中特征成分梓醇、毛蕊花糖苷、水苏糖作用较强,其次是山茱萸中的熊果酸、马钱苷;在抗炎方面,生地中特征成分毛蕊花糖苷作用较强,其次是山茱萸中的马钱苷、莫诺苷。表明生地、山茱萸特征成分在对AGEs损伤HUVEC的保护作用存在一定的差异性,这可能与其在保护糖尿病血管病变方面的作用机制不同有关。 不同浓度CML对HUVEC均有一定程度的损伤作用,CML浓度越高,损伤越明显。CML损伤HUVEC所需刺激浓度较高,且对细胞功能及氧化的的部分方面无明显作用,因此推测,在糖尿病血管病变中损伤作用并不是由糖基化终产物中CML所引起,而是各种不同成分共同作用的结果。生地、山茱萸各特征成分对CML损伤HUVEC的增殖有显著的保护作用。
【学位授予单位】:南京中医药大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2013
【分类号】:R285

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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 于淼;王晓先;贾琳;;山茱萸的药理作用研究进展[J];东南国防医药;2010年03期
2 陈小瑞,申竹芳;非酶糖基化终末产物与糖尿病肾脏并发症[J];中国临床药理学杂志;2003年03期
3 王江雁;糖尿病性白内障患者晶体中SOD和过氧化氢酶活性测定[J];国外医学(临床生物化学与检验学分册);2003年01期
4 曹岗;邵玉蓝;张云;丛晓东;蔡宝昌;;山茱萸中马钱子苷的研究进展[J];现代药物与临床;2009年05期
5 尹永红,赵久阳,吕申;糖尿病肾病中TGF-β的作用[J];国外医学.泌尿系统分册;2005年05期
6 杨新河;吕帮玉;毛清黎;;熊果酸的药理研究进展[J];贵阳中医学院学报;2006年06期
7 胡华杰;;齐墩果酸药理作用与临床应用研究进展[J];海峡药学;2012年03期
8 李震霄;邹洪梅;孟晓萍;;氧化应激促进动脉粥样硬化机制研究进展[J];中国动脉硬化杂志;2009年08期
9 杨敏;;中药药对治疗糖尿病肾病临证撷菁[J];辽宁中医杂志;2006年04期
10 张兴朋;陈美娟;;糖尿病血管病变机制探讨[J];四川生理科学杂志;2008年04期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 张健全;张文成;刘玲;郑仁娟;张海涛;王武;;齐墩果酸在超临界CO_2中的溶解度研究[J];安徽化工;2009年06期
2 郎笑梅,董学锋,樊敏,赵湘,戚世伟,周永列;高血压病患者血小板活化分子的变化及意义[J];中医药临床杂志;2004年02期
3 胡春平;杨伟;蔡以生;;石楠叶合剂治疗血管神经性头痛50例[J];中医药临床杂志;2010年12期
4 屈晓清;伊芳;聂云;李晋丽;张跃文;丁之恩;;RP-HPLC法同时测定宣木瓜中2种三萜酸及其比例[J];安徽林业科技;2011年01期
5 成晓霞;孙蓉蓉;欧阳浩楠;肖娅萍;;三叶木通中常春藤皂苷的提取工艺[J];安徽农业科学;2008年16期
6 蒋盛岩;陈立德;赵良忠;余有贵;;夏枯草种子发芽试验[J];安徽农业科学;2008年18期
7 周春娥;路淑霞;周延清;谷凤平;;怀地黄的研究概况[J];安徽农业科学;2008年32期
8 刘素君;周泽斌;唐梅;;正交试验法提取肉果秤锤树叶中熊果酸的工艺研究[J];安徽农业科学;2009年25期
9 杨胜丹;王蓉;付大友;郭金全;谭文渊;;微波辅助萃取-HPLC/MS测定川木通中齐墩果酸的含量[J];安徽农业科学;2010年13期
10 李宏杨;刘飞;张凤琴;李小龙;刘国民;;冬青科苦丁茶中熊果酸和齐墩果酸含量的测定[J];安徽农业科学;2010年14期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 李国贤;鄢毅;;多病同治——血栓病的诊治进展[A];江西省第八次中西医结合活血化瘀学术研讨会暨心脑血管病培训班论文集[C];2009年
2 何睦;姚卫峰;张丽;丁安伟;;RP-HPLC法同时测定二至丸中多种成分[A];中华中医药学会中药炮制分会2011年学术年会论文集[C];2011年
