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《南京师范大学》 2006年
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重组家蚕抗菌肽CM4抗真菌作用机理的研究

吴希  
【摘要】:抗菌肽是体内先天免疫所产生的小分子物质,它们种类繁多,家族庞大,对细菌,真菌,病毒,原虫及癌细胞等都具有抑杀能力。灵活快速是抗菌肽发挥作用的一个特点。 昆虫中不含半胱氨酸的线性Cecropin家族是最早发现的一类抗菌肽。抗菌肽CM4是由张双全等人从中国家蚕中诱导获得的线性、α-螺旋肽,已证明CM4是Cecropin家族中的一个成员。本实验室已经对抗菌肽CM4杀伤细菌及癌细胞的作用机理进行了深入的研究,但对CM4抗真菌的机制研究较少。 本论文利用毕赤酵母表达的重组家蚕抗菌肽CM4,通过一系列的细胞及分子水平的实验研究,试图探索抗菌肽CM4完整的抑杀真菌的机理,挖掘抗菌肽潜在的功能,并为抗菌肽最终开发成抗菌药物提供一定的依据。 我们通过孔穴法抗真菌实验,从十几种真菌中筛选了部分对抗菌肽CM4较敏感的菌株,最终以黑曲霉和绿色木霉等作为研究对象。细胞水平上,扫描电镜,透射电镜和激光共聚焦观察都显示,抗菌肽处理的真菌外部形态和内部结构都发生了很大的变化,出现了畸形,破裂,断残等现象。由于具有两亲性的α螺旋,抗菌肽CM4分子可能首先通过插入双层脂膜而破坏了真菌的膜结构,其次进入细胞内,使细胞器和细胞骨架造成了不同程度的损坏。 在以上工作的基础上,我们又进一步从分子水平研究了抗菌肽CM4对真菌的作用机制。凝胶阻滞实验证明,抗菌肽能与真菌的DNA和RNA结合,影响了它们在电泳中的迁移率,同时还能使核酸受到破坏,断裂为大小不等的片断。因而真菌细胞的代谢过程受到破坏,最终导致了真菌的死亡。 我们最后还通过抗菌肽对细菌及真菌作用机理的比较,为全方位了解抗菌肽CM4的杀菌作用机理,提供了一定的理论基础。
【学位授予单位】:南京师范大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2006
【分类号】:Q966

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【引证文献】
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【参考文献】
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【同被引文献】
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