收藏本站
《浙江大学》 2011年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

高密度糖基化聚丙烯微孔亲和膜的点击化学制备及其蛋白质分离研究

王苍  
【摘要】:亲和膜色谱是将分离膜与亲和色谱相结合的新型分离技术,具有膜分离快速对流传质的特征,通过配基的选择可同时使之兼具生物分子的识别功能,可一步实现生物大分子的分离纯化。聚丙烯微孔膜具有稳定性好、膜孔易调及成本低廉等优点,是一类具有重要工业化应用潜力的高分子分离膜材料。糖类可与蛋白质发生特异性识别作用,且通过糖苷集簇效应实现对不同蛋白质的选择性识别。因此,将糖基固定于聚丙烯分离膜表面有望发展一种新型的亲和膜色谱,用于蛋白质的高纯度、高选择性及高效快速分离与提纯。 文献报道的表面糖基化方法种类繁多,但所涉及的化学反应效率普遍偏低,造成糖基密度低,不利于糖苷集簇效应的形成,从而降低糖基与蛋白质间的选择性及结合强度。发展一种安全可靠、反应效率高的化学偶联技术是构建糖基化亲和膜的先决条件。点击化学反应具有反应效率高、立体专一性好等优点。将点击化学反应用于聚合物膜表面糖基化的构建,可方便制得高密度的糖基化层,形成“糖苷集簇效应”,提高糖基对蛋白质的识别性能及结合强度。 本论文建立了多种糖基化方法,结合点击化学反应的高效性在聚丙烯微孔膜表面构建高密度糖基化层,具体研究工作从以下几个方面展开: 1、以二苯甲酮(BP)为引发剂,采用紫外光辐照接枝聚合方法在聚丙烯微孔膜表面接枝丙烯酸,随后与2-氨基葡萄糖盐酸盐反应,制备葡萄糖糖基化的聚丙烯微孔亲和膜。优化糖基化反应条件可提高表面糖基密度,结果显示糖基化效率低于40%,糖基密度较低,不能有效形成糖苷集簇效应,致使对蛋白质的识别效果较差。 2、为提高表面糖基密度促进糖基化亲和膜与蛋白质形成糖苷集簇效应,首先构建炔基修饰的聚丙烯微孔膜。采用Cu(Ⅰ)催化的叠氮/炔点击化学反应将叠氮糖固定于表面,构建高密度的葡萄糖糖基化聚丙烯微孔亲和膜,表面糖基密度可超过10μmol/cm2。蛋白质的特异性识别性能研究显示,当糖基密度超过0.2μmol/cm2时,膜表面可产生强烈的糖苷集簇效应,实现对凝集素Con A的特异性识别。然而点击化学反应生成的三唑环对蛋白质具有非特异性吸附能力。 3、采用巯/炔点击化学反应将炔基修饰的聚丙烯微孔膜进行高密度糖基化修饰。通过蛋白质识别性能研究,证明此方法构建的葡萄糖糖基化聚丙烯微孔膜对Con A具有良好的识别能力。此外,巯/炔点击反应生成的硫醚键可以避免蛋白质的非特异性吸附。 4、为避免羧基对蛋白质的非特异性吸附的影响,在表面直接构建炔基修饰层。首先合成甲基丙烯酸(三甲基硅基)丙炔醇酯(TMSPA)单体,借助等离子预处理技术,在紫外光辐照下进行TMSPA的表面接枝聚合。采用巯/炔点击反应在炔基修饰的聚丙烯微孔膜表面构建高密度糖基化层。由于巯基糖的空间位阻效应导致炔基难以进行双分子加成反应,致使点击反应效率最高约为55%。蛋白质特异性识别研究表明葡萄糖糖基化聚丙烯微孔膜对Con A具有良好的识别能力。通过动态吸附研究,初步实现葡萄糖糖基化聚丙烯亲和膜对Con A的选择性识别分离。 5、将叠氮/炔点击化学反应构建的高密度葡萄糖糖基化聚丙烯微孔膜作为亲和分离膜,选择性动态吸附蛋白质。结果表明葡萄糖糖基化的亲和膜可选择性吸附Con A,其结合容量随糖基密度的增加而提高,吸附Con A的亲和膜可采用1 M的HAc进行洗脱,重复使用性好。
【学位授予单位】:浙江大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:TQ325.14

