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《浙江大学》 2010年
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油菜EMS诱变群体的构建以及油脂代谢相关基因等位多态性与油脂品质关系的研究

石从广  
【摘要】:油菜是世界上重要的油料作物,含油量的提高和脂肪酸品质改良是当今油菜育种重要的目标。分子标记辅助选择育种(MMAPB)是提高作物农艺性状和种子品质性状的有效手段,现有的各种DNA分子标记的开发应用以及丰富的基因组和ESTs序列数据信息为遗传研究和分子标记辅助育种提供了极大的便利。人们对于模式植物拟南芥油脂合成相关基因功能的深入理解对于油菜品质育种具有极大的参考价值。 然而据我们所知,目前几乎还没有关于油菜的油脂代谢相关基因位点的等位变异与种子脂肪酸成分积累的关系的研究报道。本文旨在研究那些偏向于在种子中表达,并且影响脂肪酸组分的关键基因位点在EMS诱导的M2群体中,以及54个地方栽培品种资源中的等位多态性,及其这些等位变异与种子品质,特别是不饱和脂肪酸含量之间的关系。研究的结果如下: 1.利用甲基磺酸乙酯(EMS)溶液处理甘蓝型油菜双低品种“浙双72"种子,经田间M1代观察和M2代筛选及部分M3代验证,最终筛选到叶色、叶形、株高、茎色、花色、花瓣、雄性不育及开花期等性状发生明显变异的M2突变株;对M3种子的主要脂肪酸组分之间,以及脂肪酸组分与种子含油量进行了相关与回归分析,同时描述了各种脂肪酸组分和含油量的变异幅度与分布,提取了2558份包含突变性状的M2植株叶片的DNA。 2.对基因FAD2、FAD6、FAD7和FAD8在甘蓝型油菜幼嫩种子和叶片中的转录水平差异作了分析,发现FAD2和FAD6在叶片和种子中转录水平无明显差异,而FAD7和FAD8基因更偏向于在叶片中转录。同时对6个FAD基因的12条BAC克隆序列和GeneBank的EST序列运用DNAStar5.0的MegAlign程序进行序列比对,结果以聚类分枝树的形式呈现,结果显示FAD3、FAD7和FAD8的序列相似度较高,FAD2的序列与FAD5和FAD6的序列处与不同的分枝,三者相似度较低。 3.利用HRM技术分析FAD2基因的SNP变异,最终在比对区域统计出12个导致氨基酸序列变化的M2样品。在这12个样品中,、只有3个样品种子的油酸含量相对CK有显著提高,有6个油酸含量显著降低,有3个油酸含量与对照差异不明显。3个样品(代号529-3,1841-2和1823-4)种子油酸含量的升高可能与比对区域DNA序列的变异导致的FAD2酶蛋白氨基酸的突变有关。 4.从拟南芥600多个与油脂合成和代谢相关基因位点中选出75个倾向于在种子中表达的基因来研究所选油菜地方种质资源的基因等位多态性,一共在上述75个基因上设计了150对引物,平均每个基因包含两对引物。在Tapitor和宁油7号两个油菜品种间进行筛选标记发现52对引物具有多态性,这些具有多态性的引物被当作ILP标记,在上述52个标记中挑出34个多态性较好的标记,这些标记被用来检测包含54个油菜地方栽培品种的油脂代谢基因的内含子的多态性。平均每对引物在覆盖的区域扩增出5.6个等位位点,分析油脂代谢相关基因的等位多态性与种子含油量和脂肪酸含量存在的相关性发现标记FAD7-ics11170(3/4)与种子中亚麻酸的积累相关,等位多态型FAD7-ics11170(3/4)-c与高亚麻酸含量相关,说明这个标记可以作为筛选高亚麻酸育种材料的有效手段。 综上所述,本项研究描述了EMS诱导的M2群体和部分油菜地方品种中调控脂肪酸组成的基因位点的等位变异,以及这些等位变异与种子品质性状的关系。这些研究结论丰富了人们对于油菜种子油脂代谢分子机制的理解,并且为高不饱和脂肪酸含量分子标记辅助育种奠定了良好的基础。
【学位授予单位】:浙江大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:S565.4

