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《南京师范大学》 2006年
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萼花臂尾轮虫Dmrt基因DM区的克隆

王庆  
【摘要】:本文研究了温度与培养基对蒜头藻生长的影响,并用不同种类的藻类和不同浓度的蒜头藻对萼花臂尾轮虫进行培养,观察了其生长情况,还对忽然改变食物种类对轮虫有性生殖的诱导进行了探索;为了探索轮虫的性别决定机制,提取了萼花臂尾轮虫非混交雌体的基因组DNA,扩增了其Dmrt基因的DM结构域。主要研究结果如下: (1)蒜头藻在27±1℃下、BG-11培养基中生长最好,25天后最高密度可达1.307×10~8ind/ml,相对生长常数为0.089。蒜头藻直接在f/2培养基中生长情况不理想,而通过海水驯化的蒜头藻在f/2培养基中生长良好,27±1℃下经15天培养密度可达3.05×10~7ind/ml。 (2)萼花臂尾轮虫在藻细胞数为1.0×10~8/ml的蒜头藻中生长情况最好。蒜头藻→酵母、酵母→蒜头藻的食物忽然改变均能诱导轮虫出现有性生殖。但是蒜头藻→酵母的诱导效果更明显。 (3)用酚/氯仿法成功的提取了轮虫的基因组DNA。用简并PCR法扩增并克隆了轮虫的Dmrt基因的DM结构域,用聚合酶链式反应-单链构象多态(Polymerase Chain Reaction-Single Strand Conformation Polymorphism,PCR-SSCP)技术对20个克隆进行了分析,获得了3条Dmrt序列,分别测序,测序结果均为140bp。推测其编码氨基酸的序列,可见两条氨基酸序列完全相同,与另一条差别较大。氨基酸序列经GenBank中同源性检索,相同的两条序列与果蝇的dsx基因有97%的同源性,另一条氨基酸序列经GenBank中同源性检索未发现与之同源的序列。由此推测,轮虫的性别决定机制可能与Dmrt基因有关。
【学位授予单位】:南京师范大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2006
【分类号】:S963.214

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