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《浙江大学》 2002年
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胶原——壳聚糖多孔膜的生物相容性研究

胡学庆  
【摘要】: 背景资料 皮肤的烧伤,创伤和慢性溃疡等皮肤病变常常导致局部或大面积的皮肤全层缺损。皮肤创面的修复和愈合是外科领域的基本问题。组织工程化皮肤的出现为大面积烧伤治疗以及皮肤慢性创面和疤痕防治提供了新的解决途径。1980年Yannas和Burke提出了人工皮肤的设计原则,真皮替代物的选择是其中一个重要方面。真皮支架必须具有良好的细胞相容性和组织相容性,在移植创面后应能被机体逐渐降解吸收,并适合受体真皮组织的重建。国外多以胶原一氨基葡聚糖制作人工真皮支架,形成了Integra等产品,但是价格十分昂贵。开发一种价格低廉,又能够满足生物学和临床要求的真皮支架产品十分重要。胶原和壳聚糖在自然界分布广泛,制取相对容易,所需成本不高,两者共混后使材料具有一定的机械强度。我们采用胶原和壳聚糖制成的多孔膜作为真皮支架来研制组织工程化皮肤,对胶原一壳聚糖多孔膜进行生物相容性研究和降解研究十分必要,这也是组织工程化产品安全性评价和标准化的需要。 目的 研究胶原—壳聚糖多孔膜的细胞相容性和组织相容性,考察胶原—壳 浙江大学硕士学位论文 聚糖多孔膜在体内的降解情况,评价胶原一壳聚糖多孔膜作为人工真皮支 架的可能性和安全性,为进一步研制人工皮肤打下基础。 材料和方法 一、胶原一壳聚糖多孔膜的制作: 以牛健为原料制取二型胶原。取粗制甲壳素精制后与NaOH与反应, 提纯获得壳聚糖。以胶原与10%壳聚糖共混,经冻干成膜,以0卫5%戊二 醛交联。同时制备未经交联的和干热交联的胶原一壳聚糖多孔膜。 二、胶原一壳聚糖的细胞相容性研究: 1.真皮成纤维细胞的分离培养: 取包皮环切术后的幼儿包皮酶消化法分离培养真皮成纤维细胞并传 代,以3-4代细胞作为工作细胞。 2.真皮成纤维细胞在胶原一壳聚糖多孔膜上的培养: 将培养的真皮成纤维细胞浓度调整到 5 X 10’冰。将细胞悬液接种于 戊二醛交联的胶原一壳聚糖多孔膜,加 DMEM+10%小牛血清培养基后放 置 37’C,5%CO。孵箱内浸没培养,每天更换培养基。 3.细胞一多孔膜复合物的组织学观察: 取培养7天的细胞一多孔膜复合物制成石蜡切片,HE染色,光学显微 镜下观察并照相。 4.细胞一多孔膜复合物的激光共聚焦显微镜观察: 取培养 7天的细胞一多孔膜复合物,以 10ug/Inl的荧光染料 CFAD- AM100UL染色,檄光共聚焦显微镜检测激光激发的绿色荧光,扫描成像 观察活细胞生长倩况。 二 浙江大学硕士学位论文 三、胶原一壳聚糖多孔膜的组织相容性研究: 1.胶原一壳聚糖多孔膜的动物皮下埋植实验: 以健康家兔12只作为实验动物,随机分成4组,每组3只。将:A、 未交联型;B、干热交联型;C、戊二醛交联型三种胶原一壳聚糖多孔膜于 各组内交叉埋植入兔耳背皮下,每个兔耳背埋植2处,即每种多孔膜于各 组内分别埋植4处。手术后家兔分笼饲养,每天观察并记录全身情况及手 术区变化。 2.组织学观察: 手术后分别于3、7、14、28天任选1组(3只)家兔,切取包括植入 多孔膜在内的全层兔耳组织,常规切片,HE染色,显微镜下观察组织改变 并照相记录。 四、胶原一壳聚糖多孔膜的生物降解研究: 将戊二醛交联型胶原一壳聚糖多孔膜兔耳背埋植28天组织块制成石 蜡切片,免疫组化检测牛1型胶原在组织内的残留情况。显微镜下观察戊 二醛交联型多孔膜兔耳背埋植28天后牛二型胶原在组织中的残留情况来表 征多孔膜在体内的降解倩况。 结 果 一、真皮成纤维细胞——多孔膜复合物的组织学观察 胶原一壳聚糖多孔膜在光镜下呈现红染的多孔结构,网孔分布均匀。 培养7天时真皮成纤维细胞主要集中在多孔膜的表面,靠近多孔膜表面的 网孔内也有细胞长入,但数量不多,细胞沿网孔生长,形态不规则。 3 浙江大学硕土学位论文 二、真皮成纤维细胞一多孔膜复合物激光共聚焦显微镜观察 培养7天的细胞一多孔膜复合物可见到成活的真皮成纤维细胞呈绿色 荧光于多孔膜表面密集生长,形态呈梭形或不?