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【引证文献】
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1 孟凡奇;棉子含油量多世代遗传分析[D];华中农业大学;2013年
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1 王贵春;杨光圣;;油菜高含油量育种研究进展[J];安徽农业科学;2007年18期
2 石东乔,周奕华,张丽华,刘桂珍,陈正华;农杆菌介导的油菜脂肪酸调控基因工程研究[J];高技术通讯;2001年02期
3 刘勋甲,郑用琏,尹艳;遗传标记的发展及分子标记在农作物遗传育种中的运用 Ⅰ遗传标记的发展及分子标记的检测技术[J];湖北农业科学;1998年01期
4 熊兴华,官春云,李栒,王学军,周小云,李家洋;甘蓝型油菜FAD2基因cDNA片段的克隆和序列分析[J];湖南农业大学学报(自然科学版);2002年02期
5 董媛媛;俞咪娜;李小白;徐攀峰;崔海瑞;张明龙;;EST-SSR和RAPD标记检测油菜(Brassica napus)遗传多样性[J];核农学报;2008年05期
6 戚存扣,浦惠明,傅寿仲;甘蓝型油菜F_2群体主要脂肪酸含量间的相关与回归分析[J];江苏农业学报;1993年04期
7 傅寿仲;中国油菜品质育种进展[J];江苏农业学报;1999年04期
8 周伟军,徐光华,沈惠聪;油菜高油分育种的前景与问题探讨[J];科技通报;1995年06期
9 石东乔,周奕华,陈正华;植物脂肪酸调控基因工程研究[J];生命科学;2002年05期
10 宋伟,杨慧萍,沈崇钰,曹玉华,李学臣;食品中的反式脂肪酸及其危害[J];食品科学;2005年08期
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1 邓婧;甘蓝型油菜fad_2基因差异表达与脂肪酸合成的相关性分析[D];湖南农业大学;2008年
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 夏光敏,陈惠民;小麦体细胞杂交育种研究进展[J];山东农业科学;1999年05期
2 程辉;王友华;何道君;柳世君;蓝黎明;余新春;卢兆成;胡建涛;;甘蓝型油菜黄籽双低隐性核不育两型系2328AB的选育研究[J];山东农业科学;2007年01期
3 董艳敏;卢金东;刘栓桃;;分子标记技术在葫芦科瓜类作物中的应用进展[J];山东农业科学;2008年02期
4 任海霞;宫志远;李瑾;任鹏飞;姚强;曲玲;;平菇RAPD-PCR反应体系优化研究[J];山东农业科学;2009年03期
5 傅廷栋;中国油菜生产和品种改良的现状与前景[J];安徽农学通报;2000年01期
6 余华胜;张冬青;张尧锋;朱国富;苏强;林宝刚;丁厚栋;;甘蓝型油菜三隐性核不育系ZH1A制种技术初步研究[J];安徽农学通报(上半月刊);2010年07期
7 孙晓敏;李英;李艳明;习广清;谌国鹏;邓根生;;我国油菜育种研究技术和品质育种研究进展[J];安徽农学通报(上半月刊);2011年03期
8 侯树敏,胡宝成,陈凤祥,李强生,吴新杰,费维新;甘蓝型油菜隐性核不育单交种与三交种的比较[J];安徽农业科学;1999年04期
9 赵伟,李莉,向太和,杨剑波;生物信息学初探[J];安徽农业科学;2000年01期
10 李爱民,张永泰,惠飞虎;我国油菜细胞质雄性不育及杂种优势利用研究进展[J];安徽农业科学;2001年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 涂金星;傅廷栋;;油菜品质育种现状及展望[A];全国农业优化种植结构发展优质高效农产品学术讨论会文集[C];2000年
2 王强;张茂君;;分子标记及其在苹果属植物研究上的应用[A];2003年全国作物遗传育种学术研讨会论文集[C];2003年
