收藏本站
《浙江大学》 2009年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

仔猪断奶腹泻性大肠杆菌的多重耐药性、毒力因子分布及特异性蛋黄抗体药效的研究

姜中其  
【摘要】:仔猪断奶腹泻(post-weaning diarrhea, PWD)是危害养猪业的重要疾病,主要表现为腹泻和体重增加减慢,严重时仔猪脱水、酸中毒甚至死亡。PWD是一种多因子参与的复杂病症,但大肠杆菌在一系列复杂的生物学过程中是决定性的环节。在不同国家和地区、不同年代,PWD病原性大肠杆菌毒力因子可有较大差异。准确诊断和辨别粘附素等毒力因子类型是有效免疫防治PWD的前提。分离纯化病原菌毛等毒力因子作为抗原免疫产蛋母鸡防治肠道感染是近年来国外学者研究的热点之一。国内在PWD病原性大肠杆菌多重耐药性、毒力因子流行病学和PWD模型建立及菌毛特异性IgY的药效评价及IgY的合理应用方案等方面的研究方面报道很少。 本研究直肠棉拭采集浙江地区不同规模化猪场仔猪断奶腹泻病料,应用微生物学技术进行细菌分离培养鉴定,并采用大肠杆菌专属引物通过PCR体外扩增确认,进一步通过小鼠致病性试验得到75株病原性大肠杆菌。玻板凝集试验O抗原检测结果表明分离鉴定病原性大肠杆菌O抗原至少覆盖11种血清型,其中0149、0139、08为优势血清型。 采用WHO推荐的Kirby-Bauer法,以大肠杆菌ATCC25922为质控菌,以CLSI的临界浓度为判断标准,对分离的病原性大肠杆菌开展常用抗菌药物的耐药性监测,并采用WHONET进行数据分析。结果表明,病原性大肠杆菌耐药性普遍,其中对氯霉素(100.0%)、复方新诺明(86.7%)、多西环素(82.3%)、链霉素(81.8%)的耐药性很高,对羧苄西林、多粘菌素B及庆大霉素、环丙沙星及诺氟沙星的耐药率也较高,其耐药率分别高达69.6%和66.7%、63.6%,56.4%和61.5%。66株大肠杆菌共有36种耐药谱型,绝大多数为多重耐药。对5种抗菌药物耐药的菌株占比例最大(18.18%),其次是对6种抗菌药物耐药(15.15%)和对9种抗菌药物耐药(12.12%)的菌株;链霉素与多类其他抗菌药存在一定的交叉耐药性。不同规模化猪场病原大肠杆菌菌株耐药性存在一定差异。结果提示,浙江地区规模猪场仔猪断奶腹泻大肠杆菌的耐药性以多重耐药为主,且对抗菌药物的耐药现象已相当严重,在临床选用药物进行治疗时,应充分考虑菌株的耐药性问题,以免延误病情造成治疗失败。 采用PCR检测Ⅰ型、Ⅱ型整合酶和耐药基因盒并测序分析。结果表明,Ⅰ型整合酶阳性菌占检测菌株的88.0%(66/75),Ⅱ型整合酶阳性菌占检测菌株的17.3%(13/75)。所有Ⅰ型整合酶阳性菌株均对2种以上抗菌药物耐药,并且检测到Ⅱ型整合酶的菌株中有84.6%(11/13)也检测到Ⅰ型整合酶,提示1株细菌可同时携带多个整合子。Ⅰ型整合酶阳性细菌耐药基因盒检出率为46.7%(35/75),未检测到Ⅱ型整合子基因盒。随机取18株耐药基因盒阳性菌,体外扩增出产物经测序分析,结果表明,250bp、1.1Kb、1.6Kb、1.7Kb和2.0Kb等5种基因盒片段以7种组合方式存在,含有aadA基因和dfrA等耐药基因,分别编码对链霉素和磺胺类药物的耐药性,这与耐药表型检测中分离菌多对这两类药物耐药相符。研究提示,Ⅰ型整合子在介导规模化猪场PWD病原性大肠杆菌多重耐药中有重要作用。 应用菌毛单因子血清对分离菌进行玻板凝集试验和多重PCR技术分析粘附素及肠毒素类型。结果表明,PWD病原性大肠杆菌中产肠毒素大肠杆菌(ETEC)占病原性大肠杆菌分离总数的67.92%(36/53);粘附素F4和F18分别占总检测菌株数的24.53%(13/53)和28.30%(15/53);肠毒素中产STa、STb、STa+STb、LT和SLT-2e分别占总检测菌株数的30.19%(16/53)、35.85%(19/53)、18.9%(10/53)、1.89%(1/53)和9.43%(5/53)。