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《浙江大学》 2011年
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氧糖剥夺/再灌注神经元中的自噬激活及其在细胞死亡中的作用

苏方  
【摘要】:目的:观察体外培养大鼠海马神经元氧糖剥夺/再灌注过程中自噬的激活,探讨自噬在神经元氧糖剥夺/再灌注损伤中的作用。 方法:采用原代培养的大鼠海马神经元经2h的氧糖剥夺(oxygen-glucose deprivation, OGD)和2h.4h、6h、12h、24h、48h的再灌注处理方法,建立神经元的缺血/再灌注的细胞模型。用MTT法检测细胞活性,透射电镜下检测自噬的特异性结构,免疫荧光化学法检测自噬特异性蛋白微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3 B, LC3B)的表达。应用自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-Methyladenine,3-MA)并检测神经元的活性。 结果:经氧糖剥夺/再灌注后,海马神经元的活性比未经氧糖剥夺/再灌注组显著地降低(P0.05)。透射电镜显示,神经元经氧糖剥夺/再灌注后细胞胞浆内有大量自噬体形成;免疫荧光检测,未经氧糖剥夺/再灌注的神经元自噬的发生率极低,氧糖剥夺后和再灌注的不同时间段与对照组相比,LC3的阳性细胞显著增多(P0.05)。应用自噬抑制剂3-MA阻断自噬后,与未给予3-MA组相比,神经元的存活率显著降低(P0.05)。 结论:体外培养海马神经元经氧糖剥夺/再灌注后出现自噬激活,3-MA加重了神经元的损伤,提示自噬可能在氧糖剥夺/再灌注过程中起对抗损伤的作用。
【学位授予单位】:浙江大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:R743

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