3 张仁和;薛吉全;毛建昌;马国胜;杨引福;;DNA分子标记与玉米种质研究[A];2004全国玉米种质扩增、改良、创新与分子育种学术会议论文集[C];2004年
4 张书芬;马朝芝;朱家成;王建平;傅廷栋;;甘蓝型油菜杂种后代芥酸含量及含油量的表现及其杂种优势分析[A];中国作物学会2005年学术年会论文集[C];2005年
5 林良斌;张传利;夏国银;马忠琴;;油菜是发展生物柴油的优势能源作物[A];中国作物学会2006年学术年会论文集[C];2006年
6 陈光尧;王国槐;罗峰;;油菜辐射育种研究进展[A];中国作物学会2007年全国作物遗传育种学术研讨会论文集[C];2007年
7 李兰玉;陈苇;杨清辉;罗延青;董云松;李根泽;王敬乔;;甘蓝型油菜Fad 2基因RNAi载体无选择标记转化研究[A];中国作物学会2007年学术年会论文集[C];2007年
8 梁晶;祝诗平;;近红外光谱分析技术在油菜品质检测中的应用[A];自主创新与持续增长第十一届中国科协年会论文集(2)[C];2009年
9 姜元荣;夏树华;张余权;;反式脂肪酸的危害及相关国际法规[A];营养与慢性病——中国营养学会第七届理事会青年工作委员会第一次学术交流会议论文集[C];2010年
10 宋婉;续九如;杨凯;贾继增;;AFLP技术在中国枣优良品种鉴定中的应用[A];首届全国干果生产与科研进展学术研讨会论文集[C];1998年
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1 刘名;太平洋鲱和大头鳕的群体遗传学研究[D];中国海洋大学;2010年
2 于海洋;牙鲆微卫星标记的筛选和美洲牡蛎抗病相关基因SNP的初步分析[D];中国海洋大学;2010年
3 李培英;新疆草坪用野生偃麦草种质资源评价[D];新疆农业大学;2010年
4 高山;蛋白质点突变效果预测与突变数据库研究[D];南开大学;2010年
5 张彩英;小麦主要产量和品质性状的QTL鉴定及ZDS功能标记的开发[D];河北农业大学;2010年
6 田新惠;彩色棉GhF3'H与GhF3'5'H基因的克隆、鉴定及四种类黄酮物质的HPLC分析[D];石河子大学;2010年
7 邵咏妮;水稻生长生理特征信息快速无损获取技术的研究[D];浙江大学;2010年
8 刘宏波;甘蓝型油菜抗病虫基因遗传转化及转基因植株抗性鉴定的研究[D];浙江大学;2010年
9 陈国林;油菜籽饼粕氨基酸含量的近红外模型创建及发育遗传研究[D];浙江大学;2010年
10 黄明;分子标记与水稻遗传多样性及杂种优势的相关性研究[D];湖南农业大学;2010年
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1 李良;湖北省油茶优良单株遗传多样性及品质初步分析[D];华中农业大学;2010年
2 林兵;甘蓝型油菜A8连锁群种子含油量QTL簇解析及连锁累赘分析[D];华中农业大学;2010年
3 刘健;甘蓝型油菜C2连锁群种子含油量QTL簇及品质性状的分析[D];华中农业大学;2010年
4 赵洪伟;超表达BOR1基因提高油菜硼效率的研究[D];华中农业大学;2010年
5 王志方;甘蓝型油菜低硼胁迫下的根系蛋白质组学研究[D];华中农业大学;2010年
6 郭一鸣;全球白菜型油菜遗传多样性分析[D];华中农业大学;2010年
7 杨盖宇;近等基因系群体的Ghd7和Qph1上位性分析[D];华中农业大学;2010年
8 董巍;分子标记辅助选择改良光温敏核不育系的稻瘟病抗性和稻瘟病抗性基因的初步定位[D];华中农业大学;2010年
9 李炫丽;ms2Bnap同源序列在萝卜—芥蓝异源四倍体中的克隆及表观遗传变异分析[D];华中农业大学;2010年
10 张庆路;利用重组自交系群体定位一般配合力相关性状QTL[D];华中农业大学;2010年
【同被引文献】
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1 栾文琪;韩守萍;禹山林;张建成;;花生脂肪和蛋白质含量与质量性状相关性的研究[J];山东农业科学;1993年02期