采用PCR对F4、F18亚型的进一步分析表明,大肠杆菌分离株F4ac占76.9%(10/13),F4ab占23.1%(3/10);F18分离株均为F18ac(15/15)。研究表明,浙江地区PWD病原性大肠杆菌以产肠毒素型为主,主要毒力因子包括粘附素F4、F18和肠毒素STa、STb。 以PWD病原性大肠杆菌优势菌F4菌毛蛋白为抗原,辅以弗氏佐剂,制备免疫原免疫产蛋母鸡生产特异性蛋黄抗体。结果表明,加强免疫后3w,弗氏佐剂组卵黄中效价可达4.41g,在弗氏佐剂的辅助下能维持时间长达9w。卵黄中效价稍低于血清,但在高水平维持时间较长,而PBS组无论卵黄中还是血清中抗体效价均低于弗氏佐剂组。研究还表明,以10μg/ml(1ml/只)剂量免疫蛋鸡,足以获得高效价的抗体。进一步采用喷雾干燥、冷冻干燥和沸腾干燥等方法成功制备高免全蛋粉,经小白鼠急性毒性试验表明属实际无毒物质。体外抑菌试验表明,抗体效价≥1:3000时,IgY能在37℃条件下8h内完全抑制F4+ETEC(菌液浓度为104cfu/ml)的生长繁殖。 采用杜长大三元杂交断奶仔猪,通过经口灌服ETEC临床分离强毒株,诱导仔猪发生腹泻,建立PWD模型,并考察上述方法研制的特异性蛋黄抗体的药效。试验分二批进行。试验一,采用F4+和F18+ETEC混合攻毒,仔猪按体重窝别随机分为①IgY组②(IgY+头孢唑啉+大观霉素)组③阳性对照组。试验二,采用F4+ETEC攻毒。仔猪按体重窝别随机分为①IgY组②大观霉素组③阳性对照组。攻毒后每天采取新鲜粪样用平板菌落计数法测定大肠杆菌数。各样本随机取10个菌落采用三重PCR方法测定攻毒菌的比例。结果表明,混合感染两种ETEC后,第1-6d口服IgY试验组粪便评分(日平均)为0.43,显著(P0.05)低于阳性对照组(1.43)和(IgY+头孢唑啉+大观霉素)组(1.36)。试验二中,F4+ETEC攻毒后第1-6d口服IgY试验组粪便评分(日平均)为0.86,显著(P0.05)低于阳性对照组(1.57)和大观霉素组(1.50):粪便中大肠杆菌总数及攻毒菌的排出量方面,无论是混合感染还是单独感染,IgY组仔猪均低于阳性对照组,且排毒持续时间短。本研究提示,无论标准株还是分离株,F4菌毛均具有良好的免疫原性,结合弗氏佐剂按一定程序免疫母鸡,能诱导产生高效价的抗体且能持续较长时间并转移至蛋黄中。本试验建立的PWD模型操作简便,重复性好,能用于深入研究PWD发生发展机理和评价抗仔猪断奶腹泻的药效。三重PCR具有特异性和较好的灵敏度,能快速检测攻毒菌在肠道的排出动态变化。特异性抗体均能有效地控制腹泻的发生发展,有效口服剂量为每次0.3g/kg.bw,3次/d,连续应用3-5d。宜与抗F18菌毛特异性抗体联合应用,但不宜与抗菌药物合用。 以上结果为深入探索PWD病原性大肠杆菌的致病机理、耐药机理和耐药控制,特异性IgY被动免疫防治PWD的研究奠定了良好基础。
【学位授予单位】:浙江大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2009
【分类号】:S858.28

【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 李显志,张丽,王浴生;细菌多重抗生素耐药性及其分子生物学机制——以大肠杆菌和铜绿假单胞菌为例[J];国外医药(抗生素分册);1998年01期
2 范春,牛其昌,王颖;铜绿假单胞菌生物膜耐药性机制及防治[J];国外医药(抗生素分册);2004年05期
3 林妙顺;姜中其;;仔猪断奶腹泻大肠杆菌耐药质粒及酶切图谱分析[J];黑龙江畜牧兽医;2007年01期
4 宋立;宁宜宝;沈建忠;范学政;张纯萍;杨承槐;韩剑峰;;中国不同年代食品动物大肠杆菌耐药性调查研究[J];中国科学(C辑:生命科学);2009年07期