手机知网App
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前3条
1 杨谦,徐志康,Mathias Ulbricht;聚丙烯微孔膜表面修饰的葡聚糖固定化研究[J];高等学校化学学报;2005年01期
2 贾永林;李斌;邴柏春;;2,3,4,6-四-O-乙酰基-1-巯基-吡喃葡萄糖的合成[J];化学与粘合;2007年03期
3 卢丽丽;肖敏;赵晗;王鹏;钱新民;;1-氟代糖在化学-酶法合成糖类中的应用[J];有机化学;2006年12期
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 胡梦欣;聚丙烯微孔膜的高密度糖基化及其应用基础研究[D];浙江大学;2009年
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 吴莉莉;糖基化烯类单体的合成及其聚合物纳米纤维的性能研究[D];浙江大学;2008年
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 王陆珠;;某染料废水处理改造初探[J];安徽化工;2006年06期
2 陈全胜,杨普;膜分离技术及其在农产品加工中的应用[J];安徽农业科学;2003年06期
3 李慧蓉;王利强;吕小妹;;膜分离技术回收大豆乳清废水中活性成分的研究进展[J];安徽农业科学;2009年23期
4 李黎;王志强;陈文清;;MBR膜污染形成机理及控制膜污染研究进展[J];安徽农业科学;2012年01期
5 吴少辉;彭芳;高鹏飞;巫秀美;何苗;张成桂;刘光明;;膜超滤分离美洲大蠊抗肿瘤活性部位小分子肽的研究[J];安徽农业科学;2012年04期
6 张蓝月;刘念;叶向斌;;天然色素的萃取与纯化[J];北方园艺;2010年20期
7 张新妙,王湛,刘美;死端微滤通量预测模型的研究进展[J];北京工业大学学报;2005年02期
8 叶晓;姚金苗;王湛;刘兴春;刘德忠;张虎;李兆辉;;多元线性回归模型在死端微滤比阻中的应用[J];北京工业大学学报;2007年11期
9 王湛;姚金苗;叶晓;储金树;崔彦杰;梁艳莉;张虎;赵新奇;李兆辉;;操作条件对超滤姬松茸多糖的影响[J];北京工业大学学报;2008年10期
10 曹金朋;董慧茹;;MB-SiMo-OP光度法测定水中痕量活性二氧化硅的研究[J];北京化工大学学报(自然科学版);2005年06期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 刘文娟;郭诗琪;王秀菊;王立国;;热致相分离法制备聚偏氟乙烯微孔膜的研究进展[A];2011中国环境科学学会学术年会论文集(第二卷)[C];2011年
2 孙文敏;;反渗透膜的化学清洗[A];中国膜科学与技术报告会论文集[C];2003年
3 李泽全;杜军;范兴;陶长元;;PTh/PVDF复合膜的原位合成及其气体渗透性的研究[A];中国膜科学与技术报告会论文集[C];2003年
4 朱宝库;魏艳飞;魏秀珍;徐又一;;戊二醛交联超支化聚(胺-酯)膜的制备及渗透汽化性能[A];膜分离技术在石油和化工行业中应用研讨会论文集[C];2006年
5 钟常明;郎万中;许振良;管爱国;朱亚平;;纳滤膜法脱除干法腈纶纺丝洗涤废水中非挥发组分的研究[A];膜分离技术在石油和化工行业中应用研讨会论文集[C];2006年
6 刘有智;张红宇;谷磊;申红艳;;无机陶瓷膜处理含超细微粒乳化悬浮液工艺研究[A];膜分离技术在石油和化工行业中应用研讨会论文集[C];2006年
