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转cry1Ab水稻遗传表达与性状变异的研究

谢小波  
【摘要】: 本实验对用农杆菌介导法获得的日本晴、93繁、91RM、和中8215的转crylAb 基因后代材料进行了较系统的研究:用PCR扩增的方法验证了目的基因cylAb 和标记基因gus的连锁性;分析了R_1-R_5代中gus基因的遗传方式;分析了携带 转基因的雌雄配子传递外源基因能力的差异;测定了CrylAb的时空表达特点和 转基因植株的抗虫性;还测定了转基因材料的RVA谱以确定转基因材料稻米品 质性状的变异。主要结果如下: 1.绝大多数转基因后代中crylAb和gus基因连锁。在自交世代中,GUS阳 性株的比例数低于3:1的比例,不符合孟德尔遗传规律。 2.携带转基因的花粉比正常花粉的竞争能力显著减弱,这种情况在转基因 材料中普遍存在。这可能是造成转基因偏离孟德尔式分离的主要原因。转基因对 雌配子的影响不如对雄配子那样明显,未及显著水准。 3.CrylAb在各组织中的绝对表达量存在规律性。在抽穗期,CrylAb占组 织鲜重的绝对表达量为剑叶最高,其次为颖花,根最低,从高到低的基本顺序为: 剑叶叶片>颖花>中部叶的叶鞘>中部茎>基部叶的叶鞘>基部茎>根。而用相对含 量(占可溶性总蛋白的%)表示则没有明显的规律性。不同发育时期的CrylAb 表达量,不管是绝对含量还是相对含量,均没有明显的趋势性。 4.室内抗虫性与田间抗虫性一致,通过田间选择可以获得抗虫效果较好的 植株。 5.发现了gus基因在93繁的一个转化事件中沉默的现象,同时发现了crylAb 基因在93繁、91RM和中8215等3个转化品种中的沉默现象。 6.转基因材料的RVA谱与相应亲本比较,出现了较大变化,这种变异主要 为无性系变异,而转基因本身对稻米RVA谱的特征值并无明显影响。


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