5 马红霞,邓旭明,李乾学,于守平,阎继业;吉林省动物病原性大肠杆菌的耐药性监测试验[J];吉林农业大学学报;2001年04期
6 陈杖榴,吴聪明,蒋红霞,廖晓萍,魏秀丽,丁焕中,曾振灵;兽用抗菌药物耐药性研究概况[J];四川生理科学杂志;2005年04期
7 赵主江,黄诚,黄亚红,陈建秀,周智爱,梁婉琪,潘爱虎,张大兵;K88菌毛蛋白亚基基因克隆、表达及重组蛋白抗血清制备[J];上海农业学报;2000年02期
8 成大荣,徐建生,孙怀昌,高崧;大肠杆菌F18菌毛及其亚型的PCR鉴定[J];微生物学报;2004年05期
9 吴清平;吴葵;叶应旺;董晓晖;张菊梅;;群体感应及其在动物病原菌致病中的作用[J];微生物学报;2009年07期
10 吴聪明,陈杖榴,曾振灵;猪场大肠杆菌Ⅰ型整合子及其基因盒的分子流行病学研究[J];畜牧兽医学报;2005年09期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 常晓松;舒为群;曹佳;;水环境中耐药菌的研究进展[J];癌变.畸变.突变;2007年03期
2 崔江;刘玉庆;侯渌恰;孙彩云;;单复方中草药定量测定及其对大肠杆菌敏感性试验[J];山东农业科学;2006年03期
3 李云;蔡亚娜;张士栋;王庆艳;杜加法;刘玉庆;赵淑梅;;不同宿主大肠杆菌对15种抗生素抗药性差异研究[J];山东农业科学;2009年04期
4 倪莉;王豪举;程光胜;刘华栋;;肉鸡鸡毒支原体和大肠杆菌混合感染的诊治[J];安徽农学通报(上半月刊);2009年17期
5 蒋建军,王鹏雁,剡根强,康立超;集约化兔场高致病性痢疾志贺菌的分离与鉴定[J];安徽农业科学;2005年09期
6 王丽荣;董永军;梁美兰;;牛病毒性腹泻病毒的病原学与诊治[J];安徽农业科学;2005年12期
7 易力;汪洋;祖恩普;陈万光;刘涛;;吉他霉素对断乳仔猪肠道菌群的影响[J];安徽农业科学;2006年01期
8 杭柏林;李杰;王丽荣;梁美兰;王承民;;鸡源致病性大肠杆菌分离株的药敏试验及灭活疫苗制备[J];安徽农业科学;2006年22期
9 朱金凤;王汝都;;山西省鸡源大肠杆菌耐药性的监测[J];安徽农业科学;2007年25期
10 张则斌;王芳;徐为中;范志宇;何孔旺;高成华;王平生;;一例波杂山羊葡萄球菌病与大肠杆菌病混合感染的初步诊断[J];安徽农业科学;2007年36期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 陈珍;万春和;曾亮明;朱春华;林甦;刘斌琼;林羽;黄瑜;;H9N2亚型禽流感安徽分离株CK/AH/1/10的分子特征[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集[C];2012年
2 毛立;李文良;严少华;钟声;郭俊尧;江杰元;;山羊流产病料中牛病毒性腹泻病毒的检测[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集[C];2012年
3 刘洋;布日额;吴金花;郭闯;锡林高娃;刘燕;;内蒙古中东部地区乳源性大肠杆菌PCR检测及其耐药性分析[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集[C];2012年
4 白华;苏红;李靖冉;齐静;胡明;骆延波;朱小玲;刘玉庆;吴聪明;;新型吸管式药敏检测盒的应用及山东省动物源病原菌抗药性监测网络的构建[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集[C];2012年
5 徐慧;韦莉;佟瑞平;龚玉梅;王宏俊;孙惠玲;张培君;;溶血性曼氏杆菌PCR诊断试剂盒的研究[A];微生物与人类健康科技论坛论文汇编[C];2009年
6 李喜旺;董奎龙;彭玉伟;;中药“牛孕灵”冲剂治疗奶牛不孕症的临床疗效总结[A];中国奶业协会年会论文集2008(上册)[C];2008年