7 汪勇;黄才欢;张志森;欧仕益;;陶瓷膜超滤大豆混合油脱胶的研究[A];第二届全国膜分离技术在食品工业中应用研讨会论文集[C];2006年
8 肖文军;刘仲华;龚志华;肖力争;蔡利娅;;茶叶深加工中微滤污染膜高效再生技术研究[A];第二届全国膜分离技术在食品工业中应用研讨会论文集[C];2006年
9 王建宇;朱宝库;徐又一;;两亲性ABA型“刷子-嵌段-刷子”聚合物的合成及其对聚砜微滤/超滤膜的表面改性[A];第三届中国膜科学与技术报告会论文集[C];2007年
10 马敬环;孙宝红;周军;马若新;;海水体系纳滤膜截留性能研究[A];第三届中国膜科学与技术报告会论文集[C];2007年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 徐荣燕;嗜热真菌糖苷酶的基因克隆、表达与分子改造[D];山东农业大学;2010年
2 宋广磊;黑木耳多糖的分离制备及生物活性研究[D];浙江工商大学;2011年
3 代正伟;聚丙烯分离膜的亲水化[D];浙江大学;2010年
4 仰云峰;聚丙烯微孔膜的表面亲水化及其抗污染性能研究[D];浙江大学;2010年
5 赵强;聚电解质络合物的可加工性及其功能材料的构建基础[D];浙江大学;2010年
6 韩俊南;杂萘联苯聚芳醚砜中空纤维纳滤膜的研究[D];大连理工大学;2011年
7 韩润林;杂萘联苯聚芳醚砜分离膜的制备及应用研究[D];大连理工大学;2011年
8 秦绪平;微凝胶复合高强度水凝胶的制备及性能研究[D];山东大学;2011年
9 侯晓川;镍钼矿冶炼烟尘中硒的提取新工艺及其机理研究[D];中南大学;2011年
10 张志东;辽河稠油污水处理技术研究与应用[D];东北石油大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 曹星辉;不同结构水钠锰矿催化氧化对苯二酚腐殖化反应的特点[D];华中农业大学;2010年
2 王云英;聚氨酯中空纤维阻尼材料的制备工艺及性能研究[D];南昌航空大学;2010年
3 王倩;疏水性SBA-15/PDMS杂化膜制备及分离乙醇/水的研究[D];山东科技大学;2010年
4 谢荣华;聚氯乙烯超滤膜亲水性改性及水过滤性能研究[D];哈尔滨工程大学;2010年
5 贺兆伟;曝气生物滤池技术在炼油污水回用中的应用[D];大连理工大学;2009年
6 段晓杰;纳滤膜的荷电性能及对盐水溶液体系的截留机理研究[D];中国海洋大学;2010年
7 潘振江;集成膜技术深度处理油田采油废水研究[D];中国海洋大学;2010年
8 刘蕾蕾;三醋酸纤维素正渗透膜的制备与性能研究[D];中国海洋大学;2010年
9 郑伟萍;PVDF/PAN/有机纳米粘土杂化中空纤维超滤膜的制备与表征[D];中国海洋大学;2010年
10 宋跃飞;超滤—纳滤集成膜法海水软化工艺的实验研究[D];中国海洋大学;2010年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 魏俊富,孔志云,张政朴;缩醛型表面活性剂的研究进展[J];日用化学工业;2003年04期
2 王钒,宋国强,陈群,张灏,王忱;交联烯丙基葡聚糖凝胶的合成及其性能[J];高分子材料科学与工程;1997年01期
3 曾盈,孔繁祚,严正桃;多效价树枝状糖苷配体的合成[J];化学进展;2005年01期
4 李俊杰;杨谦;吴健;代正伟;徐志康;;一种新颖丙烯腈基含糖共聚物的合成和表征[J];化学通报;2006年10期
5 孟建文,谭业邦,王成威;含糖聚合物在生物医药领域的应用[J];山东生物医学工程;2002年04期
