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《浙江大学》 2019年
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杭州甘薯病毒检测和脱毒健康种苗培育

孙钟毓  
【摘要】:甘薯(Ipomonea batatas Lam)属旋花科甘薯属,是我国主要的经济和粮食作物之一,中国是生产甘薯的大国。田间调查发现,甘薯深受多种病毒侵染,导致产量下降、品质变劣,造成巨大的经济损失。脱毒健康种苗的培育是提高甘薯产量、改良品质的主要手段,本研究对临安市等7个杭州市甘薯主栽区的甘薯病毒病发生状况进行了调查和检测,并对甘薯'1042'株系通过剥茎尖结合小滴液化法获得了脱去甘薯羽状斑驳病毒(Sweet potato featherymottled virus,SPFMV)的脱毒种苗,开展了脱毒种苗繁育体系研究。研究结果如下:1、杭州市甘薯主产区病毒病发生状况调研和采样。调研了余杭、桐庐、萧山、富阳、建德、淳安、临安等7个杭州市甘薯主产区,发现主产区甘薯普遍具有矮化、花叶、皱缩、叶脉突起等症状,采集具有病毒病典型症状的叶片20份,其中余杭2份、桐庐4份、萧山3份、富阳2份、建德4份、淳安3份、临安2份。初步确认杭州市主产区的甘薯受到病毒病感染。2、甘薯病毒病检测。以病毒症状严重的病样(桐庐TL-4)为材料,经电镜负染色观察到组织汁液中含有大量600~900 nm的弯曲线状病毒粒子,超薄切片中发现细胞质内存在着大量结晶体。RT-PCR结果表明,杭州市20份病样中检测到甘薯羽状斑驳病毒(Sweet potato feathery mottled virus,SPFMV)、甘薯褪绿矮缩病毒(Sweet potato chlorotic stunt virus,SPCSV)、甘薯G病毒(Sweet potato virus G,SPVG)、甘薯C病毒(Sweet potato virus C,SPVC)、甘薯G病毒(Sweet potato virus G,SPVG)、甘薯Y病毒(Sweet potato virus Y,SPVY)和甘薯褪绿斑病毒(Sweet potato chlorotic flecks virus,SPCFV)等6种病毒。其中桐庐检测到6种、余杭检测到4种、建德检测到4种、淳安检测到3种,临安检测到2种、萧山检测到1种、富阳检测到1种。3、甘薯茎尖小滴液化法脱毒体系建立。通过预培养基蔗糖浓度、玻璃化溶液成分以及处理时间等因子对茎尖再生率影响的研究,建立了高效简便的茎尖小滴液化法,具体方法为:剥离带有SPFMV的甘薯'1042'无菌苗约1.0mm顶端茎尖,在预培养基A(0.3 mol/L蔗糖+MS,pH=5.8)和预培养基B(0.5 mol/L蔗糖+MS,pH=5.8)中分别培养1d后,依次用加载液(2mol/L甘油+0.4mol/L蔗糖,pH=5.8)处理 60 min、PVS2(MS+30%甘油 +15%乙二醇+15%DMSO+0.4mol/L蔗糖,pp5.8)处理60min、液氮处理301min,洗涤液(1.2 mol/L蔗糖+MS,pH=5.8)处理20min,最后把茎尖接种于恢复培养基A(不含NH4+的MS+0.5mg/LBA)黑暗培养3d,再转入恢复培养基B(MS +0.5mg/L BA)培养 1 周,转入再生培养基(BM+0.5 mg/L BA+0.1 mg/L NAA+8 mg/L GA3;BM:0.01 g/L Ca(NO3)2,0.2 g/L G6H8O6,0.02 g/L C4H12N2,0.002 g/L C18H32N2O10Ca和0.1 g/LC6H14N4O2+MS),茎尖存活率81.88%,植株再生率72.06%。经RT-PCR和EL1SA检测,结果表明小滴液化法的脱毒率为100%。同时发现只经过茎尖培养的植株,经检测SPFMV脱毒率为33.33%。4、不含SPFMV的'1042'脱毒苗繁育。将不含SPFMV的'1042'脱毒植株切割成含有1-2个节间的茎段,茎段接种于生根壮苗培养基,培养3-4周后,植株长到6-8 cm,5-7片叶子,3-5个节问时,于室温下放置一周后洗净,移栽于带有防虫网的培养箱(珍珠岩:蛭石:泥炭=1:]:2)中,成活率为1100%。2个月后苗移栽海南岛基地繁殖。5、脱毒种苗的生长指标测定和品质分析。分别检测脱毒苗与对照苗地上部分和地下部分的形态学指标,结果表明脱毒苗的薯块形态、干重、叶长、叶宽、蔓长、蔓粗、分枝数等显著优于对照苗。淀粉、可溶性总糖、维生素C和β-胡萝卜素等指标的测定结果,表明脱毒甘薯维生素C和β-胡萝卜素含量明显高于对照,淀粉、可溶性总糖和蛋白质略高于对照,还原糖等无明显变化。