【学位授予单位】:浙江大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2002
【分类号】:R318.1

【引证文献】
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1 刘伯基;沙宪政;;植入式葡萄糖传感器膜材料壳聚糖与Nafion的组织相容性比较[J];中国组织工程研究与临床康复;2011年47期
中国重要会议论文全文数据库 前1条
1 刘伯基;沙宪政;;植入式葡萄糖传感器膜材料组织相容性研究——壳聚糖与Nafion植入的比较[A];中国生物医学工程学会成立30周年纪念大会暨2010中国生物医学工程学会学术大会报告论文[C];2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前2条
1 刘海涛;斑点叉尾鮰鱼皮胶原的制备及其应用研究[D];安徽工程大学;2010年
2 王安宁;pH与温度响应性聚氨酯的合成、纳米粒子的制备及其对阿霉素和牛血清白蛋白的包封与释放[D];天津理工大学;2013年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前4条
1 杨珺,肖仕初,夏照帆;海绵状胶原膜真皮替代物的研制及实验研究[J];中华烧伤杂志;2002年01期
2 冯祥生,潘银根,谭家驹,阮树斌,杜永军;异种(猪)脱细胞真皮与自体表皮复合移植研究[J];中华整形外科杂志;2000年01期
3 奚廷斐;论组织工程产品的安全性评价[J];中华整形外科杂志;2000年05期
4 刘晋宇,侯立中,颜炜群,杨同书;组织工程化人工复合皮肤的构建[J];中国修复重建外科杂志;2001年04期
【共引文献】
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1 王春华;脱细胞真皮应用的研究现状[J];安徽医学;2004年03期
2 李方奇;袁振奋;杨蔚;;脱细胞异体真皮加自体刃厚皮片移植修复皮肤缺损[J];安徽医学;2007年06期
3 孙涛,王松灵,朱颉,杨新林;人类涎腺细胞在几种生物材料上的生长[J];北京口腔医学;2003年01期
4 祁军;陈安民;郭风劲;孙淑珍;谢柏臻;张伟凯;张树威;;壳聚糖/纳米羟基磷灰石分层复合支架的生物相容性研究[J];北京生物医学工程;2008年01期
5 李文波;张春莲;曹成波;吕荣晖;朱芳莲;李木森;;新型胶原支架材料改性的研究[J];北京生物医学工程;2008年06期
6 张梅梅,陈晓峰,王迎军,赵娜如,张晓凯;CaO-P_2O_5-SiO_2系统溶胶—凝胶生物活性多孔材料的降解特性及生物活性研究[J];玻璃与搪瓷;2003年03期
7 谢肇,许建中,解志杰,罗飞,单建林,朱灏;离心管技术构建的组织工程软骨细胞生物学特性的研究[J];重庆医学;2002年11期
8 潘勇;周跃;李长青;;新型组织工程椎间盘纤维环支架材料的制备和形态学观察[J];重庆医学;2007年02期
9 王建,杨志明,解慧琪,秦廷武;培养软骨、肌肉和骨蜡移植修复生长板缺损的实验研究[J];创伤外科杂志;2002年01期
10 辛雷;苏佳灿;;人工骨修复材料的现状与展望[J];创伤外科杂志;2011年03期
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1 朱明华;曾怡;刘程俊;王林;彭蔷;秦廷武;杨军;车茜;;玻璃化冷冻保存组织工程肌腱修复跟腱缺损的超微结构影响研究[A];自主创新与持续增长第十一届中国科协年会论文集(3)[C];2009年
2 郭振荣;盛志勇;;我国烧伤外科的进展[A];2002年烧伤年会论文汇编[C];2002年
3 柏涛;舒军;;兔自体细胞-载体复合物修复关节软骨缺损的实验研究[A];玉溪市第三届骨科学术研讨会论文汇编[C];2007年
4 柏涛;;骨髓间充质干细胞诱导表达软骨细胞表型的研究进展[A];玉溪市第三届二次骨科学术研讨会论文汇编[C];2009年
5 王欣;刘宝林;华泽钊;;组织工程化皮肤低温保存的重要性及研究进展[A];第五届全国低温生物医学及器械学术大会会议论文集[C];2006年
