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《浙江大学》 2011年
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硒代蛋氨酸对肉鸡的生物学效应及其分子机理研究

王永侠  
【摘要】:本课题研究了新型有机硒源-硒代蛋氨酸(Se-Met)及其不同构型对肉鸡生长性能、饲料利用和肉品质的影响,并从硒沉积、抗氧化和免疫功能、相关激素的合成与分泌、关键代谢酶活力和硒蛋白基因表达等方面探讨其主要作用机理,旨在阐明Se-Met对肉鸡的生物学效应,为其开发利用提供科学依据。 试验一DL-硒代蛋氨酸的有效性评价 本试验采用2因子×4水平完全随机设计,同比SS,研究DL-Se-Met作为硒源对肉鸡的有效性及最适添加量。选用7日龄Ross 308商品代公母混合雏840只,按照饲养试验要求分为7组,每组120只(含3个重复,每重复40只)。对照组为不加硒的基础日粮组(硒含量实测值0.04 mg/kg),试验组分别在基础日粮中添加0.05、0.15、0.25 mg Se/kg的亚硒酸钠(SS)和DL-Se-Met。试验为期42天。自由采食和饮水。饲养试验结束后,每重复选体重相近公鸡4只,进行屠宰试验,并取样分析。结果表明: (1) DL-Se-Met是有效的硒源补充剂,最适添加水平为0.15mg Se/kg。 (2)同比SS, DL-Se-Met显著提高了饲料转化率(P0.05),但对日增重和采食量均无显著影响(P0.05);提高了肉鸡宰后16h肌肉的红色色度Hunter a值和降低了24 h、48 h肌肉滴水损失率(P0.05);提高了血清和组织硒含量(P0.05);增高了血清和组织T-AOC和GSH含量及肌肉SOD活力,减低了组织MDA含量及肌肉和胰脏GPx活力(P0.05);提高了胸腺指数和血清IgA、IgG、IgM含量(P0.05);提高了血清TT3浓度并降低了血清TT4/TT3比值(P0.05)。 试验二硒代蛋氨酸的构效研究 本试验比较研究Se-Met同分异构体对肉鸡的生物学活性。选用1日龄Ross308商品代公母混合雏800只,按照饲养试验要求分为4组,每组200只(含5个重复,每重复40只)。4个处理组分别为SS对照组,D-、L-、DL-Se-Met试验组,均在基础日粮(硒含量实测值0.04 mg/kg)中添加0.15 mg Se/kg。试验为期42天。自由采食和饮水。饲养试验结束后,每重复选体重相近公鸡4只,进行屠宰试验,并取样分析。结果表明: (1)同比SS,不同构型Se-Met对肉鸡生长性能和饲料利用均无显著影响(P0.05),但显著降低宰后胸肌24h、48 h滴水损失率和提高血清和组织硒含量(P0.05)。 (2)同比SS,L-和DL-Se-Met均显著提高了血清和肝脏GSH含量、胰脏和肌肉T-AOC及降低了组织MDA含量(P0.05),升高了血清IgG含量(P0.05),提高了血清TT3浓度和降低了血清TT4/TT3比值(P0.05),提高了胰脏蛋白酶活力(P0.05),降低了肝肾TrxR1活力(P 0.05); D-Se-Met则显著提高了血清GSH含量和降低了肌肉MDA含量(P0.05),降低了肝肾GPx1和TrxR1活力及血清和肝脏SelP含量(P0.05)。 (3)互比Se-Met构型,DL型较L型显著提高了胰脏T-AOC,血清GSH、IgA和IgG含量,血清、肾脏和肌肉硒含量,而降低了肝脏MDA含量(P0.05);而D型较L、DL型降低了肝脏GPx1活力及GSH含量、肌肉和胰脏T-AOC、胰脏淀粉酶和蛋白酶活力(P0.05)。 (4)同比SS,不同构型Se-Met均显著提高了肝肾GPx1、TrxR1和SelP及肌肉SelW mRNA丰度,并皆呈DL D L型(P0.05)。 (5)首次成功克隆了鸡GPx1基因cDNA部分序列,长度为416 bp。试验三硒代蛋氨酸体外抗氧化能力研究 本实验采用鸡胚肾细胞原代培养,同比SS,研究不同构型Se-Met的体外抗氧化功能。结果表明: (1)同比SS,不同构型Se-Met均提高了肾细胞SOD、GSH和T-AOC及降低了MDA (P0.05),而L和D-Se-Met降低了GPx活力(P0.05)。 (2)互比Se-Met构型,DL型较L型显著提高了肾细胞GSH含量(P0.05),但D型较L、DL型降低了SOD和GPx活力及T-AOC水平,而增高了MDA含量(P0.05)。 试验四原代培养鸡胚肾细胞氧化应激模型建立 实验成功建立了体外鸡胚肾细胞氧化应激模型,通过研究表明H202对原代培养鸡胚肾细胞产生氧化应激的最适浓度和作用时间分别为100μmol/L和12h。试验五硒代蛋氨酸对肾细胞氧化损伤的保护作用研究 本试验采用4因子×7水平+1因子完全随机设计,研究SS和L、D、DL-Se-Met4种硒源对H202诱导损伤肾细胞的保护作用。结果表明:氧化应激使细胞抗氧化能力下降,表现为细胞GPx活力、T-AOC和GSH水平降低而MDA含量增高(P0.05):而Se-Met和SS均可减弱H202诱导的氧化损伤程度,就此同比正常对照组,DL-和L-Se-Met组抗氧化指标能恢复到与其同等水平,而D-Se-Met组却显著降低了GPx活力和T-AOC水平(P0.05),SS也显著降低了SOD活力、T-AOC和GSH水平,提高了MDA含量(P0.05);与此同时,DL-Se-Met较L-Se-Met还显著提高了细胞GSH含量(P 0.05), D-Se-Met较SS升高了T-AOC和GSH水平,降低了MDA含量(P0.05)。 上述结果提示:(1)不同构型Se-Met均是肉鸡有效的硒源补充剂,DL-Se-Met最适添加水平为0.15 mg Se/kg;(2)同比SS, DL和L-Se-Met可显著增加机体硒沉积量,提高抗氧化系统和免疫功能,促进甲状腺激素和关键代谢酶分泌,达到显著提高肉品质并有改善生长和饲料转化率的功效,D-Se-Met也具有促进硒沉积、增强抗氧化和提高肉品质的功能;(3)在抗氧化系统功能方面,总体趋势是Se-Met优于SS,且呈DLLD型。
【学位授予单位】:浙江大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:S831.5

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