2 孟凡钢;富健;王新风;马巍;于志晶;姜兆生;彭辉;王艳霞;;大豆高脂肪组合F_5代脂肪含量遗传及与亲本相关性的研究[J];安徽农业科学;2011年09期
3 张忠臣,战秀玲,陈庆山,滕卫丽,杨庆凯,李文滨;大豆油分和蛋白性状的基因定位[J];大豆科学;2004年02期
4 张代军;周顺启;栾怀海;于凤瑶;辛秀君;胡国华;;高油大豆品种蛋白质和油份积累规律的研究[J];大豆科学;2005年04期
5 孟凡钢;富健;王新风;于志晶;马巍;彭辉;李华英;;大豆高脂肪组合初世代脂肪含量遗传与亲本相关性研究Ⅰ F_2代脂肪含量遗传与亲本相关性初探[J];大豆科学;2007年01期
6 郑永战;盖钧镒;周瑞宝;田少君;卢为国;李卫东;;大豆脂肪及脂肪酸组分含量的遗传分析[J];大豆科学;2007年06期
7 孟凡钢;富健;王新风;马巍;于志晶;;大豆高脂肪组合F_3代脂肪含量遗传及亲本相关性研究[J];大豆科学;2008年02期
8 孟凡钢;富健;王新风;马巍;于志晶;;大豆高脂肪组合F_4代脂肪含量遗传及亲本相关性[J];大豆科学;2009年02期
9 王志新;郭泰;吴秀红;郑伟;李灿东;张振宇;刘忠堂;韩世峰;;密度和施肥水平对高产高油大豆合丰55油分含量及产量的影响[J];大豆科学;2011年04期
10 李盛有;宋书宏;;不同遗传背景大豆杂交F_2代脂肪含量遗传分析[J];大豆科学;2011年06期
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1 韩英鹏;多环境、多遗传背景下不同发育时期大豆籽粒重的QTL分析[D];哈尔滨师范大学;2010年
2 王新发;甘蓝型油菜含油量的遗传与生态学研究及其杂种优势利用[D];中国农业科学院;2011年
3 朱亚娜;油菜种子油脂基因的定位及温度对种子油分积累影响的分子机制[D];浙江大学;2011年
4 戚存扣;甘蓝型油菜主要农艺品质性状遗传体系和杂种优势改良研究[D];南京农业大学;2002年
5 沈金雄;甘蓝型油菜杂种优势及其遗传分析[D];华中农业大学;2003年
6 张书芬;甘蓝型油菜重要农艺和品质性状的杂种优势及遗传分析[D];华中农业大学;2005年
7 蔡长春;甘蓝型油菜开花时间和光周期敏感性的遗传分析和QTL定位[D];华中农业大学;2006年
8 李文峰;基于生理生态过程的棉籽品质模拟模型研究[D];南京农业大学;2009年
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1 宋伟;玉米穗粗的数量遗传分析[D];四川农业大学;2011年
2 陈俊意;甘蓝型黄籽油菜油份与色素、蛋白质及糖代谢间关系研究[D];西南农业大学;2004年
3 伍新玲;利用诱变技术改良油菜脂肪酸组成及油酸含量遗传研究[D];华中农业大学;2005年
4 沈晓佳;陆地棉种子品质性状的遗传分析[D];浙江大学;2008年
5 代柳亭;不同含油量甘蓝型油菜种子油脂分布、生理生化特性以及化学调控的研究[D];西南大学;2008年
6 王德龙;棉花种子油脂形成期全长cDNA文库构建与pepc基因克隆[D];中国农业科学院;2009年
7 彭苗苗;棉花磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因ihpRNA载体的构建与遗传转化以及棉属亲缘关系的研究[D];西北农林科技大学;2010年
8 李河南;大豆产量相关性状的遗传分析[D];南京农业大学;2009年
9 蔡立楠;大豆主要农艺性状和品质性状的主基因+多基因混合遗传分析[D];吉林农业大学;2012年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 尚毅,李殿荣,田建华,陈文杰,袁红玉,张继澍;陕西省双低油菜硫苷含量的稳定性分析[J];西北植物学报;2004年04期
