收藏本站
《浙江大学》 2012年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

PP2A和JNK在TBT诱导的体内外细胞凋亡中的重要作用

张亚莉  
【摘要】:三丁基锡(Tributyltin, T B T)是具有极强毒性的环境污染物,已经有大量报道显示TBT能引起哺乳类动物免疫、神经、生殖以及肝毒性,而凋亡的诱导一直被认为是TBT产生毒性最主要的机制。以往大多数研究都将TBT诱导凋亡的机制集中在Bax和Bcl-2调控的线粒体凋亡途径。然而,凋亡的调控是一个错综复杂的网络,越来越多研究指出在这条通路的上游以及转导的过程还受到其它信息分子的调控,尚待更深入探究。此外,以往对TBT诱导凋亡机制的探讨多采用体外培养的细胞模型,很少有研究将体外研究结果延伸到动物活体实验作进一步证实。 本研究首先以人羊膜FL细胞为靶细胞,在TBT诱导凋亡中,围绕蛋白磷酸酶2A(otein phosphatase2A, PP2A)检测与其在凋亡调控中密切相关的因素如微管骨架和MAPKs家族的改变、探讨PP2A对微管骨架和MAPKs调控作用,并进一步确定参与TBT诱导凋亡的MAPKs家族成员及其作用的靶分子。在此基础上,以小鼠肝脏为靶器官,将体外实验的结果在体内进行更进一步证实,通过体内外实验结果的比较,确定TBT细胞毒性作用的靶分子,为TBT致毒机理阐述提供有力的理论依据。 主要结果: 1.TBT在诱导FL细胞凋亡中,明显抑制PP2A酶活性,并下调其调节亚基B55α表达和催化亚基C Leu309位点甲基化修饰水平。 2.TBT促使PP2A从微管解离,并导致FL细胞微管骨架解聚。 3.TBT活化FL细胞JNK和p38及其下游转录因子c-Jun和ATF-2。 4.TBT通过下调FL细胞Raf表达,使其下游激酶MEK1/2和ERK1/2以及转录因子c-Myc脱磷酸,导致ERK通路被抑制。 5.抑制JNK的活化能够明显抑制TBT对FL细胞凋亡的诱导,但p38被抑制对此过程没有影响。 6.抑制JNK的活化明显抑制TBT对caspase-3的激活,但对Bcl-2的表达和磷酸化水平,以及Bax表达和定位没有影响。 7.经口摄入TBT抑制小鼠肝细胞PP2A酶活性,并使小鼠肝细胞ROS水平升高。 8.经口摄入TBT激活小鼠肝细胞ERK、JNK和p38MAPKs。 9.经口摄入TBT诱导小鼠肝细胞凋亡主要体现在DNA链的断裂(TUNEL法)、染色质浓缩并发生边聚化、以及凋亡关键调控蛋白Bax/Bcl-2比值上调和执行酶caspase-3激活。 主要结论: 1在体内和体外研究中,TBT诱导凋亡的方式不同。体外实验中TBT诱导FL细胞可能至少部分以线粒体非依赖途径发生凋亡,而在体内实验TBT诱导小鼠肝细胞发生线粒体依赖途径凋亡。 2TBT在体内和体外研究中诱导凋亡方式的不同必然与体内外凋亡的调控机制相关。体外实验TBT诱导FL细胞凋亡主要通过PP2A的抑制和随之引起微管解聚以及JNK/c-Jun的活化,活化的JNK/c-Jun直接激活caspase-3诱导凋亡;而体内实验TBT诱导肝细胞凋亡的可能机制是PP2A的抑制和ROS的上调共同激活MAPKs家族,尤其是JNK,最终通过Bax/Bcl-2介导的线粒体途径启动凋亡。 3比较体内外研究结果,发现PP2A的抑制和JNK的活化在TBT诱导的体内外凋亡中均起重要作用,而且可能处于凋亡途径的上游,是TBT细胞毒性作用的关键靶分子。
【学位授予单位】:浙江大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2012
【分类号】:R114

手机知网App
