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《南京中医药大学》 2003年
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中药莪术有效物质及饮片规范化研究

陆兔林  
【摘要】: 《中药莪术有效物质及饮片规范化研究》来源于国家科技部“十五”攻关《中医药现代化研究与产业化开发》子课题《莪术饮片工艺及质量标准规范化研究》部分研究内容。论文对临床常用中药蓬莪术Curcuma phaeocaulis Valeton的历史沿革、有效活性物质基础及饮片规范化炮制工艺、质量标准进行了较为系统深入的研究。 莪术具行气破血,消积止痛功效。临床用于治疗症瘕痞块,瘀血经闭,食积胀痛;早期宫颈癌等症。其主要成分有挥发油及姜黄素类成分。挥发油主要具抗肿瘤、抗菌、升高白细胞等作用,而莪术活血化瘀止痛有效物质仍不明确。莪术临床常以醋制品入药,醋制后增强活血化瘀止痛作用。 论文通过以二磷酸腺苷(Adenosine diphosphate,ADP)、胶原(collagen,COL)诱导的家兔体外血小板聚集;“血瘀”模型大鼠的全血粘度、血浆粘度、大鼠红细胞压积、血沉及大鼠血小板聚集;小鼠抗凝血的实验研究,揭示莪术不同提取物均具一定的抗血小板聚集、抗凝血及调节血液流变性作用。其中以乙酸乙酯、氯仿提取物及姜黄素活性最强,氯仿及乙酸乙酯提取物中以姜黄素类成分为主,首次证实莪术中姜黄素类成分为其活血化瘀主要活性成分。 莪术不同提取物对小鼠二甲苯所致的耳廓肿胀及醋酸所致的毛细管通透性增加有明显的抑制作用。以莪术挥发油及正丁醇提取物活性较强。同时各提取物对小鼠醋酸所致的扭体反应及热板法作用,以莪术乙酸乙酯、氯仿及正丁醇提取物活性较强。各提取物中均含姜黄素类成分,显示莪术中挥发油及姜黄素类成分为其镇痛抗炎主要活性成分。 采用高效液相色谱法测定莪术中姜黄素血药浓度进行药代动力学研究。将各组药液不同时间采血后所测的血药浓度值在计算机上用3P87软件进行 WP=10 分析,结果姜黄素的体内过程符合单室模型一级吸收,测得药代参数为Ka=0.53(h-1),Ke=0.10 h-1),T(peak)=3.89(h),t1/2ka=1.32(h),t1/2ke=6.89(h),A=170.12(ng/ml)。该结果阐明了姜黄素的吸收、代谢过程,对莪术的临床合理应用、提高疗效提供科学依据。 采用溶剂法、色谱分离法提取分离莪术中的化学成分,用核磁共振等法鉴定其结构。分离并鉴定了5个化合物:异莪术烯醇(isocurcumenol)、莪术烯醇(curcumenol)、菠甾醇(spinasterol)、姜黄素(curcumin)、β-胡罗卜苷(β-D-Glucopyranoside)。其中β-胡罗卜苷为首次从莪术中获得,菠甾醇为首次从姜黄属植物中获得。 采用气相色谱-质谱法对莪术挥发油进行化学成分的分析。共鉴定出18个化合物。1-(1,1-二甲基乙氧基)-2-甲基-苯(1-(1,1-dimethylethoxy)-2-mthyl- Benzene)、4-乙炔基-4-羟基-3,5,5-三甲基环已烯酮(4-ethynyl-4-hydroxy-3,5,5-trimethyl-Cyclohexen)、10-甲基乙烯基,3,7-环癸二烯酮(10-(1-methylethenyl-3,7-Cyclodecadien)、1,3,5-三异丙基苯(1,3,5-triethyl-Benzene)、2,3-二氢-苯骈呋喃(2,3-dihydro-Benzofuran)等12个组分为首次从莪术中鉴定。 采用分光光度法、高效液相色谱法检测莪术中总姜黄素及姜黄素的含量。 莪术水处理软化切制工艺研究以姜黄素、挥发油含量为指标选择润制时间、蒸制时间、切制规格3个因素,用L9(3)4正交设计表,采用单指标和多指标综合两种分析方法进行水处理工艺的优选。结果其最佳水处理工艺为:润制20min,蒸制30min切制规格为3mm的饮片。 莪术醋制工艺优选,以姜黄素、挥发油含量为指标,选择炒制温度、炒制时间、用醋量、润制时间4个因素,用L9(3)4正交设计表,采用方差分析法。得莪术最佳醋炙工艺参数为:加入20%醋拌匀,闷润20分钟后,130 WP=11 ℃炒制5分钟。 采用GC-MS法分析炮制对莪术挥发油的影响。结果显示炮制后各制品的挥发油含量及组分均产生较大变化。醋制过程中1-(1,1-二甲基乙氧基)-2-甲基-苯、γ-榄香烯、2,4,6-五甲基苯胺、1,3,5-三乙基苯等成分消失,产生2个新的组分:4-异丙基苯甲酸(4-methylethyl-Benzoic acid)、2-甲基-5-(1-甲基乙烯基)-环己酮(2-methyl-5-(1-methylethenyl)- Cyclohexanone)。 通过比较生莪术、醋煮莪术、醋炙莪术中总姜黄素及姜黄素含量。结果显示莪术经醋制后总姜黄素类成分含量变化不大,而姜黄素产生不同程度下降,制品中以醋炙品含量为高。 实验显示莪术不同炮制品均具有抗血小板聚集、抗凝血及调节血液流变性作用,其中以醋炙品作用最强。研究显示醋制后能显著增强其镇痛抗炎作用。 上述研究结果为阐明莪术的有效物质基础及制定莪术饮片规范化工艺及质量标准提供了科学的理论依据
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