【学位授予单位】:浙江大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2019
【分类号】:S435.31

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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 李华伟;许泳清;邱思鑫;刘中华;邱永祥;汤浩;余华;;侵染甘薯的SPCSV、SPVG、SPFMV多重RT-PCR检测方法的建立及应用[J];核农学报;2015年08期
2 王常芸;李晓亮;辛国胜;王建玲;王冬梅;;不同品种甘薯茎尖脱毒快繁技术优化研究[J];农学学报;2015年07期
3 乔奇;秦艳红;张德胜;田雨婷;王爽;王永江;张振臣;;甘薯褪绿斑病毒外壳蛋白的分子变异及其特异抗血清制备[J];植物病理学报;2014年06期
4 王丽;王振东;乔奇;秦艳红;张德胜;田雨婷;王爽;张立军;张振臣;;甘薯褪绿矮化病毒西非株系实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用[J];植物病理学报;2014年05期
5 王爽;刘顺通;乔奇;张德胜;秦艳红;张振臣;;甘薯病毒病害SPVD抗性鉴定方法及产量损失估计[J];植物保护学报;2014年02期
6 谢礼;吕明芳;王芳;季志仙;吴列洪;严成其;陈剑平;;甘薯羽状斑驳病毒和甘薯褪绿矮化病毒复合侵染甘薯引起的细胞病理学研究[J];电子显微学报;2013年06期
7 文彤明;刘迪;;甘薯脱毒苗产业化生产新技术及其产量、品质分析[J];江苏农业科学;2013年08期
8 张振臣;乔奇;秦艳红;张德胜;田雨婷;;我国发现由甘薯褪绿矮化病毒和甘薯羽状斑驳病毒协生共侵染引起的甘薯病毒病害[J];植物病理学报;2012年03期
9 乔奇;张振臣;张德胜;秦艳红;田雨婷;王永江;;中国甘薯病毒种类的血清学和分子检测[J];植物病理学报;2012年01期
10 白建明;陈晓玲;卢新雄;郭华春;辛霞;张志娥;;超低温保存法去除马铃薯X病毒和马铃薯纺锤块茎类病毒[J];分子植物育种;2010年03期
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1 毕文璐;葡萄茎尖超低温保存及超低温疗法脱毒研究[D];西北农林科技大学;2017年
2 王仁睿;菊花、枣和马铃薯种质资源超低温保存技术与脱毒的研究[D];西北农林科技大学;2014年
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 罗勇;傅玉凡;曾令玲;魏文均;;重庆市甘薯病毒病种类及为害[J];植物医生;2015年06期
2 黄鑫;陈万生;张汉明;张磊;;生物技术在药用植物研究与开发中的应用和前景[J];中草药;2015年16期
3 李华伟;许泳清;邱思鑫;刘中华;邱永祥;汤浩;余华;;侵染甘薯的SPCSV、SPVG、SPFMV多重RT-PCR检测方法的建立及应用[J];核农学报;2015年08期
4 王爽;刘顺通;韩瑞华;张自启;张振臣;;不同时期嫁接感染甘薯病毒病(SPVD)对甘薯产量的影响[J];植物保护;2015年04期
5 李江辉;贾峥嵘;王凌云;解晓红;解红娥;武宗信;;食用型甘薯新品种晋甘薯9号的选育及栽培技术[J];山西农业科学;2015年07期
6 王常芸;李晓亮;辛国胜;王建玲;王冬梅;;不同品种甘薯茎尖脱毒快繁技术优化研究[J];农学学报;2015年07期
7 张海晶;张金梅;辛霞;尹广鹍;何娟娟;卢新雄;周元昌;陈晓玲;;马铃薯茎尖超低温保存流程TTC活力响应[J];植物遗传资源学报;2015年03期
8 黄修梅;惠霖;袁春爱;杨进;;超低温疗法脱除马铃薯种薯病毒病的研究进展[J];种子;2015年03期
9 阮先乐;陈璨;;甘薯茎尖分生组织培养及快繁技术的研究[J];周口师范学院学报;2015年02期
10 许泳清;李华伟;邱思鑫;刘中华;邱永祥;罗文彬;纪荣昌;汤浩;余华;;甘薯羽状斑驳病毒和褪绿矮化病毒双重RT-PCR检测方法的建立[J];福建农业学报;2014年11期
中国博士学位论文全文数据库 前2条
1 毕文璐;葡萄茎尖超低温保存及超低温疗法脱毒研究[D];西北农林科技大学;2017年