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 汪保安;李明;母义明;吕朝晖;李江源;;环境污染物三丁基氯化锡和氯化三苯锡对大鼠睾丸Leydig细胞的影响[J];中华男科学杂志;2006年06期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 石艳玲;王磊;周琪;;Vero细胞对2,4,6-三氯苯酚的毒性响应特征和敏感性分析[J];生态毒理学报;2008年05期
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 贾开志;久效磷降解菌的分离、鉴定及降解酶基因的克隆[D];南京农业大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前2条
1 李兆辉;二月桂酸二丁基锡对雄性大鼠肝脏毒性的研究[D];吉林大学;2007年
2 王礞礞;有机锡对HepG2细胞的毒性效应及其机制研究[D];厦门大学;2008年
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 刘慧刚,徐立红;三丁基锡毒性作用生物标记研究进展[J];中华预防医学杂志;2005年04期
2 尤学芬;谢玉娟;丁润生;陆德炎;姚登福;;Bax基因在紫杉醇诱导HL-60细胞凋亡过程中作用的研究[J];交通医学;2007年02期
3 邓友平,肖培根;神经酰胺和细胞凋亡[J];国外医学.遗传学分册;1997年01期
4 梅立新,张旭晨,李洪燕;细胞凋亡[J];河北医学;1997年03期
5 林红伍;细胞凋亡与肿瘤[J];医学新知杂志;1997年04期
6 陈智;牙齿发育中的细胞凋亡[J];国外医学.口腔医学分册;1997年06期
7 李积胜,徐鹏霄,贺智;缺锌对大鼠睾丸细胞凋亡的影响[J];武警医学院学报;1997年02期
8 余国膺;细胞凋亡:研究现状和待解决的关键课题[J];中国实验诊断学;1998年05期
9 马东初;孙英慧;马小峰;常奎忠;黄世林;白月辉;初俊杰;刘亚革;;不同浓度亚砷酸钠对诱导NB_4细胞凋亡能力的影响[J];沈阳部队医药;1998年06期
10 陈学清;潘国宗;;抗单链DNA抗体的制备及其在细胞损伤检测中的应用[J];国外医学(免疫学分册);1998年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 李素彦;蔡燕;翁亚光;;CENP-E基因下调增强宫颈癌细胞对紫杉醇敏感性[A];中国遗传学会第八次代表大会暨学术讨论会论文摘要汇编(2004-2008)[C];2008年
2 郭军;张志愿;;三氧化二砷诱导口腔鳞癌细胞凋亡的可能性机制研究[A];第一届全国口腔颌面部肿瘤学术会议论文汇编[C];2001年
3 崔晓燕;罗琼;杨明亮;刘军;闫俊;李卓能;;枸杞多糖对人前列腺癌PC-3细胞生长及其凋亡的影响[A];中国环境诱变剂学会第14届学术交流会议论文集[C];2009年
4 廖斌;张逸;皇甫真萍;齐彦;陈佳薇;陈益宁;;中药复方君子汤诱导急性白血病细胞凋亡的实验研究[A];第12届全国实验血液学会议论文摘要[C];2009年
5 黄小琼;饶子亮;刘盛来;钟志勇;王刚;严家荣;陈系古;;已烯雌酚对免疫性卵巢早衰小鼠卵巢细胞凋亡的影响[A];实验动物与药理学、毒理学研究学术交流会论文汇编[C];2009年
6 王首帆;戴杏;雷铁池;徐世正;;Dct基因敲除增强抗Ro/SSA血清注射小鼠UVA诱导表皮细胞凋亡[A];中华医学会第十五次全国皮肤性病学术会议论文集[C];2009年
7 曹珍山;朱茂祥;刘国廉;;放射性核素诱发细胞凋亡的形态学及基因表达定量分析[A];第九届中国体视学与图像分析学术会议论文集[C];2001年
8 杨素荣;姚明辉;;细胞因子GM-CSF、IL-3和GM-CSF/IL-3融合蛋白对辐射致Tf-1细胞凋亡的影响[A];第六届全国药理学教学学术会议论文摘要汇编[C];2003年