6 修忠标;林建华;;鹿茸多肽对兔关节软骨细胞体外凋亡的影响[A];中国中西医结合学会脊柱医学专业委员会2008年学术会议论文汇编[C];2008年
7 章培标;侯宜;侯立中;周余来;杨同书;颜炜群;曲福军;;胶原凝胶法同步构建组织工程复合人工皮肤[A];“振兴吉林老工业基地——科技工作者的历史责任”吉林省第三届科学技术学术年会论文集(下)[C];2004年
8 周余来;乔锋利;章培标;侯立中;颜炜群;杨同书;;红外热像扫描技术在组织工程皮肤移植修复中的应用[A];“加入WTO和科学技术与吉林经济发展——机遇·挑战·责任”吉林省第二届科学技术学术年会论文集(下)[C];2002年
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1 孟永春;胶原与生物活性玻璃作用机理及其复合骨修复材料的研究[D];华南理工大学;2010年
2 郭瑞;基因活性真皮替代物的构建及其用于皮肤再生的研究[D];浙江大学;2010年
3 庄颖;组织工程椎间盘的体外初步构建及其生物学性能研究[D];第三军医大学;2011年
4 吴追乐;透骨消痛胶囊含药血清对软骨细胞活性与线粒体凋亡通路及细胞外基质的影响[D];福建中医药大学;2011年
5 李康杰;脱细胞骨基质联合骨髓间充质干细胞修复动物骨缺损实验研究[D];延边大学;2011年
6 周炜;亚麻籽木脂素对动物消化代谢和生长的影响及机制探讨[D];南京农业大学;2008年
7 钟鼎文;针刀松解法对颈椎病兔颈后肌纤维化影响的研究[D];北京中医药大学;2012年
8 肖仕初;促进异种无细胞真皮血管化和体外构建复合皮移植的实验研究[D];第二军医大学;2001年
9 孙安科;同种异体组织工程化软骨的构建及其应用[D];第四军医大学;2001年
10 陈希哲;含孔磷酸钙陶瓷为支架基因转染自体细胞成骨能力研究[D];第四军医大学;2001年
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1 盛英俊;不同持续时间的周期性压力对构建组织工程软骨的影响[D];南京医科大学;2009年
2 吕彩霞;n-HA/CS复合材料的制备、性能表征及其应用研究[D];河北大学;2007年
3 郑月涵;烟草浸润液对人成骨细胞在钛板上黏附增值的影响[D];北京协和医学院;2010年
4 谭羽莹;利用表面改性纳米羟基磷灰石/PLGA材料构建组织工程化骨的实验研究[D];吉林大学;2011年
5 王朝中;PDLLA/β-TCP/PRGD/NGF复合材料诱导PC12细胞ERK1/2蛋白磷酸化表达的研究[D];武汉理工大学;2011年
6 韦海荣;猪膀胱平滑肌细胞和移行上皮细胞的体外培养及支架复合物的构建[D];昆明医学院;2011年
7 李俊华;针刺对大鼠骨骼肌挫伤后组织修复的影响[D];北京体育大学;2011年
8 刘扬;组织工程化构建骨支架材料—无机活性元素支架材料的机械强度的研究[D];安徽医科大学;2011年
9 艾剑雄;扩张器周围构建的自体复合皮修复创面的实验研究[D];重庆医科大学;2011年
10 姜晓鑫;载骨碎补磷酸钙骨水泥的研究[D];西南交通大学;2011年
【同被引文献】
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1 冯亚凯;吴珍珍;;可生物降解聚氨酯在医学中的应用[J];材料导报;2006年06期
2 王树森,胡蕴玉,罗卓荆,刘慧玲,梁伟,章庆俊,阎明,姚庆君;硫酸肝素复合胶原蛋白制备新型神经组织工程支架材料[J];第四军医大学学报;2004年10期
3 王雪娟;唐屹;吴炜誉;徐建军;叶光斗;;戊二醛交联胶原蛋白/PVA复合纤维的结构与性能[J];纺织学报;2007年11期
4 林丽丽;;聚乳酸载药系统的研究进展[J];广东化工;2012年06期
5 苏广宇;刘四新;李从发;;甲壳素/壳聚糖的研究与应用概况[J];广东农业科学;2008年02期
6 唐黎明,戴彧;新型pH及温度敏感性水凝胶[J];高分子学报;2003年03期
7 史向阳,吴世康,孙曹民;疏水化修饰的聚N-异丙基丙烯酰胺高分子的水溶液性质研究[J];高分子学报;1999年02期