7 邬纯鸿;黄毅;王文莉;钟代彬;吴广安;方艳军;;现代化奶牛场乳房炎病因调查及其防治[A];中国奶业协会年会论文集2009(上册)[C];2009年
8 葛文霞;柳旭伟;张旭峰;;克拉玛依市农业开发区H5亚型禽流感免疫抗体水平的检测[A];2010植物提取物与营养及应用技术交流研讨会论文集[C];2010年
9 孔繁德;王荣;陈琼;吴德峰;徐淑菲;;多重RT-PCR一步法技术同时检测猪瘟病毒和蓝耳病病毒方法的建立以及初步应用[A];第十届中国科协年会论文集(三)[C];2008年
10 刘志军;王国栋;潘耀谦;龙塔;吴亚涛;;猪链球菌疫苗SD03株的培养条件[A];河南省畜牧兽医学会第七届理事会第二次会议暨2008年学术研讨会论文集[C];2008年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 姚美玲;H9N2亚型禽流感病毒气溶胶发生与传染机制及其感染SPF鸡的特点[D];山东农业大学;2010年
2 陈林;铜绿假单胞菌内在耐药性相关基因的筛选及研究[D];西北大学;2010年
3 黎满香;感染猪的粪肠球菌的分离鉴定及部分特性和诊断方法研究[D];湖南农业大学;2010年
4 林雁冰;金属矿区及污水灌溉区抗重金属放线菌的筛选及吸附机理研究[D];西北农林科技大学;2010年
5 闫振贵;不同途径免疫NDV弱毒苗诱导鸡体黏膜和系统免疫反应的研究[D];山东农业大学;2011年
6 贺常亮;治疗鸡大肠杆菌病的中药方剂筛选及其作用机理研究[D];吉林大学;2011年
7 李素;猪瘟病毒感染血管内皮细胞的差异蛋白质及细胞因子表达变化分析[D];吉林大学;2011年
8 季华员;猪产肠毒素型大肠杆菌F41受体基因的精细定位与鉴别[D];江西农业大学;2011年
9 武瑞兵;饲喂肉牛抗菌药对牛源大肠杆菌Ⅰ型整合子相关的耐药性影响的研究[D];内蒙古农业大学;2011年
10 羊云飞;牦牛、牧民源大肠杆菌分离鉴定、耐药基因检测、PFGE分析及耐药性传递的研究[D];四川农业大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 罗晶晶;斑点叉尾鮰生鱼片加工过程中的微生物变化[D];华中农业大学;2010年
2 张先波;一个大白猪群血液参数健康标准的制定及BCL10基因多态性与部分血液参数的关联分析[D];华中农业大学;2010年
3 刘新军;表达布氏杆菌sodc基因的重组沙门氏菌的构建及不同种布氏杆菌鉴别PCR检测方法的建立[D];华中农业大学;2010年
4 王延昭;利用免疫磁珠技术富集肠炎沙门氏菌和金黄色葡萄球菌[D];华中农业大学;2010年
5 严琦;副猪嗜血杆菌与巨噬细胞相互作用的初步研究[D];华中农业大学;2010年
6 王艳伟;PRRSV感染激活RANTES产生的信号通路研究[D];华中农业大学;2010年
7 崔翔;动物可食组织中安眠酮残留的ELISA检测方法研究[D];华中农业大学;2010年
8 朱雪冰;志贺菌诱导耐药相关基因序列克隆与测序[D];郑州大学;2010年
9 王秀云;鸡传染性法氏囊病病毒山东株的分离鉴定及免疫预防研究[D];山东农业大学;2009年
10 都振玉;潍坊地区鸭传染性浆膜炎病原体的分离鉴定与疫苗制备应用研究[D];山东农业大学;2009年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 吴文福,巫月生,李嘉爱,赖月辉,罗映霞,邹永新;应用微量凝集试验检测鸡抗猪大肠杆菌抗体方法的探索[J];广东畜牧兽医科技;2002年01期
2 张小林,李家泰;主动外排系统acrAB在临床分离大肠杆菌中的分布和表达[J];中国临床药理学杂志;1999年03期
3 小林宏行;细菌菌膜的基础与临床[J];中国临床药理学杂志;1999年04期
4 吴永乐;铜绿假单胞菌主动泵出系统在多重耐药机理中的作用[J];国外医药(抗生素分册);1998年01期
