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《浙江大学》 2002年
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肺炎衣原体与动脉粥样硬化关系的研究

章黎苹  
【摘要】: 背景 冠状动脉粥样硬化性心脏病(Coronary artery disease,CAD)是心血管系统的常见病,是目前世界上主要的致死性疾病之一。而CAD的发病基础是动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)。目前公认的与CAD相关的心血管危险因素包括:高脂血症、吸烟、高血压、高血糖、年龄、性别、家族史等。然而据统计大约只有一半CAD的发生与这些危险因素相关,而另一半患者却未能找到任何常见的危险因子。由各种病原体如肺炎衣原体、单纯疱疹病毒、巨细胞病毒等的感染而引起的炎症反应在CAD的发病机制中日益受到关注。 肺炎衣原体(Chlamydia pneumoniae,C.pneumoniae)是常见的细胞内寄生的呼吸道病原体,血清流行病学研究显示它在成人中的抗体阳性率高达 一 50%左右,近来,众多临床与基础研究显示Ceeumonthe感染可能是冠状 动脉慢性炎症及粥样硬化发生的始动因子之一,但这一理论的确立尚需更 多研究的证实。目前,有实验表明Qneumo。劝8能感染体外培养的血管壁 细胞如血管内皮细胞二平滑肌细胞及巨噬细胞,为进一步研究Cpneumonthe 与动脉粥样硬化的关系及其可能机制提供了可能。 血管内局部炎症反应所致的中性粒细胞、淋巴细胞、巨噬细胞的聚集、 粘附及其向内膜下的进一步迁移在动脉粥样硬化的形成及急性冠脉事件的 发生中起了重要作用。而这些过程是由表达于血管内皮细胞表面的各种细 胞因子及粘附分子所介导的。细胞间粘附分子-l(nercellular adhesion mlede-l,IC删-l)及血管内粘附分子-lOaSClar cell adhsion mol刎e l,VCAM1)属于粘附分子中的免疫球蛋白超家族,它们均可表达于血管 内皮细胞表面,介导白细胞与内皮细胞间的粘附。在内皮损伤、炎症刺激 物作用下,内皮细胞表达的ICAM-l及VCAM-l增加,从而增强白细胞与 血管内皮间的粘附作用,促进炎症的发生与发展。在动脉粥样硬化发生时, ICAM-l及 VCAM-l表达增加。 目的 探讨肺炎衣原体是否能感染人脐静脉内皮细胞(hUman UInbilical vein endothlial cells,IIUVECs),检测感染后内皮细胞 ICAM一l及 VCAM*及其信使核糖核酸(inessape ibonucleic acid,InRNA)表达的变化, 以期从细胞和分子水平探讨Cpneumoniae感染在动脉粥样硬化形成中的作 用及其可能机制。 方法用人喉表皮癌阻匪2)细胞培养One。on功e,以vne。on劝e 感染 HUVECs,感染后 36h经透射电镜及聚合酶链反应(POlylnerase chin reaction,PCR)检测有无感染。用流式细胞仪(Flow CytO metry,FCM) 检测感染前p 及感染后 12h、24h、48h、72h IIUVECS表面 ICAMq及 VCAM-l蛋白的表达,并用荧光定量逆转录 PCR(reverse transcriPtion-PCR, 3 一 RTPCR)检测ICAM-1、VCAM-lrll,trvA的变化。 结果 卜Cpc e。onthe感染后,经PCR检测到IIUVECs内存在帅eumonthe 核酸片段,电镜下观察到 IIUVECs内有 Coeumonthe原体、始体及包涵 体,说明 Cpheumoniae能感染并存活于体外培养的HUVECs。 二、FCM检测结果显示结果表明HUVECS表面在正常培养状态下即存 在着ICAM-l 及VCAM-l 蛋白的表达,ICAM-l 的表达相对较高,而 VCAM-l的表达很低。Cpneumoniae感染后 oh、12h、24h、48h及 72h ICAM-l 的平均表达率的平均值分别为74.6o、88.7O、98.lo、95.4O及gi.3o,平 均表达量分别为 3.84f.02、4.31 to.36、9.17士0.90、10.60i0.78及 6.29 士0.46,总表达量分别为 2.87土0.84、3石3士0.37、8.96士085、10.15 士 1.09及 5.75上0.53,统计结果显示感染后 12h至 72h ICAM-l的平均表 达率均较感染前升高O功刀1),其峰值约在感染后2仙;感染后24h、48h 及72h的平均表达量较感染前增加(P<0刀1),其峰值约在感染后48h;感 染后12h至72h各时间点,ICAM-l的总表达量均较感染前升高(P<0.of), 其最大值约在感染后48h。 Cpneumoniae感染后 oh、12h、24h、48h及 72h VCAM-l的平均表达 率的平均值分别为l.27o、3.53o、20.76O、10.6o及8.slO,平均表达量 分别为 l.4ilo.21、2.55fi.13、1.57i0.25、l.34士0.08及 l.96f0.35, 总表达量分别为 0刀17土0.006、0.091士0.068、0.333士0.150、0.135上 0.045、及0.167士0.081。统计结果显示感染后12h至72h,VCAM-l的
【学位授予单位】:浙江大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2002
【分类号】:R541.4

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