2 韩斌;彭建营;;cDNA-AFLP技术及其在植物基因表达研究中的应用[J];西北植物学报;2006年08期
3 马占强,林良斌;分子标记技术在油菜育种中的应用[J];分子植物育种;2004年05期
4 彭勇;梁永书;王世全;吴发强;李双成;邓其明;李平;;水稻SSR标记在RI群体的偏分离分析[J];分子植物育种;2006年06期
5 王通强;油菜籽含油量的遗传及杂种优势[J];贵州农业科学;1992年06期
6 陶贵祥,杨晓,陈静;贵州油菜地方品种品质性状的初步研究[J];贵州农业科学;1994年05期
7 官春云;油菜转基因育种研究进展[J];中国工程科学;2002年08期
8 ;反式脂肪酸与血脂水平和心血管疾病发生的危险性[J];国外医学(临床生物化学与检验学分册);1999年02期
9 陈炳卿;反式脂肪酸与人体健康[J];国外医学(卫生学分册);1998年03期
10 虞辉,官春云,王国槐;甘蓝型油菜杂种优势与配合力及通径分析[J];湖南农学院学报;1989年03期
中国重要会议论文全文数据库 前1条
1 王敬乔;李根泽;陈薇;和江明;董云松;曾黎琼;寸守铣;;油菜高效转基因平台及无选择基因转化[A];全国作物细胞工程与分子技术育种学术研讨会论文集[C];2003年
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1 戴晓峰;油菜脂肪酸合成关键基因的克隆与脂肪酸积累模式研究[D];中国农业科学院;2006年
【相似文献】
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1 查伏莲;陈国钧;;我省油菜减产原因的分析及其对策[J];安徽农业科学;1989年03期
2 王智昭;提高冬种油菜产量的几点技术措施[J];广西农业科学;1995年05期
3 许寿增;杨国军;黎青;郑继成;;叼花现象对沪油15性状的影响[J];种子世界;2005年11期
4 花良兵;方咸林;王志国;;控释肥在油菜上的肥效试验[J];安徽农学通报;2009年01期
5 杨宇;邓正春;吴平安;杜登科;吴仁明;刘晓霞;;多效唑在油菜上的应用试验[J];作物研究;2011年01期
6 杜春发;;稻茬油菜高产技术要点[J];河南农业科学;1980年12期
7 唐启才,赵讲芬,甘功勋;钼肥对油菜产量和品质影响的初步研究[J];贵州农业科学;1990年01期
8 刘枫,叶舒娅,黄运生;油菜氮磷钾肥效应及推荐施用量的研究[J];安徽农业科学;1991年02期
9 赵彩霞;洪坚平;;光合细菌对水培油菜产量和品质影响的研究[J];山西农业科学;2007年07期
10 姚爱华;;油菜测土配方施肥的增产效果[J];河北农业科学;2008年09期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 张祥明;;美盛肥料对油菜经济性状和产量的影响[A];土肥水资源高效利用与农业面源污染防控技术研讨会论文集[C];2011年
2 孙松林;罗锡文;;油菜生产机械化装备和配套技术研究探讨[A];纪念中国农业工程学会成立30周年暨中国农业工程学会2009年学术年会(CSAE 2009)论文集[C];2009年
3 张建军;陈晓艺;马晓群;;安徽省油菜气候适宜性及其变化趋势分析[A];第28届中国气象学会年会——S11气象与现代农业[C];2011年
4 张皓;田展;杨捷;李军;赵瑞;辛跳儿;;气候变化影响下长江流域油菜产量模拟初步研究[A];第28届中国气象学会年会——S11气象与现代农业[C];2011年
5 易靖;郑家国;江心禄;苏音贵;李杰;;重庆市油菜机播机收技术研究[A];全国丘陵山地农机化技术发展高层论坛论文集[C];2011年
6 蒋俊;蒲晓斌;张锦芳;李浩杰;蒋梁材;;四川油菜机械化生产技术初步研究[A];中国作物学会50周年庆祝会暨2011年学术年会论文集[C];2011年
7 周可金;吕孝林;肖文娜;唐校强;;免耕栽培的播期与密度对油菜生长发育与产量的影响[A];2010中国作物学会学术年会论文摘要集[C];2010年