6 杨雪鹏,杨寿钧,韩北忠,金城;非解朊栖热菌HG102耐热β-糖苷酶的结构与功能研究[J];生物工程学报;2005年01期
7 董聿生,梁峰,余向阳,郭立安,常建华;新型磁性葡聚糖亲和吸附剂的制备及在尿激酶纯化中的应用[J];色谱;2001年01期
8 刘惠英,杨振海,傅莎莉,李宝睿;1'-O-(苯甲酰)-2',3',4',6'-四-O-乙酰-β-D-吡喃葡萄糖类化合物合成[J];武汉大学学报(自然科学版);1994年02期
9 赵瑾,宋金勇,王超杰;4-N-茄呢基氨基苯甲酸糖酯的合成[J];有机化学;2003年07期
10 梁高林,胡名扬,金坚;肝半乳糖受体显像剂前体氰甲基硫苷的合成[J];中国医药工业杂志;1997年01期
中国博士学位论文全文数据库 前2条
1 黄小军;聚丙烯腈膜分离材料的磷脂化改性[D];浙江大学;2006年
2 杨谦;聚丙烯微孔膜表面的糖基化研究[D];浙江大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 李俊杰;糖基化烯类单体的合成及其丙烯腈共聚物研究[D];浙江大学;2006年
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 杨谦,徐志康,Mathias Ulbricht;聚丙烯微孔膜表面修饰的葡聚糖固定化研究[J];高等学校化学学报;2005年01期
2 赵春田,祝巍,张贤,侯建安,徐懋;聚丙烯微孔膜表面的空气等离子体处理[J];功能高分子学报;1996年03期
3 冉少锋,祝巍,徐懋;泡压-滤速法研究聚丙烯微孔膜的孔径及其分布[J];高分子学报;1999年01期
4 尹艳红;王辉;刘玉霞;杨书廷;;聚丙烯微孔膜表面接枝聚合丙烯酰胺的改性研究[J];膜科学与技术;2008年01期
5 万灵书;孟祥麟;仰云峰;田静;徐志康;;聚异丙基丙烯酰胺接枝聚丙烯膜表面接触角温敏性“黏滑”行为研究[J];中国科学:化学;2010年04期
6 臧亚南,丁恩勇;聚丙烯微孔膜的研究进展[J];现代化工;2004年10期
7 胡兵;;聚丙烯微孔膜表面的气体等离子体改性[J];池州学院学报;2011年03期
8 郑继,储凤,周贵恩,史观一;聚丙烯微孔膜的等离子体接枝聚合改性[J];功能高分子学报;1991年03期
9 王标;刘兰勤;唐照奇;黄磊;宇海银;;聚丙烯微孔膜表面的可控接枝改性[J];天津工业大学学报;2009年05期
10 赵春田,张贤,候建安,徐懋;聚丙烯微孔膜基渐变聚合物的制备、结构与性能的研究[J];功能高分子学报;1995年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 徐志康;;聚丙烯微孔膜的表面工程:从实践到理论[A];2011年全国高分子学术论文报告会论文摘要集[C];2011年
2 宫晓娜;朱利平;徐又一;程梁;易砖;王建华;;嵌入-包埋法对聚丙烯微孔膜表面亲水化改性的研究[A];2011年全国高分子学术论文报告会论文摘要集[C];2011年
3 罗本喆;张军;王晓琳;温建志;;复合成核剂对热致相分离法制备聚丙烯微孔膜的影响[A];2005年全国高分子学术论文报告会论文摘要集[C];2005年
4 王苍;吴健;刘振梅;方艳;徐志康;;点击化学法构建高密度糖基化聚丙烯微孔亲和膜[A];2009年全国高分子学术论文报告会论文摘要集(下册)[C];2009年
5 岳强;宁桂玲;林源;居鸣丽;;水合氧化铝表面接枝改性与有机聚合研究[A];2003年纳米和表面科学与技术全国会议论文摘要集[C];2003年