5 周坚芬;细菌生物被膜的形成及治疗[J];国外医药(抗生素分册);1998年01期
6 王睿,方向群;细菌生物被膜相关感染的特点与防治[J];国外医药(抗生素分册);1998年01期
7 胡兴戎;糖肽类抗生素的作用机制及肠球菌的糖肽耐药机制[J];国外医药(抗生素分册);2001年03期
8 赵静,杨汉春;猪源大肠杆菌耐药性质粒的监测研究[J];黑龙江畜牧兽医;2000年01期
9 李一经,吕加平,杨庆霞;大肠杆菌油佐剂灭活苗免疫雏鸡抗体消长规律的研究[J];黑龙江畜牧兽医;1994年08期
10 李学伍,杨艳艳,郭成留,闫玉河,邓瑞广,张改平,郭军庆,李青梅,陈直,袁慧君;K_(88).K_(99)工程菌不同佐剂苗对鸡免疫效果的比较[J];河南农业科学;1997年11期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 任文凯;张美玲;刘建飞;陈林;彭远义;;猪水肿病大肠杆菌主要毒力因子的B细胞表位预测与验证[J];中国兽医杂志;2010年08期
2 鲍星;蔡俊鹏;;蛭弧菌消除鲜切香芹大肠杆菌试验[J];广东农业科学;2011年19期
3 罗见龙;;遗传工程学[J];甘肃农业科技;1978年01期
4 王尔中;质粒DNA对大肠杆菌转化条件的探讨[J];动物学报;1980年01期
5 雷凡东;;用番石榴叶治疗仔猪下痢[J];上海畜牧兽医通讯;1985年03期
6 ;基因工程[J];生物技术通报;1986年09期
7 ;基因工程[J];生物技术通报;1987年06期
8 杨正时;黄念君;;侵袭性大肠杆菌实验性豚鼠角膜感染与免疫[J];微生物学报;1987年03期
9 ;农业其它[J];生物技术通报;1989年01期
10 ;基因工程[J];生物技术通报;1989年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 毕振强;崔树玉;孙启华;温宪芹;孟蔚;关冰;;产志贺毒素大肠杆菌毒力因子、基因型及菌株相关性的研究[A];预防医学学科发展蓝皮书(2006卷)[C];2006年
2 欧阳萍;雷连成;吕爽;韩文瑜;;人溶菌酶基因在大肠杆菌中的融合表达及其生物学活性的研究[A];首届中国兽药大会——兽医生物制品学、兽医微生物学学术论坛论文集(2008)[C];2008年
3 王鹏雁;陈创夫;张再超;毛志福;任艳;;表达大肠杆菌K88ac-STⅡ的口服沙门氏菌活苗的动物免疫试验[A];中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十六次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十五次学术研讨会论文集[C];2009年
4 杨海华;;肉鸡支原体与大肠杆菌混合感染病例的综合诊治[A];“科技进步推进畜牧业现代化”科技论文集[C];2011年
5 杨玲丽;陈杖榴;;相同耐药谱大肠杆菌的脉冲场电泳分型研究[A];全国首届动物生物技术学术研讨会论文集[C];2004年
6 覃宗华;谢明权;蔡建平;艾哈迈德;彭新宇;魏文康;吴惠贤;;毒害艾美耳球虫广东株微线蛋白-2基因在大肠杆菌的表达[A];中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第五次代表大会暨第八次学术研讨会论文集[C];2004年
7 孙伟;潘石;李银丽;宋林峰;张毅;吴世法;;大肠杆菌与副流感病毒样品的原子力显微镜成像研究[A];大珩先生九十华诞文集暨中国光学学会2004年学术大会论文集[C];2004年
8 赵姗姗;张桂荣;于艳辉;张忆华;;头孢他啶诱导大肠杆菌内毒素释放的研究[A];中国化学会第十三届有机分析与生物分析学术会议论文集[C];2005年