3 蒋德玉;王燕;邱有贤;周婷;郑小美;;髋关节置换术后预防下肢深静脉血栓形成的护理[A];2006年贵州省医学会骨科学分会学术年会论文汇编[C];2006年
4 周晓菊;王淑琴;;骨科术后下肢深静脉血栓形成的危险因素及干预对策[A];宁夏医学会骨科学分会第三届学术会议论文汇编[C];2005年
5 张晓喻;张宏;黄春萍;陶宗娅;崔盛;黄洪;;枇杷花的调查和研究进展[A];第九届全国中药和天然药物学术研讨会大会报告及论文集[C];2007年
6 董玉秀;邓向涛;;连钱草中熊果酸与齐墩果酸测定方法研究[A];第十届全国中药和天然药物学术研讨会论文集[C];2009年
7 张玮;单安山;石莉莎;张瑞霜;;女贞子粉对蛋鸡生产性能及免疫力的影响[A];中国家禽科学研究进展——第十四次全国家禽科学学术讨论会论文集[C];2009年
8 陈随清;杨晋;王利丽;黄显章;冀春茹;;山茱萸果实成熟前后化学成分的含量变化[A];第二届中国甘草学术研讨会暨第二届新疆植物资源开发、利用与保护学术研讨会论文摘要集[C];2004年
9 张文力;李经才;;褪黑素及中药复方抗雄性鼠前列腺增生作用的研究[A];2006全国时间生物医学学术会议论文集[C];2006年
10 王晓凤;;人工膝、髋关节置换术后预防下肢深静脉血栓形成的整体护理[A];第二届第二次中医护理学术交流会议论文汇编[C];2007年
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1 吴勇;Pyridoxine对血小板源性一氧化氮生物合成的影响及其作用机制的研究[D];南京医科大学;2010年
2 刘雨晴;黄荆杀虫活性成分的分离与鉴定及其对棉蚜和菜青虫的生物效应[D];山东农业大学;2010年
3 彭维兵;四种新型18β-甘草次酸和齐墩果酸修饰物成药性的初步评价[D];中国海洋大学;2010年
4 韩景辉;鳖甲煎丸对糖尿病合并动脉粥样硬化大鼠作用的实验研究[D];黑龙江中医药大学;2010年
5 曲苗;围绝经期综合征的中医理论与临床研究[D];黑龙江中医药大学;2010年
6 黄吉峰;肾白宁对糖尿病肾病大鼠模型CTGF mRNA及肾组织细胞凋亡影响的实验研究[D];黑龙江中医药大学;2010年
7 李艺;小檗碱的生物代谢反应及代谢产物活性的研究[D];北京协和医学院;2010年
8 李小利;葡萄子原花青素B2抗内皮细胞糖基化损伤的作用机制研究[D];山东大学;2010年
9 古锐;藏药蒂达品种整理和椭圆叶花锚品质研究[D];成都中医药大学;2010年
10 陈敏;参芪复方调控GK大鼠大血管病变炎症状态及血管内皮凋亡的实验研究[D];成都中医药大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 许仄平;齐墩果酸预处理对大鼠肝脏缺血再灌注时糖原含量的影响[D];南京医科大学;2009年
2 张杰;大鼠肝脏缺血再灌注损伤时齐墩果酸对氧自由基的影响[D];南京医科大学;2009年
3 华福洲;齐墩果酸预处理对大鼠肝脏缺血再灌注损伤中PI3K-AKT-GSK-3β信号传导通路的影响[D];南京医科大学;2010年
4 盛侠;宣木瓜中齐墩果酸的提取分离及其抗氧化作用的研究[D];安徽农业大学;2010年
5 张桂敏;宣木瓜果实中主要生理活性物质提取分离研究[D];安徽农业大学;2010年
6 赵德千;齐墩果酸和甘草次酸衍生物的合成与表征及其抗菌和抗癌活性的研究[D];辽宁师范大学;2010年
7 刘劲松;怡肾汤对腺嘌呤致肾衰大鼠肾间质ET-1,AngⅡ表达的影响[D];湖南中医药大学;2010年
8 王权礼;血府逐瘀汤对大鼠缺血心肌血管新生的作用与机制研究[D];湖南中医药大学;2010年
9 陈彦胜;桃红四物汤对大鼠显微吻合血管内皮修复及VEGF表达的影响[D];湖南中医药大学;2010年
10 黄济嘉;复骨健步片对大鼠模型骨折不同时相骨痂质量影响的研究[D];湖南中医药大学;2010年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 邹冬辉,王忠山,赵慧,许宗革;短期糖尿病雄鼠性腺重量和血糖、糖化血清蛋白、睾酮动态变化的分析[J];白求恩医科大学学报;2001年05期
