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《浙江大学》 2002年
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克百威的ELISA试剂盒研制及多克隆抗体解毒功能研究

杨挺  
【摘要】: 本研究以2,3-二氢-2,2-二甲基-7-苯并呋喃氯甲酸酯为基础合成了克百威的两种半抗原,6—[[(2,3-二氢-2,2-二甲基-7-苯并呋喃基氧)羰基]氨基]已酸(BFNH)和4—[[(2,3-二氢-2,2-二甲基-7-苯并呋喃基氧)羰基]氨基]丁酸(BFNB)。同时将这两种半抗原与载体蛋白牛血清蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联合成克百威免疫原和包被抗原,并用紫外光谱法测定克百威与载体蛋白结合物结合比。 用合成的克百威免疫原免疫兔子后获得高效价、高特异性的抗克百威多克隆抗血清,用间接ELISA测定效价为1:16000~1:128000,纯化抗体效价为1:500000~1:4000000。所得克百威多抗血清与丁硫克百威的交叉反应率6.19%,与呋喃酚的交叉反应率为4.00%,与供试的其它5种氨基甲酸酯类农药的交叉反应率均小于0.44%,对于三种有机磷农药的交叉反应率均低于0.12%。并选择由BFNB-BSA免疫兔子所得的一种纯化抗体与辣根过氧化物酶偶联制备成酶标抗体,同时了测定了酶标抗体的活性,效价为1:4000。 在优化免疫学反应条件后,建立了克百威间接竞争ELISA法和直接竞争ELISA法,检测限分别为0.005mg/L和0.01mg/L,检测线性范围分别为0.005~10mg/L和0.01~10mg/L,并在此基础上研制了两种用于检测水、土壤、蔬菜、中毒样品的酶联免疫试剂盒,其试剂盒的重现性好,批内批间及整体变异系数均低于8.0%,试剂盒检测的准确度高,除呕吐物样品外,其余样品的回收率均在89.62%以上。 同时,根据抗体抗原的特异性结合反应的原理,进一步研究了抗克百威抗体对小鼠克百威中毒后的解毒作用,试验结果表明,抗体可以较好地缓解克百威对乙酰胆碱酯酶抑制作用的症状,使中毒小鼠逐渐恢复正常。
【学位授予单位】:浙江大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2002
【分类号】:TQ450

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【引证文献】
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1 魏松红;逄若霖;王翀;纪明山;谷祖敏;祁之秋;王英姿;;甲拌磷残留检测间接竞争ELISA试剂盒的研制[J];食品科学;2011年04期
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1 余宇燕;环境中微量氯苯酚类环境激素的免疫分析方法研究[D];东华大学;2006年
2 张静;川楝素免疫分析方法及其应用研究[D];西北农林科技大学;2008年
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1 张建群;莱克多巴胺兔单抗的制备与ELISA检测方法的建立[D];浙江大学;2006年
2 朱炫;氯霉素及盐酸克伦特罗残留ELISA检测方法研究[D];浙江大学;2007年
3 罗利;川楝素间接竞争酶联免疫分析方法(IC-ELISA)初步研究[D];西北农林科技大学;2008年
【参考文献】
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1 白丽,钱金栿,王晶;应用辛酸硫酸胺法提取小鼠腹水和血清中的IgG抗体[J];大理医学院学报;2000年04期
2 李红莉,戴金平;超临界流体色谱法在环境分析中的应用[J];山东环境;1998年03期
3 林春,林冲云,何娇玲,黄惠娜,张丽娜;血液灌流抢救急性重度有机磷农药中毒[J];福建医药杂志;2001年03期
4 潘元海,金军,蒋可;高效液相色谱/大气压化学电离质谱快速分析水中痕量有机磷农药[J];分析化学;2000年06期
5 仲维科,郝戬,樊耀波,王敏健;食品农药残留分析进展[J];分析化学;2000年07期
6 张曙明,陈建民,顾志平,赵扬;超临界流体色谱法在农药分析中的应用[J];分析试验室;1994年05期
7 李萍;氨基甲酸酯农药残留分析方法[J];国外医学(卫生学分册);1999年06期
8 余万俊,鲁长豪,肖志芳,牟家婉,蒋中华;单克隆抗体酶免疫分析法测定大米中杀虫脒残留量[J];环境科学;1995年04期