9 刘昀;李冉辉;郑易之;;大豆PM2(LEA3)蛋白及22-氨基酸结构域在植物和大肠杆菌中的耐盐功能鉴定[A];2006年中国植物逆境生理生态与分子生物学学术研讨会论文摘要汇编[C];2006年
10 王小娟;陈向东;;属间细菌质粒自然遗传转化[A];第二届中国青年学者微生物遗传学学术研讨会论文集[C];2006年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 记者  陈超;大肠杆菌有望制成生物微型马达[N];科技日报;2006年
2 裴那;Oxoid公司推出快速确认食品中大肠杆菌的方法[N];中国医药报;2009年
3 沧州河间市畜牧水产局 程红利;一例肉鸡类巴氏杆菌和大肠杆菌混感的诊治[N];河北农民报;2011年
4 ;杆菌速灭[N];中国畜牧水产报;2001年
5 陈勇;菠菜生菜相继被“毒”,灌溉水是“凶嫌”[N];新华每日电讯;2006年
6 编译 王金元;新型相机用大肠杆菌做底片[N];北京科技报;2005年
7 记者 冯卫东;除菌香皂其实并不除菌[N];科技日报;2007年
8 冯立中;致泻大肠杆菌是腹泻病祸首[N];健康报;2006年
9 宁夏隆德县畜牧兽医站 罗志轶;中西医治疗獭兔球虫和大肠杆菌混合感染[N];江苏农业科技报;2007年
10 赵承渊 北京大学第一医院;“怪病”频出:医学昌明的代价?[N];大众科技报;2011年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 姜中其;仔猪断奶腹泻性大肠杆菌的多重耐药性、毒力因子分布及特异性蛋黄抗体药效的研究[D];浙江大学;2009年
2 王倩;聚羟基脂肪酸酯在大肠杆菌中的合成、降解以及分子改造[D];山东大学;2009年
3 郑宗宝;一体化生物加工过程进行大肠杆菌的半纤维素琥珀酸生产[D];天津大学;2012年
4 康振;大肠杆菌系统改造及琥珀酸和5-氨基乙酰丙酸合成途径的构建[D];山东大学;2011年
5 孙凤军;大肠杆菌生物膜的形成及其耐药质粒传递和调控的研究[D];第三军医大学;2009年
6 李晓敏;大肠杆菌氧胁迫适应性蛋白质组学、O-抗原研究和嗜热菌NG80-2醛脱氢酶分子生物学研究[D];南开大学;2010年
7 李丹;尿道致病性大肠杆菌进化机制的研究及检测方法的确立[D];南开大学;2010年
8 彭亮;聚磷酸盐激酶1在脑膜炎大肠杆菌K1株致病中的相关功能研究[D];南方医科大学;2011年
9 马毅;多个药物靶标蛋白在大肠杆菌无细胞系统高效表达及功能表征[D];华南理工大学;2012年
10 杨金丽;应用饲料油脂防控牛感染大肠杆菌0157:H7的研究[D];内蒙古农业大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 高鸿雁;大肠杆菌微生物传感器的性质及大肠杆菌代谢动力学研究[D];沈阳师范大学;2011年
2 孙超;水体中大肠杆菌的检测分析新方法研究[D];东华大学;2010年
3 赵阳;黑龙江省部分地区鹅大肠杆菌的分离鉴定[D];东北农业大学;2011年
4 王晓强;血小板反应素1活性cDNA片段的克隆与表达[D];四川大学;2005年
5 周璇;重组人IZ-CD40L在大肠杆菌中的高效表达和生物学活性的鉴定[D];苏州大学;2005年
6 陈文静;家禽养殖场废弃物农用安全性的初步研究[D];扬州大学;2010年
7 师震宇;禽致病性大肠杆菌鸭源分离株侵袭相关基因致病机理研究[D];南京农业大学;2011年
8 张建军;大肠杆菌F18菌毛操纵子fed基因的克隆、表达及其生物活性的初步研究[D];扬州大学;2005年
9 涂健;抗生素和内毒素诱发鸡肠源性大肠杆菌易位的实验研究[D];安徽农业大学;2005年
10 王雷;致断奶仔猪腹泻、水肿病大肠杆菌F18菌毛a、b、c因子单克隆抗体的研制及初步应用[D];扬州大学;2005年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026