8 於秋霞,朱光明,梁国正,杜宗刚,宫兆合;聚ε-己内酯的合成、性能及应用进展[J];高分子材料科学与工程;2004年05期
9 段丽艳;王春鹏;储富祥;;纤维素基可生物降解共混高分子材料的制备和性能[J];高分子材料科学与工程;2008年09期
10 陈莉,杜锡光,赵保中,景遐斌,陈学思;聚羟基乙酸及其共聚物[J];高分子通报;2003年01期
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1 张杰;蛋白类药物海藻酸盐微胶囊的制备及体外释放行为的研究[D];大连理工大学;2007年
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1 刘欣欣;胶原凝胶及壳聚糖基因载体的制备[D];长春理工大学;2011年
2 张联英;几种主要淡水鱼胶原蛋白的制备及其特性研究[D];中国海洋大学;2004年
3 谢慧英;壳聚糖复合材料的制备及其在生物传感器中的应用[D];南昌大学;2007年
4 张彬;壳聚糖—明胶—聚乳酸复合薄膜的制备及其性能研究[D];天津大学;2007年
5 韩鹏举;聚乳酸/OMMT复合材料的热行为研究[D];郑州大学;2012年
【二级参考文献】
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1 张建湘,汤健,徐斌,蔡克勤,马卫东,方月娥,史天义,魏俊;壳聚糖钉固定兔胫骨近端截骨的实验研究[J];生物医学工程学杂志;1998年02期
2 马刚,杨同书,颜炜群,张林,侯立中;复合培养人工皮肤的制备[J];中华皮肤科杂志;1998年02期
3 苏波;赵雪莲;张仕敏;张素贞;葛绳德;;表皮细胞培养与移植研究——表皮细胞分离技术[J];中华整形烧伤外科杂志;1996年02期
4 孙永华;李迟;王春元;覃风均;于东宁;陈忠;王荣;胡杰;吴亚楠;;脱细胞异体真皮与自体薄皮片移植的研究与应用[J];中华整形烧伤外科杂志;1998年05期
5 王旭,王甲汉,吴军,赵阳兵,赵雄飞;复合皮的制作与临床应用[J];中国修复重建外科杂志;1997年02期
【相似文献】
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1 李瑶君,周涵新,陈大俊,邱呈祥;用于皮肤覆盖材料聚氨酯(PU)的研究及应用[J];产业用纺织品;1991年04期
2 李瑶君,周涵新;用于烧伤外科的一种新型皮肤覆盖材料的研制[J];生物医学工程学杂志;1994年03期
3 王建黎,李瓯,徐又一;后处理对聚丙烯中空纤维膜性能的影响(英文)[J];中南民族大学学报(自然科学版);2003年03期
4 郝晓丽;夏延致;纪全;孔庆山;隋坤艳;;海藻酸钙冻干多孔膜的制备研究(英文)[J];科学技术与工程;2010年11期
5 ;多孔膜植人物在人松质骨相交面含矿性物的比例评价[J];国外医学.生物医学工程分册;1994年05期
6 孙丽萍;赵辉;霍丽华;高山;赵经贵;;二氧化钛多孔膜的UV-Vis光谱与光催化性能研究[J];光散射学报;2006年04期
7 徐珍秀,胡春奎,兰盛银;植物组织石蜡切片的扫描电镜观察方法研究[J];武汉植物学研究;1992年04期
8 李明忠,卢神州,张长胜,吴徵宇;明胶/丝素共混多孔膜的制备[J];东华大学学报(自然科学版);2002年03期
9 李先锋,吕晓龙,马世虎,于忠海;热致相分离制备聚偏氟乙烯多孔膜的结构表征[J];天津工业大学学报;2005年05期
10 胡腾;闵敬春;宋耀祖;;微观结构对膜换湿能力影响研究[J];工程热物理学报;2010年02期
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1 高秋英;沈新元;戴东哲;;乙烯-醋酸乙烯共聚物多孔膜的制备[A];上海市化学化工学会2010年度学术年会论文集[C];2010年
2 万灵书;柯蓓蓓;陈鹏程;李青莲;李隽巍;徐志康;;有序多孔膜的多层次界面:结构调控与功能化[A];中国化学会第28届学术年会第15分会场摘要集[C];2012年