8 邵启华;;做大做强威信县油菜产业的思路与对策[A];云南省“粮食高产创建”省农科院“八百双倍增工程”科技培训暨云南农业科技论坛论文集[C];2009年
9 蒋小留;;油菜施用氮磷钾肥用量指标研究[A];面向21世纪的科技进步与社会经济发展(上册)[C];1999年
10 许征宇;张祥明;胡鹏;郭熙盛;杨友斌;胡润;鲁剑巍;武际;;不同土壤肥力下油菜施肥产量、品质效应和经济效益研究[A];中国植物营养与肥料学会2010年学术年会论文集[C];2010年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 普乔仙;牟定县油菜产量突破5000吨[N];楚雄日报(汉);2009年
2 记者 王爱娥;拜耳与油料所协作开展油菜研究[N];农资导报;2010年
3 张斌 刘玉明 本报记者 孙兴伟;三台县塔山镇油菜亩产刷新全省纪录[N];绵阳日报;2011年
4 魏阳;宁杂19号油菜:高产高油抗性好[N];江苏农业科技报;2011年
5 戴铁生;及早抓四防 油菜产量高[N];农民日报;2001年
6 刘烈辉;湖北今秋主攻油菜机械直播[N];农民日报;2010年
7 蒋四新殷美生;湖口油菜产量创历史新高[N];九江日报;2007年
8 ;油菜 马铃薯 设施蔬菜春管技术措施[N];农民日报;2011年
9 魏莉;彭泽30万亩油菜全面进入盛花期[N];九江日报;2011年
10 记者朱隽;气象局发布冬小麦、油菜产量预报[N];人民日报;2003年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 苏伟;稻草还田对油菜生长、土壤肥力的综合效应及其机制研究[D];华中农业大学;2014年
2 刘飞;基于光谱和多光谱成像技术的油菜生命信息快速无损检测机理和方法研究[D];浙江大学;2011年
3 邓秋红;高碳酸酐酶活性油菜的筛选及其基因克隆与异源表达[D];华中科技大学;2010年
4 周可金;油菜(Brassica napus L.)化学催熟及其生理机制的研究[D];湖南农业大学;2009年
5 董云;油菜(Brassica napus)miRNA的鉴定及Bna-miR1140表达调控机制研究[D];石河子大学;2013年
6 刘唐兴;甘蓝型油菜抗倒伏机理及栽培因子和倒伏的关系研究[D];湖南农业大学;2011年
7 张筱蕾;基于高光谱成像技术的油菜养分及产量信息快速获取技术和方法研究[D];浙江大学;2013年
8 杨宁;内蒙古农牧交错带主要作物对气候的敏感性与适应弹性研究[D];中国农业大学;2014年
9 邹娟;冬油菜施肥效果及土壤养分丰缺指标研究[D];华中农业大学;2010年
10 陈良;油菜抗逆相关基因的鉴定和功能研究[D];华中师范大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 周丹;江西省油菜组织硫含量和硫同位素组成特征及对硫源的示踪[D];南昌大学;2012年
2 肖文娜;化学催熟技术在油菜上的应用研究[D];安徽农业大学;2010年
3 何激光;渍害对油菜生理特性及农艺性状的影响[D];湖南农业大学;2011年
4 岳延滨;油菜植株形态结构模型及可视化[D];南京农业大学;2010年
5 王琼;几种植物生长调节剂对油菜渍害的缓解作用及机理研究[D];中国农业科学院;2012年
6 张尧锋;油菜全程机械化生产配套技术研究与示范[D];浙江大学;2012年
7 刘朵朵;根区供氧对改善油菜滞水生长特性的影响研究[D];湖南农业大学;2013年
8 曲晓言;农杆菌介导油菜转基因研究[D];云南农业大学;2012年
9 李凤阳;不同肥密条件下早熟油菜光合特性研究[D];湖南农业大学;2012年
10 苏伟;油菜轻简化生产中几项养分管理关键技术的初步研究[D];华中农业大学;2010年
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