6 叶新山;;供体预活化策略在立体选择性糖基化反应中的应用[A];2008年全国糖生物学学术会议论文摘要[C];2008年
7 孟德颖;万昌秀;姚红卫;赵强;吴刚;;PET膜表面接枝生物活性短肽方法的研究[A];第九届全国生物材料学术会议(CBMS-9)论文集[C];2002年
8 吕晓龙;;新型复合中空纤维分离膜[A];复合材料:生命、环境与高技术——第十二届全国复合材料学术会议论文集[C];2002年
9 李建华;徐又一;朱利平;;表面引发原子转移自由基聚合制备聚偏氟乙烯温敏“开关”膜[A];2009中国功能材料科技与产业高层论坛论文集[C];2009年
10 杨万泰;王勤;孟辉;尹梅贞;李会玲;井本欣;刘连英;;光致可控活性自由基聚合方法及用途[A];2009年全国高分子学术论文报告会论文摘要集(上册)[C];2009年
中国重要报纸全文数据库 前5条
1 陈希荣;传统包装材料的纳米改性技术[N];中国包装报;2007年
2 褚良银;微囊膜:交叉学科发展新热点[N];中国化工报;2002年
3 孙宁华 周玉玲;我国丝蛋白人工皮肤研究取得突破[N];人民日报海外版;2003年
4 韩秀山 林作川 张天开;纳米膨润土(蒙脱土)在橡胶中的应用[N];中国建材报;2007年
5 CUBN记者 陈文喜;三大因素阻碍燃料电池规模应用[N];中国联合商报;2011年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 王苍;高密度糖基化聚丙烯微孔亲和膜的点击化学制备及其蛋白质分离研究[D];浙江大学;2011年
2 仰云峰;聚丙烯微孔膜的表面亲水化及其抗污染性能研究[D];浙江大学;2010年
3 邓红涛;脂肪酶在聚丙烯微孔膜上的固定化研究[D];浙江大学;2005年
4 戴清文;聚电解质表面修饰聚丙烯微孔膜的研究[D];浙江大学;2004年
5 刘振梅;聚丙烯微孔膜表面的生物相容性改性研究[D];浙江大学;2004年
6 胡梦欣;聚丙烯微孔膜的高密度糖基化及其应用基础研究[D];浙江大学;2009年
7 寇瑞强;烯丙基葡糖修饰聚合物分离膜的研究[D];浙江大学;2003年
8 宇海银;聚丙烯微孔膜表面的抗污染性改性研究[D];浙江大学;2006年
9 杨谦;聚丙烯微孔膜表面的糖基化研究[D];浙江大学;2007年
10 汤建新;活版印刷DNA芯片原位合成新方法及新基材研究[D];东南大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 狄玲;糖基化亲和膜的制备及其除硼性能研究[D];浙江大学;2011年
2 辛田;热致相分离法制备聚丙烯微孔膜及其表征[D];华东理工大学;2011年
3 周灵君;基因芯片原位合成新材料和结果分析新方法研究[D];南京师范大学;2003年
4 田静;聚(N-异丙基丙烯酰胺)改性聚丙烯微孔膜的制备及其表面性能研究[D];浙江大学;2008年
5 唐亮;紫外辐射接枝制备双重响应型聚丙烯微孔膜[D];大连理工大学;2006年
6 张振宇;溶析法制备聚合物微孔材料的研究[D];上海交通大学;2007年
7 商静芬;疏水材料的制备及环境污染物回收应用研究[D];湖南师范大学;2012年
8 王俊杰;无机纳米粒子的表面接枝聚合及其分散性的研究[D];东华大学;2005年
9 王川艳;聚丙烯隔离膜加工成型的研究[D];北京化工大学;2011年
10 栾宝勇;聚对苯二甲酸丁二醇酯纳米复合材料的研究[D];南京理工大学;2004年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026