2 张知博;木茼蒿(Argyranthemum)茎尖超低温保存与脱除菊花矮化类病毒(CSVd)的效应与机理研究[D];西北农林科技大学;2015年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 许泳清;李华伟;邱思鑫;刘中华;邱永祥;罗文彬;纪荣昌;汤浩;余华;;甘薯羽状斑驳病毒和褪绿矮化病毒双重RT-PCR检测方法的建立[J];福建农业学报;2014年11期
2 谢礼;吕明芳;王芳;季志仙;吴列洪;严成其;陈剑平;;甘薯羽状斑驳病毒和甘薯褪绿矮化病毒复合侵染甘薯引起的细胞病理学研究[J];电子显微学报;2013年06期
3 许泳清;李华伟;刘中华;邱永祥;罗文彬;纪荣昌;汤浩;邱思鑫;余华;;甘薯羽状斑驳病毒(SPFMV)ELISA鉴定及RT-PCR检测方法的建立[J];福建农业学报;2013年12期
4 朱海生;花秀凤;陈敏氡;温庆放;;四种草莓病毒SMoV、SVBV、SCV、SMYEV多重RT-PCR检测[J];核农学报;2013年11期
5 文彤明;刘迪;;甘薯脱毒苗产业化生产新技术及其产量、品质分析[J];江苏农业科学;2013年08期
6 王丽;王振东;乔奇;秦艳红;张德胜;田雨婷;王爽;张立军;张振臣;;甘薯羽状斑驳病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立[J];沈阳农业大学学报;2013年02期
7 张盼;兰新芝;乔奇;张德胜;秦艳红;田雨婷;王爽;张振臣;;甘薯病毒病害(SPVD)的多重RT-PCR检测方法及其应用[J];植物保护;2013年02期
8 刘永康;徐艳霞;张会丽;邓如海;;甘薯茎尖脱毒及高产栽培技术研究[J];农业科技通讯;2013年03期
9 包改丽;左瑞娟;饶维力;LI Ru-Hui;李凡;;云南甘薯病毒的检测及主要病毒的多样性分析[J];微生物学通报;2013年02期
10 卢玲;聂明建;王学华;;甘薯脱毒苗培育的研究进展[J];安徽农业科学;2013年04期
中国博士学位论文全文数据库 前2条
1 王仁睿;菊花、枣和马铃薯种质资源超低温保存技术与脱毒的研究[D];西北农林科技大学;2014年
2 白瑞霞;枣种质资源遗传多样性的分子评价及其核心种质的构建[D];河北农业大学;2008年
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1 杨会利;;造成甘薯空棵原因及对策[J];现代农村科技;2019年10期
2 ;北京引进叶用甘薯品种补充市民“菜篮子”[J];科学种养;2019年11期
3 屠昌鹏;颜曰红;沈文英;龚芬;;甘薯品种“浙薯255”在玉环市的种植表现及其主要栽培技术[J];上海农业科技;2019年06期
4 骆乐谈;詹生华;赵琳;石江;应武;;甘薯新品系引进筛选试验[J];杭州农业与科技;2017年02期
5 王荫墀;山东省老科协、山东省农科院作物所"鲜食甘薯品种开发"课题组;;优质鲜食甘薯品种与栽培要点[J];山东蔬菜;2002年01期
6 张嘉欣;张嘉琪;李育军;黎仲恒;陈景益;植石灿;;甘薯营养与加工研究进展[J];长江蔬菜;2019年02期
7 李锐;;甜糯甘薯里的良苦用心[J];世界热带农业信息;2018年10期
8 刘本福;;新品种、新技术,让甘薯成了“香饽饽”——访国家甘薯体系南昌综合试验站站长、江西省农业科学院作物研究所研究员 吴问胜[J];农村百事通;2019年16期
9 ;新品种新技术破解甘薯病毒病[J];种业导刊;2017年11期
10 蔡玉虎;吕钊钦;;履带式小型甘薯秧蔓处理机的设计[J];农机化研究;2018年03期
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1 李雪丹;吴燕;张义正;;甘薯非特异性脂质转移蛋白基因克隆与表达分析[A];遗传多样性:前沿与挑战——中国的遗传学研究(2013-2015)——2015中国遗传学会大会论文摘要汇编[C];2015年
2 赵波;张青;张晓宇;谢皓;陈学珍;;菜用甘薯品种产量及品质性状分析[A];2010中国作物学会学术年会论文摘要集[C];2010年
3 孙敏;张启堂;刘佩瑛;雷建军;易茂祥;;RAPD标记对甘薯品种的鉴定[A];重庆市遗传学会第一届学术年会暨纪念孟德尔规律再发现100周年学术讨论会论文集[C];2000年
4 杨育峰;张晓申;王慧瑜;王雁楠;张莉;陈献功;徐心志;杨晓平;杨国红;;氮、磷、钾施肥对甘薯农艺性状及产量的影响[A];2018中国特色作物栽培学发展研讨会论文集[C];2018年