2 孟晓萍;王永维;崔建华;韩敏;耿丽;于沛;潘迪;;N-乙酰半胱氨酸对兔颈动脉粥样斑块的抑制作用[J];吉林大学学报(医学版);2008年06期
3 陈国宝,陈宝田;番石榴叶提取物体外抗轮状病毒的实验研究[J];中国医药学报;2002年08期
4 熊筱娟,陈武,肖小华,徐丽英,崔江龙;乌索酸与齐墩果酸对小鼠实验性肝损伤保护作用的比较[J];江西师范大学学报(自然科学版);2004年06期
5 杨靖;血清CK、LDH、GOT测定对判断颅脑损伤病情的临床价值[J];中国医师杂志;2004年10期
6 杨伟,王立,万桂英;PAI-1与2型糖尿病动脉粥样硬化病变的研究[J];中国医师杂志;2005年09期
7 李慧,邹大进;2型糖尿病及肥胖与慢性炎症因子[J];第二军医大学学报;2003年11期
8 王花红,郭五保,顾莹,王喆之;山茱萸药材指纹图谱的研究[J];西北植物学报;2004年10期
9 许斌,李莉,徐焰,李亚斐;SZ植物消毒剂对悬液中细菌和病毒的灭活作用[J];第三军医大学学报;2005年09期
10 曾范利;于录;葛发;金晶;王全凯;;MABA法与二倍稀释法测定齐墩果酸体外抗结核菌活性[J];动物医学进展;2010年07期
中国重要会议论文全文数据库 前1条
1 林朝展;祝晨蔯;徐米雪;甄松峰;;山茱萸薄层色谱指纹图谱鉴别研究[A];全国中药标准研究学术研讨会论文集[C];2005年
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1 张骁 束梅英;[N];中国医药报;2004年
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中国期刊全文数据库 前10条
1 柳林;张奕;冯玉欣;逄力男;刘长山;程丽霞;;前列地尔治疗糖尿病下肢血管病变60例[J];中国新药与临床杂志;2006年04期
2 卡米拉;木克达斯;;糖尿病患者血浆D二聚体和纤维蛋白原检查[J];实用医技杂志;2008年33期
3 金雅丽;郭艺芳;;强化降糖不能减少糖尿病大血管并发症——ADVANCE试验解读[J];临床荟萃;2008年15期
4 邱琳;赵桂凤;;2型糖尿病并下肢血管病变相关因素分析[J];中国误诊学杂志;2009年07期
5 玉山江;;林兰辨治糖尿病经验浅述[J];辽宁中医杂志;2009年07期
6 张振华;杨潮萍;刘冬梅;韩雪;;2型糖尿病患者并发脑梗死的头颅磁共振特点[J];医学信息;2009年07期
7 李花;;血小板参数变化与2型糖尿病微血管病变的关系[J];中国社区医师(医学专业半月刊);2009年19期
8 葛敏;曾春来;;银杏叶提取物片治疗糖尿病血管病变的疗效观察[J];中国现代医生;2011年17期
9 孙龙,高树斌,王宏刚,徐瑞;糖、脂代谢紊乱与糖尿病血管病变的相关性[J];中国误诊学杂志;2003年06期
10 孟政杰,陆茵;RAGE基因表达与糖尿病血管病变[J];国外医学.内分泌学分册;2005年02期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 张晓峰;赵波;张玉玲;佟继铭;;RP-HPLC法测定赤雹果中齐墩果酸含量[A];中华中医药学会中药实验药理分会第八届学术会议论文摘要汇编[C];2009年
2 赵汗青;郑鹭飞;张建军;梁晓梅;王道全;;齐墩果酸肟酯化合物作为己糖胺酶(GlmS)抑制剂的设计、合成及活性研究[A];植保科技创新与病虫防控专业化——中国植物保护学会2011年学术年会论文集[C];2011年
3 丁家欣;张秋海;李先端;李淑莉;刘泓;;高效液相色谱-蒸发光散射法测定马鞭草中齐墩果酸与熊果酸的含量[A];全国生物医药色谱学术交流会(2010景德镇)论文集[C];2010年
4 张俊清;陈文芝;蒋德锡;张丹;;RP-HPLC法测定角花胡颓子中齐墩果酸与熊果酸的含量[A];海南省药学会2009年学术会议论文集[C];2009年
5 张瑜;谈献和;李伟;蒋国斌;朱艳玲;;HPLC法测定不同产地白花蛇舌草中熊果酸和齐墩果酸的含量[A];全国第8届天然药物资源学术研讨会论文集[C];2008年
6 黄諾嘉;马丽莎;;HPLC法测定水线草中齐墩果酸和熊果酸含量的不确定度评定[A];2011年中国药学大会暨第11届中国药师周论文集[C];2011年
