转cry1Ab水稻遗传表达与性状变异的研究

【摘要】： 本实验对用农杆菌介导法获得的日本晴、93繁、91RM、和中8215的转crylAb 基因后代材料进行了较系统的研究：用PCR扩增的方法验证了目的基因cylAb 和标记基因gus的连锁性；分析了R_1-R_5代中gus基因的遗传方式；分析了携带 转基因的雌雄配子传递外源基因能力的差异；测定了CrylAb的时空表达特点和 转基因植株的抗虫性；还测定了转基因材料的RVA谱以确定转基因材料稻米品 质性状的变异。主要结果如下： 1．绝大多数转基因后代中crylAb和gus基因连锁。在自交世代中，GUS阳 性株的比例数低于3:1的比例，不符合孟德尔遗传规律。 2．携带转基因的花粉比正常花粉的竞争能力显著减弱，这种情况在转基因 材料中普遍存在。这可能是造成转基因偏离孟德尔式分离的主要原因。转基因对 雌配子的影响不如对雄配子那样明显，未及显著水准。 3．CrylAb在各组织中的绝对表达量存在规律性。在抽穗期，CrylAb占组 织鲜重的绝对表达量为剑叶最高，其次为颖花，根最低，从高到低的基本顺序为： 剑叶叶片＞颖花＞中部叶的叶鞘＞中部茎＞基部叶的叶鞘＞基部茎＞根。而用相对含 量（占可溶性总蛋白的％）表示则没有明显的规律性。不同发育时期的CrylAb 表达量，不管是绝对含量还是相对含量，均没有明显的趋势性。 4．室内抗虫性与田间抗虫性一致，通过田间选择可以获得抗虫效果较好的 植株。 5．发现了gus基因在93繁的一个转化事件中沉默的现象，同时发现了crylAb 基因在93繁、91RM和中8215等3个转化品种中的沉默现象。 6．转基因材料的RVA谱与相应亲本比较，出现了较大变化，这种变异主要 为无性系变异，而转基因本身对稻米RVA谱的特征值并无明显影响。