“肝尔舒”各有效部位的纯化工艺、中间体的质量标准及指纹图谱研究

【摘要】：肝尔舒缓释胶囊属于六类中药新药,是由总黄酮、总皂苷、总生物碱和总有机酸共四个有效部位组成的中药复方制剂。本课题严格按照六类新药的要求,通过对肝尔舒各有效部位的纯化工艺进行优化,确定了最佳纯化工艺；通过对肝尔舒中间体的质量标准研究,基本建立了肝尔舒中间体的质量标准草案；通过对肝尔舒的中间体指纹图谱研究,确立了肝尔舒中间体的指纹图谱质量控制方法,为“肝尔舒”缓释胶囊的新药研究奠定了基础。主要研究内容与结果如下：中间体的纯化工艺研究(1)大孔吸附树脂纯化工艺参数：树脂径高比为1：13,上样速度为4BV/h,以90%乙醇溶液作为洗脱剂,洗脱速度为3BV/h,收集洗脱液10BV,用以富集有效部位总黄酮和总皂苷部位。(2)阳离子交换树脂纯化工艺参数：树脂径高比为1：6,药液pH=2.6,上样速度为4BV/h,以氨性乙醇溶液(60%乙醇溶液中含有5%的氨水)作为洗脱剂,洗脱速度为5BV/h,收集18BV洗脱液,用以富集总生物碱部位。(3)阴离子交换树脂纯化工艺参数：树脂径高比为1：16,药液pH=10.0,上样速度为4BV/h,以50%乙醇溶液作为洗脱剂,洗脱速度为5BV/h,收集12BV洗脱液,用以富集总有机酸部位。中间体的质量标准研究采用薄层色谱法法(TLC),建立了以橙皮苷、芍药苷、延胡索乙素等为指标性成分的薄层鉴别方法；采用高效液相色谱法(HPLC),建立了以槲皮素、山奈素、异鼠李素、芍药苷、没食子酸和盐酸巴马汀为指标性成分的含量测定方法,初步建立了肝尔舒中间体的质量标准草案。中间体的指纹图谱研究采用HPLC和UV方法建立了肝尔舒中间体的指纹图谱质量控制方法。通过对不同批次中间体的指纹图谱研究,确定了23个共有指纹峰,结合处方中的陈皮、枳壳及绵茵陈等药材的相关性信息,分别对橙皮苷、柚皮苷和绿原酸3个指标性成分的指纹峰进行了归属。