9 金军,赵国栋,崔云,蒋可;高效液相色谱/大气压电离质谱(HPLC/APIMS)在农药残留分析中的应用[J];化学通报;1999年06期
10 方克美;有机磷农药中毒急救治疗进展[J];急诊医学;2000年04期
【共引文献】
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1 马秀丽;冯涛;于可响;王春玲;宋敏训;;几种提纯鸭病毒性肝炎血清免疫球蛋白G方法的比较[J];山东农业科学;2007年01期
2 王志举,吴晓东;超临界流体技术在环保领域中的应用[J];安徽化工;2005年03期
3 桂学琴;;固相萃取富集-高效液相色谱法测定土壤·水质中的莠去津[J];安徽农业科学;2007年01期
4 魏东;张乃生;;诺氟沙星多克隆抗体的制备[J];安徽农业科学;2007年04期
5 杨和连;张百俊;;我国蔬菜生产中的主要污染问题及防治对策[J];安徽农业科学;2007年05期
6 于基成;刘秋;赵娜;曹远银;范圣第;;除草剂2,4-D完全抗原的合成与鉴定[J];安徽农业科学;2007年13期
7 舒文祥;余为一;王静;;鸡血清IgG纯化方法研究[J];安徽农业科学;2007年25期
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1 赵玉秀;梁宏阳;马可;赵硕;李爱灵;苏桂民;张月兰;王辉;;鸡胚细胞疫苗制品宿主细胞蛋白残留量检测方法的建立[A];第五次全国免疫诊断暨疫苗学术研讨会论文汇编[C];2011年
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3 张婧;赵建庄;王春娜;魏朝俊;;食品中溴氰菊酯农药的残留分析技术[A];都市型高等农业教育教学改革论文专辑[C];2007年
4 宋灵宁;;甲功五项联检评价甲状腺机能及临床意义[A];第四届中国核学会省市区“三核”论坛论文集[C];2007年
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7 王静;潘荷芳;刘铮铮;刘劲松;;地表水中氨基甲酸酯农药及代谢物多组分分析方法研究进展[A];2008年全国有机质谱学术会议论文集[C];2008年
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9 邱妍;董发明;杨自军;刘凤军;胡元亮;崔保安;;四种多糖对鸡脾脏淋巴细胞的增殖和一氧化氮分泌的影响[A];河南省畜牧兽医学会第七届理事会第二次会议暨2008年学术研讨会论文集[C];2008年
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10 韩笑;MSPD-UPLC-MS/MS法检测蔬菜中苯甲酰脲类和双酰肼类农药[D];山东农业大学;2010年
【同被引文献】
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1 黄德智,岳永德,汤锋;农药残留分析的研究进展[J];安徽农业科学;2002年04期
2 吴瑛;袁守亮;任丽萍;;农业环境中农药残留的快速检测法——分子印迹技术[J];安徽农业科学;2007年17期
3 陈丹;孙广瑞;柳增善;;辛酸-硫酸铵联合沉淀法在单克隆抗体纯化中的应用[J];安徽农业科学;2007年26期
4 朱毅,舒为群,卓鉴波,余楠,刘波;双酚A体外类雌激素活性评价及其作用机制的初步研究[J];重庆环境科学;2003年04期
5 陆彦,王金洛,徐福洲,李永清,杨兵,戴小华,吴国娟;抗氨苄青霉素单克隆抗体的制备及初步鉴定[J];动物医学进展;2005年02期
6 柴春彦,刘国艳,朱元凯;Nafion修饰电极检测饲料中克伦特罗的研究[J];饲料工业;2004年02期
7 吕会田,乐加昌,陈存社;克伦特罗小分子半抗原偶联率的测定方法研究[J];饲料工业;2005年03期
8 黄秀清;浅谈莱克多巴胺的检测方法与监控措施[J];福建农业科技;2005年04期
9 王子健,王毅;用生物模拟采样技术模拟研究不同取代氯酚在金鱼(Crassius auratus)体内的富集和降解[J];湖泊科学;2002年01期
10 袁进华;曹金鸿;;化学发光法测定敌敌畏等农药的研究[J];分析化学;1985年08期
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1 王选年;β-肾上腺素受体激动剂克伦特罗的免疫特性及中毒病理学研究[D];中国人民解放军军需大学;2002年
2 韩丽君;有机磷农药的酶免疫化学研究[D];中国农业大学;2003年
3 杨润亚;苦皮藤素Ⅴ免疫分析技术的研究[D];西北农林科技大学;2002年
4 张先福;川楝素对孕鼠的胚胎毒性与子宫局部免疫毒理学研究[D];西北农林科技大学;2004年