9 林玲;潘孔寒;;脓毒血症患者外周血白细胞凋亡与病情及预后关系[A];2005年浙江省危重病学学术年会论文汇编[C];2005年
10 孟祥东;严云勤;;环境雌激素体外诱导雄性小鼠生殖细胞凋亡及其分子机制的研究[A];第十届全国生殖生物学学术研讨会论文摘要集[C];2005年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 陈汉桥;大连提出急性胰腺炎细胞凋亡新论[N];中国医药报;2001年
2 钟显飞 蒋明德;四川实验证实:红景天苷可诱导HSC细胞凋亡[N];中国医药报;2005年
3 张中桥;四军医大西京医院研究证明:GS能诱导白血病K562细胞凋亡[N];中国医药报;2005年
4 李明辉;“细胞凋亡”治癌症[N];医药导报;2002年
5 张中桥;银杏叶提取物能减少细胞凋亡[N];中国中医药报;2007年
6 温红;蛋白质caspases 3/7能有效控制细胞凋亡[N];医药经济报;2006年
7 商东;“细胞凋亡”与临床医学[N];中国医药报;2001年
8 洪敏;细胞凋亡研究引人关注[N];中国医药报;2008年
9 康 旭 冼沛中 许庆文;复方苦参注射液促使大肠癌细胞凋亡的实验研究[N];中国中医药报;2006年
10 记者张建松;治疗癌症新途径:细胞凋亡疗法[N];科技日报;2002年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 张亚莉;PP2A和JNK在TBT诱导的体内外细胞凋亡中的重要作用[D];浙江大学;2012年
2 刘光伟;低剂量电离辐射对小鼠睾丸生精细胞凋亡的影响及其基因调控[D];吉林大学;2004年
3 张公文;银杏叶提取物对大鼠心脏移植心肌细胞凋亡影响的实验研究[D];山东大学;2004年
4 刘宗超;实验性脑出血中NF-κB的作用机制及巴曲酶保护作用的研究[D];吉林大学;2005年
5 张秀花;针刺对MCAO大鼠缺血半暗带影响的基础研究[D];黑龙江中医药大学;2005年
6 吴强;ERK1/2、p38MAPK在鱼藤酮中毒诱导的神经细胞凋亡和iNOS表达中的作用研究[D];第三军医大学;2005年
7 袁长青;神经酰胺和凋亡诱导因子在UVA诱导细胞凋亡中的作用[D];第一军医大学;2005年
8 刘正学;SARS病毒特异性抗原抗体基因和N基因的研究[D];武汉大学;2005年
9 高巍然;2-甲氧基雌二醇对骨髓瘤细胞作用的体外实验研究[D];第二军医大学;2005年
10 徐波;糖皮质激素对ALL细胞Bim、Puma表达的影响及HA14-1诱导ALL细胞凋亡的途径[D];中国医科大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 张驰;《技术性贸易壁垒协议》(TBT)研究[D];吉林大学;2010年
2 么金平;紫杉醇与顺铂合用对卵巢癌细胞凋亡的影响[D];河北医科大学;2006年
3 聂林;三氧化二砷对恶性淋巴瘤细胞凋亡的研究[D];暨南大学;2000年
4 张建军;细胞凋亡在肠炎沙门氏菌致肠道屏障功能损伤中的作用[D];第三军医大学;2001年
5 童炎岳;肾缺血再灌注损伤内皮素与细胞凋亡研究及氨基酸的保护作用[D];浙江大学;2002年
6 李维婷;伴放线放线杆菌诱导T淋巴细胞通过Fas-FasL途径的细胞凋亡的研究[D];吉林大学;2004年
7 钟荣德;生长抑素和生长激素对重症急性胰腺炎胰腺细胞凋亡的影响[D];第一军医大学;2004年
8 曾芸;黄连、黄芩提取物对小鼠胸腺细胞凋亡的影响[D];广西大学;2005年
9 李恭贺;水牛卵巢卵泡颗粒细胞凋亡的生物学特征[D];广西大学;2005年
10 余丹丹;两株H5N1亚型禽流感病毒诱导的细胞凋亡研究[D];南京农业大学;2005年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026