3 吴立新;;水滴模板法构筑超分子复合物有序多孔膜[A];2010年两岸三地高分子液晶态与超分子有序结构学术研讨会(暨第十一次全国高分子液晶态与超分子有序结构学术论文报告会)会议论文集[C];2010年
4 王炜;夏珏;王玲;陶杰;;工艺参数对铝的阳极氧化多孔膜的影响[A];纳米材料和技术应用进展——全国第三届纳米材料和技术应用会议论文集(上卷)[C];2003年
5 王炜;夏珏;王玲;陶杰;;铝的阳极氧化纳米多孔膜的制备及工艺参数研究[A];纳米材料和技术应用进展——全国第三届纳米材料和技术应用会议论文集(上卷)[C];2003年
6 万灵书;柯蓓蓓;陈鹏程;李隽巍;徐志康;;有序多孔膜的结构调控与定点功能化[A];2011年全国高分子学术论文报告会论文摘要集[C];2011年
7 陈鹏程;万灵书;柯蓓蓓;徐志康;;硼酸修饰有序多孔膜的制备与葡萄糖的检测[A];2011年全国高分子学术论文报告会论文摘要集[C];2011年
8 张梅;杜春慧;朱宝库;徐又一;;浸没沉淀相转化法制备聚偏氟乙烯多孔膜的多晶型研究[A];第三届中国膜科学与技术报告会论文集[C];2007年
9 王炜;陶杰;陶海军;王玲;;阳极氧化制备TiO_2纳米多孔膜[A];第五届中国功能材料及其应用学术会议论文集Ⅱ[C];2004年
10 丁怀宇;田野;王丽华;刘必前;;热致相分离法制备聚苯硫醚多孔膜[A];2007年全国高分子学术论文报告会论文摘要集(下册)[C];2007年
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1 本报记者 陈敬农 通讯员 程艳;戴松元:风雨过后见“阳光”[N];科技日报;2006年
2 南京工业大学徐南平;无机膜应用领域备受关注[N];中国化工报;2002年
3 山东 苗本秀;直接甲醇燃料电池(DMFC)的剖析[N];电子报;2005年
4 记者 应洪舒;浙江大学皮肤再生材料研究通过鉴定[N];中国医药报;2006年
5 封麟光;迈向21世纪的合成树脂工业[N];中国化工报;2000年
6 南京工业大学 邢卫红;陶瓷膜产业发展任重道远[N];中国化工报;2002年
7 张亮;这种太阳能电池雨天也工作[N];科技日报;2004年
8 武晓东 张蕾;天津工大中空纤维膜制备技术获国家二等奖[N];中国纺织报;2009年
9 记者 尹江勇;我省电池隔膜新技术打破国外垄断[N];河南日报;2009年
10 王景春;电池隔膜新技术打破国外垄断[N];中国化工报;2009年
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1 马英一;微乳液滴模板法构筑有序多孔膜及其在生物体系中的应用[D];吉林大学;2014年
2 李华曜;金属氧化物半导体多孔膜材料光电性能评价的研究[D];华中科技大学;2013年
3 张秀莉;疏水性多孔膜和膜组件气体吸收传质性能及其数学模型的研究[D];北京化工大学;2004年
4 曾敏峰;聚合物辅助倒相法制备壳聚糖微孔膜的研究[D];浙江大学;2004年
5 李明忠;多孔丝素膜的制备及结构、性能研究[D];东华大学;2001年
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1 宫晓娜;嵌入—包埋法改性聚烯烃多孔膜的研究[D];浙江大学;2012年
2 朱春芳;聚烯烃/碳酸钙复合材料多孔膜的研究[D];山东科技大学;2011年
3 郭晓辉;蜂窝状多孔膜的制备及生物功能的研究[D];山东大学;2012年
4 李传俊;经皮给药系统控释膜的制备与表征[D];中南大学;2013年
5 李楠;功能性纳米多孔膜结构及其流体控制性能研究[D];吉林大学;2011年
6 罗震;直接研磨法制备若干漆酚基聚合物及其自组装的研究[D];福建师范大学;2012年
7 刘红梅;聚偏氟乙烯膜的制备与疏水改性[D];华南理工大学;2011年
8 闫俊;聚苯胺多孔膜/贵金属复合材料的制备及其SERS性能研究[D];哈尔滨工业大学;2012年
9 陈寒芳;TiO_2纳米粒多孔膜增敏的压电晶体传感器[D];中南大学;2002年
10 刘惠玉;多孔膜的污染研究[D];天津工业大学;2004年
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