健脾化瘀方对人肠癌SW480细胞株凋亡和细胞周期的影响及其作用机制
【摘要】:研究目的:探讨健脾化瘀方对大肠癌SW480细胞株凋亡与细胞周期的影响,从细胞周期和细胞凋亡的角度进一步阐明健脾化瘀方抑制大肠癌生长增殖及促凋亡的可能机制,为中医药治疗肿瘤提供新的理论支持。研究方法:1 MTT法检测不同时间各个浓度的健脾化瘀方对SW480细胞增殖的影响。2流式细胞仪检测健脾化瘀方对SW480细胞凋亡、细胞周期的影响。3 RT-qPCR法检测健脾化瘀方对SW480细胞中cyclinD1、cyclinE1、CDK2.CDK4、CDK6、 p27、Bax、Bcl-2基因表达的影响。4 Western Blot法检测健脾化瘀方对SW480细胞中cyclinD1、cyclinD2、cyclinD3、cyclinE 1、 CDK2、CDK4、CDK6、p27、Bax、Bcl-2、caspase-3、cleaved caspase-3、PARP、cleaved PARP蛋白表达的影响。研究结果:1 健脾化瘀方对人大肠癌细胞SW480增殖有抑制作用,且呈现量效和时效关系。2健脾化瘀方作用于SW480细胞后能促进细胞凋亡,阻滞细胞周期于G0/G1期。3健脾化瘀方作用于SW480细胞后cyclinD1、cyclinE1、CDK2、CDK4、CDK6、Bcl-2基因表达下降,p27、Bax基因表达上升。4健脾化瘀方作用于SW480细胞后cyclinD1、cyclinD2、cyclinD3、cyclinE1、CDK2、 CDK4、CDK6、Bcl-2、caspase-3、PARP蛋白表达下降,p27、Bax、cleaved caspase-3、 cleaved PARP蛋白表达上升。研究结论:健脾化瘀方对人肠癌细胞SW480增殖具有抑制作用,其机制可能是影响cyclinD1、 cyclinD2、cyclinD3、cyclinE1、CDK2、CDK4、CDK6、p27、Bax、Bcl-2、caspase-3、cleaved caspase-3、PARP、cleaved PARP的表达,引起SW480细胞发生G0/G1期阻滞和凋亡,进而抑制SW480细胞的增殖。