5 张海燕;解备涛;汪宝卿;董顺旭;段文学;张立明;;不同甘薯品种抗旱性评价及耐旱指标筛选[A];2018中国特色作物栽培学发展研讨会论文集[C];2018年
6 张磊;辛国胜;韩俊杰;商丽丽;邱鹏飞;贾礼聪;;黑色地膜对甘薯的光合作用及荧光特性的影响[A];2018年山东作物学会学术年会论文集[C];2018年
7 张旭;李惟基;李孙荣;郑振宇;;筛选甘薯田除草剂和耐除草剂甘薯品种[A];面向21世纪中国农田杂草可持续治理——第六次全国杂草科学学术研讨会论文集[C];1999年
8 柯玉琴;王伟英;何华勤;庄杰鹏;;不同甘薯品种苗期对薯瘟菌侵染的生理响应[A];中国作物学会2013年学术年会论文摘要集[C];2013年
9 董翠;杨新笋;吴先国;;甘薯与大豆间作效应分析[A];2018中国特色作物栽培学发展研讨会论文集[C];2018年
10 李燕;张欢;张铅;高晓茹;翟红;刘庆昌;何绍贞;;甘薯抗病基因IbSWEET10的克隆与功能分析[A];2017年中国作物学会学术年会摘要集[C];2017年
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1 本报记者 王延斌 通讯员 李才林 刘佳;因为交了两个“朋友” 她的甘薯“转会”卖出天价[N];科技日报;2019年
2 王宁;甘薯品种—烟紫薯1号[N];山东科技报;2019年
3 研究员 河北省农林科学院粮油作物研究所 刘兰服 张松树 孙立永;甘薯品种——冀薯98、冀薯71[N];河北科技报;2019年
4 刘兰服 马志民 孙立永;甘薯品种——冀薯99、冀薯332[N];河北科技报;2019年
5 邱鹏飞;甘薯中后期重点抓好这“三防”[N];农业科技报;2019年
6 本报记者 王开 荣松如 郭洪申 李文明;小甘薯种出大产业[N];内蒙古日报(汉);2018年
7 本报特约记者 刘松涛;小甘薯的大产业链[N];通辽日报;2018年
8 记者 孟燕君 通讯员 冯立辉;河北省甘薯绿色高产高效观摩培训班成功举办[N];河北农民报;2018年
9 本报记者 李锐;甜糯甘薯里的良苦用心[N];农民日报;2018年
10 本报记者 刘旭;搭建产销平台 推介优质甘薯[N];新农村商报;2018年
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1 黄立飞;我国甘薯新病害—茎腐病的研究[D];海南大学;2016年
2 史春余;番茄、甘薯专用有机—无机缓释肥研制及其生物学效应[D];中国农业科学院;2003年
3 柳哲胜;甘薯茎线虫病抗性的分子标记及相关基因片段的克隆[D];中国农业大学;2005年
4 张勇为;甘薯淀粉酶组织特异性及基因克隆和表达[D];四川大学;2006年
5 陈观水;甘薯抗病相关基因的克隆与分析[D];福建农林大学;2007年
6 李育明;中国甘薯种质资源遗传多样性分析及高淀粉轮回选择群体改良研究[D];四川农业大学;2007年
7 罗红蓉;甘薯(Ipomoea batatas (L.) Lam.)的EST-SSR分子标记和遗传转化研究[D];四川大学;2004年
8 程瑞锋;水培甘薯连续生产系统构建及根系功能分离机理研究[D];中国农业科学院;2008年
9 张超凡;湖南甘薯品种遗传多样性分析[D];中南大学;2010年
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1 程祥勋;新型甘薯收获机关键装置设计与试验[D];山东农业大学;2019年
2 孙钟毓;杭州甘薯病毒检测和脱毒健康种苗培育[D];浙江大学;2019年
3 李宏利;玉米/甘薯不同带宽对根际生态及群体产量的影响[D];西南大学;2019年
4 肖梅;甘薯SPW5基因克隆、表达载体构建及遗传转化探索[D];西南大学;2019年
5 王思奇;抗氧化系统调控甘薯贮藏特性的机制研究[D];合肥工业大学;2019年
6 吴郭杰;甘薯IbHMGR基因的克隆与功能初步研究[D];山东大学;2019年
7 高闰飞;利用形态学和SSR标记分析中国紫心甘薯育成品种遗传多样性[D];中国农业科学院;2019年
8 崔强旺;菜用甘薯品种的主要农艺性状及抗寒性研究[D];湖南农业大学;2018年
9 覃华勇;菜用甘薯水培品种与营养液配方筛选及水培与土培的对比研究[D];湖南农业大学;2018年
10 黄哲鸿;甘薯内生细菌的分离及鉴定[D];福建农林大学;2019年
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