5 周建营;川楝素抗肉毒作用分子机制研究[D];中国科学院研究生院(上海生命科学研究院);2005年
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1 郑尊涛;杀虫剂吡虫啉和氟虫腈的酶联免疫吸附测定(ELISA)技术研究[D];浙江大学;2004年
2 李志茹;拟除虫菊酯类农药通用抗体制备及高效氯氟氰菊酯免疫检测技术研究[D];南京农业大学;2004年
3 张亚妮;植物源杀虫剂川楝素环境安全性评价[D];西北农林科技大学;2007年
【二级引证文献】
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1 崔翔;动物可食组织中安眠酮残留的ELISA检测方法研究[D];华中农业大学;2010年
2 吴婧;基于单光子电离飞行时间质谱的样品前处理技术研究及其在挥发性有机污染物快速检测中的应用[D];郑州大学;2011年
3 李蓉;两种斑蝥素人工抗原的合成及其多克隆抗体制备研究[D];西北农林科技大学;2011年
4 盛明巍;三聚氰胺单克隆抗体制备及间接竞争ELISA方法的初步建立[D];沈阳农业大学;2011年
5 鞠慧丽;盐酸克伦特罗快速检测试剂盒的研制与开发[D];华中科技大学;2008年
6 杨丽丽;动物源性食品中氯霉素快速检测的ELISA方法研究[D];华中农业大学;2009年
7 高翔;生物素—亲和素放大酶联免疫快速检测动物组织中莱克多巴胺残留[D];西北农林科技大学;2009年
8 才琳;抗黄曲霉毒素B1单克隆抗体和单链抗体的制备及活性研究[D];黑龙江八一农垦大学;2010年
9 李颖;苦豆子生物碱间接竞争酶联免疫分析方法(IC-ELISA)初步研究[D];西北农林科技大学;2012年
【二级参考文献】
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1 陈伯权,吴美芙,叶群瑞;几种部分纯化单克隆抗体方法的比较[J];病毒学报;1990年02期
2 白丽,钱金栿;CELISA法的建立及其在免疫导向药物制备过程中的应用[J];大理医学院学报;1996年03期
3 周良模;沈玉峰;;超临界流体色谱的进展[J];分析化学;1991年08期
4 华小梅;单正军;;我国农药的生产,使用状况及其污染环境因子分析[J];环境科学进展;1996年02期
5 弓爱君,叶常明;除草剂阿特拉津(Atrazine)的环境行为综述[J];环境科学进展;1997年02期
6 潘元海,魏爱雪,赵国栋,温美娟,蒋可;水中痕量有机磷农药的高效液相色谱/质谱分析[J];环境科学进展;1999年01期
7 庄无忌,查如璧,高生;气相色谱法测定杀虫脒的残留量[J];环境科学;1978年04期
8 王字玲,荣康泰,杨日芳,恽榴红;γ-羟基膦酸酯诱导梭曼水解单链抗体酶[J];中国科学(B辑 化学);2000年04期
9 王汉斌,黄韶清;急性有机磷农药中毒致“中间型综合征”4例报告及文献复习[J];军事医学科学院院刊;1995年01期
10 杨日芳,赵毅民,恽榴红,荣康泰;梭曼抗体酶研究: Ⅰ.五配位氧膦烷半抗原的设计与合成及其水解稳定性研究[J];军事医学科学院院刊;1998年01期
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1 孟宪民,仇是胜;甲氨基甲酰氯法合成克百威[J];农药;1996年03期
2 杨容;基质固相分散-高效液相色谱法测定水稻中的痕量克百威[J];色谱;2003年03期
3 王振宇;;FMC希望保留克百威的部分用途[J];农药研究与应用;2009年01期
4 杨柳;;美国环保局取缔克百威引起法律纠纷[J];农药科学与管理;2011年05期
5 牛赡光,龙岩;35%克百威种子处理剂防治玉米田沟金针虫试验[J];农药;1993年04期
6 魏金旺,刘保峰;克·多种衣剂的高效液相色谱分析[J];农药科学与管理;1997年04期
7 仲苏林;新颖杀虫增效剂MB—599[J];世界农药;1997年03期
8 王德富,孔周,蒋宏;35%克百威悬浮剂技术研究[J];农药;2002年08期
9 郭永霞,孔祥清,宁毅,苏会臣,路浩;多克福种衣剂的高效液相色谱分析[J];黑龙江八一农垦大学学报;2002年01期
10 ;肯尼亚环保人士呼吁禁用杀虫剂“克百威”[J];农化新世纪;2008年06期
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1 邢春莲;徐阳阳;赵蕊;杨一;崔立莉;曹健荣;;血筛产品(ELISA)检测能力的评价[A];第五次全国免疫诊断暨疫苗学术研讨会论文汇编[C];2011年
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4 张喜悦;赵云玲;徐培莲;王志亮;吴延功;何昭阳;;牛结核ELISA试剂盒的应用研究[A];人畜共患传染病防治研究新成果汇编[C];2004年