7 陈亚军;熊富良;黄志军;许沛虎;杨祥良;;齐墩果酸纳米结晶的抗脂质过氧化作用[A];第十次中国生物物理学术大会论文摘要集[C];2006年
8 丁安伟;曹雨诞;张丽;杨梅;;RP-HPLC法测定荆芥各饮片中齐墩果酸和熊果酸的含量[A];中医药学术发展大会论文集[C];2005年
9 刘艳玲;赵忠娟;王俊峰;夏光敏;向凤宁;;诱导子对药效成分齐墩果酸合成中β-amyrin合成酶基因及其相关基因表达模式的影响[A];中国生物化学与分子生物学会农业生物化学与分子生物学分会第八次学术研讨会论文集[C];2008年
10 李喜凤;郝哲;杜云锋;邱天宝;余云辉;;蒲公英中齐墩果酸的含量测定[A];第十届全国中药和天然药物学术研讨会论文集[C];2009年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 杜向红 刘伟;牛膝中齐墩果酸的薄层扫描测定[N];中国医药报;2001年
2 白河;肝喜乐胶囊[N];医药养生保健报;2006年
3 记者 白毅;中国药科大学研究发现:NO供体型齐墩果酸衍生物有特异性肝靶向作用[N];中国医药报;2006年
4 北京友谊医院 吴静;三种人不宜走石子路[N];保健时报;2010年
5 记者 任壮;吴以岭委员: 发挥中医药在重大疾病防治中的作用[N];中国中医药报;2011年
6 伍江川;成都:八成月饼不达标[N];中国消费者报;2003年
7 张骁 束梅英;女贞子药理研究进展[N];中国医药报;2004年
8 种林;青梅酒养颜又美发[N];健康时报;2007年
9 王硕;强壮温补女贞子[N];中国中医药报;2007年
10 周翔云马唯理;创新西部开发策略 发展特色药材产业[N];科技日报;2008年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 郭甜甜;齐墩果酸皂苷的合成和生物活性评价以及羟基喜树碱糖缀合物的设计合成[D];中国海洋大学;2010年
2 冯健;齐墩果酸对大鼠血管平滑肌细胞中血红素氧合酶1表达的影响及其作用机制的研究[D];第三军医大学;2011年
3 潘英妮;管花肉苁蓉鲜品化学成分及生物活性的研究[D];沈阳药科大学;2011年
4 魏鉴腾;齐墩果酸的抗肿瘤作用及其作用机制研究[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2012年
5 王洪波;Nrf2及齐墩果酸在酒精性肝纤维化中的作用机制研究[D];山东大学;2011年
6 彭维兵;四种新型18β-甘草次酸和齐墩果酸修饰物成药性的初步评价[D];中国海洋大学;2010年
7 杨舒婷;玄参化学多样性及其与遗传变异和环境因子之间的关系研究[D];浙江大学;2011年
8 冯菊红;齐墩果酸、18β-甘草次酸和熊果酸衍生物的合成及其细胞毒活性的初步探讨[D];浙江大学;2006年
9 郑承红;降糖通脉方对糖尿病大鼠血管病变影响的实验研究[D];湖北中医学院;2006年
10 陈宇航;夏枯草规范化种植技术及其药材质量控制[D];南京农业大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 吴佳蕾;基于糖基化终末产物分析生地—山茱萸特征成分保护糖尿病血管病变的作用机制[D];南京中医药大学;2013年
2 朱链链;齐墩果酸诱导A549细胞凋亡蛋白质组差异表达分析及细胞内外药物含量测定[D];重庆医科大学;2011年
3 刘卫国;木通中齐墩果酸含量及其指纹图谱研究[D];四川农业大学;2005年
4 沈珈琦;应用霉菌单加氧酶羟基化齐墩果酸的研究[D];南京工业大学;2006年
5 张晓凯;柿蒂活性成分的研究[D];湖北中医学院;2008年
6 余琴;三类天然化合物的结构改造[D];昆明医学院;2009年
7 权鹏;齐墩果酸和熊果酸环糊精包合物的研究[D];南京医科大学;2008年
8 贾小燕;样品前处理技术在环境和药物分析中的应用[D];西南大学;2010年
9 张莹;芍药齐墩果酸和熊果酸积累规律的初步研究[D];扬州大学;2010年
10 齐学兵;齐墩果酸邻苯二甲酸单酯的合成工艺优化及其保肝作用的研究[D];黑龙江中医药大学;2001年
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