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《浙江大学》 2001年
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农杆菌介导的蚕豆铁蛋白基因水稻转化及其功能研究

徐晓晖  
【摘要】: 铁蛋白是一类铁结合和贮藏蛋白,并具有抗氧化功能。本研究利用农杆茵介导 的转化方法将铁蛋白(pea ferritin)基因转入水稻,以改变水稻中的铁离子浓度和铁 的贮藏量。因为铁催化过氧化氢转化成羟自由基(~·OH),而~·OH对细胞有很大的破 坏作用,因此,ferritin基因的水稻转化也会影响转化植株对病原菌的抗性以及表型的 变化。 本研究将CaMV35S启动子控制下的蚕豆ferritin基因构建于植物双元表达载体 pCambia1301中,并将该重组载体导入农杆菌超毒力菌株EHA105中。以粳稻品种秀 水11的成熟胚愈伤组织为转化受体,进行农杆菌介导的转化,共获得105株转基因 植株系,转化效率达23.9%。 对转基因植株(T_0代)进行了PCR检测,结果表明以潮酶素筛选获得的阳性植 株的绝大多数PCR结果也是阳性。Southern和Northern杂交分析了部分PCR阳性植 株,结果表明ferritin基因以单拷贝或多拷贝整合到水稻基因组中,并有稳定地表达。 对转基因植株不同组织中的铁含量进行了测定,发现转基因植株的种子和叶片组织中 铁含量有明显提高。 对转基因水稻叶片进行水稻白叶枯病菌和稻瘟病菌接种试验,发现转基因植株 可以减少或延缓病原菌侵染后AOS的产生。铁蛋白基因在转植株中的表达,并结合 贮藏了体内的游离铁,这必然会减轻转基因植株的氧化损伤。
【学位授予单位】:浙江大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2001
【分类号】:S511.035.3

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