5 马米玲;罗建勋;关贵全;高金亮;刘志杰;刘爱红;党志胜;李文卉;任巧云;田占成;殷宏;;羊泰勒虫病ELISA诊断试剂盒的研制及其应用[A];中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第五次代表大会暨第八次学术研讨会论文集[C];2004年
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8 胡小玲;陈剑刚;张瑰;黄辉涛;梁素丹;;ELISA快速测定带子中麻痹性贝类毒素含量[A];2010广东省预防医学会学术年会资料汇编[C];2010年
9 刘辰庚;王培昌;;血清抗碳酸酐酶Ⅲ抗体ELISA检测方法的建立与初步应用[A];中华医学会第九次全国检验医学学术会议暨中国医院协会临床检验管理专业委员会第六届全国临床检验实验室管理学术会议论文汇编[C];2011年
10 王凯;虞伟;高德玉;白彩琴;严孝岭;李晓军;;特异性ACPA免疫复合物ELISA检测法的建立及其应用[A];中华医学会第九次全国检验医学学术会议暨中国医院协会临床检验管理专业委员会第六届全国临床检验实验室管理学术会议论文汇编[C];2011年
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1 钟浓;美国拟禁用克百威[N];农资导报;2006年
2 辛迪;美国拟全面禁止克百威登记[N];农资导报;2008年
3 ;Ortho公司研制出自我筛查贫血的试剂盒[N];医药经济报;2005年
4 记者王城;我国商品化食品安检试剂盒评价制度研究领先国际[N];中国食品报;2011年
5 记者 林世雄 通讯员 林明东;厦门企业首创宫颈癌快速自检试剂盒[N];福建日报;2008年
6 吴志军;骨髓移植配型将用上国产芯片试剂盒[N];健康报;2005年
7 汪言安;科华生物七产品完成欧盟CE注册[N];第一财经日报;2007年
8 记者 张建琛;厦门首创子宫颈癌自我检测技术[N];科技日报;2006年
9 记者 王秀兰;美国环保局发出克百威禁令[N];中国化工报;2006年
10 王惜纯;“试剂盒”让孔雀石绿立刻现形[N];中国质量报;2006年
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1 吴刚;动物源性食品中克百威与蝇毒磷的辐照降解机理研究[D];浙江大学;2011年
2 何继红;阿维菌素类药物多残留分析方法的研究[D];中国农业大学;2005年
3 桂文君;农药残留ELISA速测试剂盒产业化技术研究[D];浙江大学;2007年
4 宋振梅;Clusterin在食管鳞癌中表达的研究与应用[D];山东大学;2005年
5 金仁耀;抗克百威—三唑磷双特异性单克隆抗体研究[D];浙江大学;2008年
6 邓省亮;己烯雌酚和双烯雌酚单克隆抗体的制备及ELISA方法的研究[D];中国农业科学院;2011年
7 金茂俊;农药残留检测的荧光和化学发光免疫分析方法研究[D];浙江大学;2009年
8 姜金庆;19-去甲睾酮免疫学检测方法的建立及应用[D];西北农林科技大学;2011年
9 张德勇;基于IBV重组表达蛋白的抗体检测技术及基因免疫研究[D];浙江大学;2005年
10 檀德宏;胆碱酯酶抑制剂类农药的神经毒性及机制研究[D];沈阳药科大学;2009年
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1 杨挺;克百威的ELISA试剂盒研制及多克隆抗体解毒功能研究[D];浙江大学;2002年
2 刘洋;牛支原体p28基因的表达及间接ELISA方法的建立[D];中国农业科学院;2011年
3 陆彦;氨苄青霉素单克隆抗体制备及其残留检测试剂盒的初步研究[D];新疆农业大学;2005年
4 孙广瑞;河豚毒素ELISA检测方法的优化与检测试剂盒的研发[D];吉林大学;2007年
5 欧阳小清;某些环境污染物质的分子发光分析研究及应用[D];福州大学;2004年
6 杨娟;牛传染性鼻气管炎的快速诊断[D];中国兽医药品监察所;2008年
7 朱欢欢;用双合成肽为抗原建立的ELISA试验检测鼻咽癌EB病毒抗体的研究[D];广西医科大学;2011年
8 范万东;盐酸克伦特罗残留检测方法的研究[D];南京农业大学;2004年
9 刘艳;猪瘟细胞苗生产工艺的优化及ELISA法在抗原定量测定中的应用[D];山东轻工业学院;2011年
10 白如念;鸡传染性法氏囊病间接ELISA抗体检测试剂盒的研究[D];中国农业大学;2004年
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